王 輝，劉長路

(四川文理學院“特色植物開發(fā)研究”四川省高校重點實驗室，四川達州635000)

1 引言

葛根素是一種異黃酮化合物［1］，主要來源為豆科植物野葛或甘葛藤的根部提取。目前已經(jīng)被證明具有促進血液循環(huán)，提高免疫，增強心肌收縮力，保護心肌細胞，降低血壓，抗血小板聚集等作用［2－3］。因此，從葛根中提取葛根素的研究已有較多的研究報道［4－6］。而粉葛作為日常一種保健功能的中藥材，其中葛根素的含量直接決定其的保健及藥用功效。采用微波輔助乙醇提取粉葛中的葛根素的方法，通過正交實驗對比選擇提取葛根素的最佳提取工藝條件，不但可以確立一種微波提取葛根素的工藝，還可以為粉葛中的葛根素含量檢測提供理論基礎。

2 實驗部分

2.1 儀器與試劑

儀器:紫外分光光度計(日本島津，UV2550)，微波催化合成/萃取儀(上海新儀，MAS－II)。試劑:葛根(粉葛，采購于達州市博愛大藥房)，葛根素分析標準品(阿拉丁試劑)，其余試劑均為分析純。

2.2 葛根素標準曲線的繪制

精密稱取稱取葛根素5.9 mg定容于100 mL，取2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mL 于 25 mL 容量瓶中，95% 乙醇定容搖勻。用紫外－可見分光光度計以95%乙醇試劑作為空白參比，在250 nm處測吸光度。通過回歸方程分析得到葛根素質(zhì)量濃度和吸光度的關系式:y=0.0758x+0.0059，R2=0.9999。如圖1所示，表明葛根素質(zhì)量濃度在5～25 mg/L范圍內(nèi)線性良好。

2.3 超聲波輔助乙醇提取工藝考察

2.3.1 正交實驗設計

真空干燥后的葛根經(jīng)中藥粉碎機粉碎后準確稱取2.00 g分別按照正交實驗L9(34)因素條件(表1)進行提取，提取后進行抽濾除去濾渣，然后將濾液使用95%乙醇定容于100 mL容量瓶中，然后精密量取2.0 mL所以95%乙醇定容于25 mL容量瓶中，搖勻后在250 nm處測其吸光度。

圖1 葛根素標準曲線

表1 正交實驗的因素與水平(設定提取溫度:80℃)

2.3.2 正交實驗結果

按照表一中正交實驗的因子與水平，設計并進行正交實驗，根據(jù)吸光度計算提取含量所得實驗結果如表2所示。

表2 正交實驗結果

從表2分析可見，4個正交實驗因素對白藜蘆醇的提取影響可以看出其中R－D為最大值，說明提取時的料液比是影響提取的關鍵因素;R－B為最小值，說明提取微波功率影響葛根素提取效果最小。綜合以上各因素的影響，粉葛中提取葛根素的4個提取因素含量影響大小的順序為D＞C＞A＞B。并可以確定超聲波提取白藜蘆醇最佳工藝為50% 乙醇、500 W超聲波功率、25 min提取時間以及1∶30的料液比。

3 結果討論

正交實驗結果可以直接看出，微波輔助乙醇提取粉葛中的葛根素的幾個因素都存在著不同大小的影響，其中料液比影響較大，可以認為是由于粉葛中的淀粉較多，隨著加熱的進行，大量淀粉溶出致使葛根素提取受到影響。根據(jù)正交試驗優(yōu)化后的提取條件對葛根素進行提取，在50% 乙醇、500 W超聲波功率、25 min提取時間以及1∶30的料液比的條件下葛根素提取率為0.837%。

［1］張尊聽，王小玲，劉謙光，等.秦嶺太白野葛根異黃酮成分的研究［J］.中國藥學雜志，1999，34(5):301 ～302.

［2］朱應磊，呂欣然.葛根素的藥理學和臨床應用研究進展［J］.中草藥，1997，28(11):693 ～696.

［3］王 靖，吉 民，華維一，等.葛根素研究進展［J］.藥學進展，2003，27(2):70 ～73.

［4］韓 劍，曹 偉，尹 華，等.正交試驗法優(yōu)選葛根素提取工藝［J］.中國醫(yī)院藥學雜志，2007，27(3):332 ～333.

［5］邱 遠，芮 昕，謝翌冬，等.響應面法優(yōu)化超聲提取葛根素工藝［J］.食品科學，2014，35(6):1 ～3.

［6］孫向陽，張永玲，張振巍，等.星點設計－效應面法優(yōu)化葛根素提取工藝［J］.中藥材，2012，35(6):980 ～983.