矯 正，張鐵剛

(黑龍江省家畜遺傳資源保護(hù)中心，哈爾濱150069)

奶牛真菌性乳房炎在世界范圍內(nèi)廣泛存在，而且發(fā)病率有上升的趨勢(shì)。一般認(rèn)為，在慢性頑固性乳房炎中真菌性乳房炎發(fā)病率普遍高于在急性型乳房炎中的發(fā)病率。但是目前仍沒有確切的數(shù)據(jù)來證明，也很少有關(guān)于真菌性乳房炎發(fā)病率與其影響因子之間關(guān)系的研究。因此，本研究的目的在于調(diào)查真菌性乳房炎的流行率、與影響因素(包括飼養(yǎng)方式、氣候條件和病程長短) 之間的關(guān)系，以期為真菌性乳房炎的防治提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 樣品采集

于2007年7月至2013年7月，以哈爾濱市、齊齊哈爾市、牡丹江市和大慶市等地周邊地區(qū)為主采集樣本。樣本采集按照Thrusfield(2005) 的要求進(jìn)行。共采集樣本600 份，包括集約化飼養(yǎng)場(chǎng)和個(gè)體養(yǎng)殖戶。所有樣本均采自表現(xiàn)出臨床型乳房炎癥狀且經(jīng)過連續(xù)10 d 以上治療的奶牛。

1.2 樣本分類

對(duì)飼養(yǎng)方式(散養(yǎng)戶和集約化牛場(chǎng))，發(fā)病季節(jié)(11月至次年3月和4 ～10月)，病程，牛的品種和胎次對(duì)奶牛真菌性乳房炎發(fā)病率的影響進(jìn)行調(diào)查。

表1 采集的臨床型乳房炎樣本地區(qū)分布情況

表2 奶牛樣本分類及數(shù)量情況

1.3 酵母樣真菌和細(xì)菌分離鑒定

由黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院出具的分析報(bào)告數(shù)據(jù)為參照依據(jù)。

1.4 記錄采樣牛主要癥狀

采集樣本時(shí)對(duì)臨床型乳房炎的發(fā)病牛進(jìn)行詳細(xì)的臨床癥狀觀察，便于對(duì)真菌性乳房炎病例進(jìn)行臨床癥狀的查核分析。檢查的主要癥狀包括，有癥狀乳區(qū)數(shù)量和位置，硬結(jié)的有無及數(shù)量，熱痛，乳汁顏色及性狀。

1.5 數(shù)據(jù)分析

使用Epi Info 3.3.2(TM)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析。

2 結(jié)果

具有真菌感染的臨床型乳房炎病牛特征性癥狀包括以下幾方面: (1) 乳區(qū)彌散性腫脹，感覺像面團(tuán)樣或稍稍有些堅(jiān)實(shí)。(2) 乳房根部像粗大的樹枝狀腫大，用手觸摸感覺非常硬。(3) 乳汁多數(shù)分層有乳清析出，半透明狀，奶絮或者奶瓣沉淀于試管底部。(4)很少出現(xiàn)血乳，除非有葡萄球菌或者鏈球菌混合感染。(5)乳房腫脹熱痛幾乎都有，有的出現(xiàn)垂乳現(xiàn)象。

2.1 真菌性乳房炎的地區(qū)分布情況

將采集自不同地區(qū)奶牛乳房炎樣本的真菌分離率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，大慶地區(qū)真菌性乳房炎發(fā)病率最高達(dá)到44.8%(74/165)。這可能與該地區(qū)散養(yǎng)戶中采集的樣本占多數(shù)有關(guān)，而且養(yǎng)殖戶治療時(shí)間也比較長，多數(shù)都在30 d 左右。齊齊哈爾地區(qū)真菌性乳房炎發(fā)病率相對(duì)較低34.3%(49/143)，詳見表3。

表3 不同地區(qū)奶牛真菌性乳房炎發(fā)病率情況

2.2 真菌性乳房炎病因分析

表4 表明，病程不到30 d 的病例中，真菌性乳房炎感染率不到20%。然而，對(duì)于那些病程超過一個(gè)月的病例，這個(gè)比例有所增加，當(dāng)病程為60 d 左右時(shí)，真菌性乳房炎陽性率達(dá)到最高。我們的調(diào)查結(jié)果表明，通過流行病學(xué)方法分析，病程與真菌性乳腺炎發(fā)病率之間有著動(dòng)態(tài)關(guān)系。這個(gè)結(jié)果對(duì)牛真菌性乳房炎的臨床診斷至關(guān)重要。此外還說明，發(fā)現(xiàn)乳腺炎病例應(yīng)該及時(shí)采取有效治療手段，以防它演變?yōu)檎婢匀榉垦锥鴮?dǎo)致嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失和對(duì)公眾健康造成危害。

本次所調(diào)查的600 例臨床乳腺炎病例中，真菌和酵母樣真菌感染率占39.8%，細(xì)菌感染率為59.5%，細(xì)菌混合感染的發(fā)生率為18%，酵母菌和酵母樣真菌混合感染的發(fā)生率占7.8%。當(dāng)病程延長到45 ～60 d 時(shí)，酵母菌和酵母樣真菌感染的發(fā)病率最高，為53.3%。然而病程為10 ～20 d 時(shí)，細(xì)菌感染率87.5%。詳見表4。

表4 不同的病原引起的奶牛乳腺炎發(fā)病率和病程關(guān)系

通過病原學(xué)方法檢測(cè)為酵母菌和酵母樣真菌感染的239 頭具有臨床乳房炎癥狀病牛。統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明，飼養(yǎng)方式、環(huán)境溫度和病程長短明顯影響真菌性乳房炎發(fā)生率。當(dāng)環(huán)境溫度在15 ～35 ℃(56.3%)和0 ～15 ℃(27.5%) 時(shí)，發(fā)病率明顯高于環(huán)境溫度小于0 ℃(15.0%)(P≤0.05)。病程超過45 d(50.8%) 和30 ～45 d(40%) 的發(fā)生率也高于10 ～30 d (14.3%) (P ≤0.05)。在 散 養(yǎng)(47.7%)和集約化飼養(yǎng)(33%) 之間具有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著差異(P≤0.05)。荷斯坦奶牛和澳牛之間的真菌性乳房炎發(fā)病率差異不顯著(P ＞0.05)。1 ～3 胎和大于3 胎的真菌性乳房炎發(fā)病率差異也不顯著(P＞0.05)。說明奶牛真菌性乳房炎發(fā)病率與牛的品種和生產(chǎn)胎次之間沒有直接的聯(lián)系。

3 討論

調(diào)查表明，飼養(yǎng)方式能夠影響真菌性乳房炎發(fā)病率。散養(yǎng)飼養(yǎng)方式具有更高的感染率(47.7%)。在國內(nèi)，散養(yǎng)環(huán)境(擠奶操作不衛(wèi)生和擠奶設(shè)備消毒不嚴(yán)格) 和動(dòng)物個(gè)體衛(wèi)生狀況遠(yuǎn)不如集約化飼養(yǎng)。它可能是兩者之間真菌性乳房炎的發(fā)病率在統(tǒng)計(jì)上具有顯著差異的原因。通常，酵母和酵母樣真菌是條件致病菌，當(dāng)動(dòng)物機(jī)體抵抗力下降時(shí)會(huì)引起感染而發(fā)病。真菌在自然界隨處可見，比如乳腺、手、土壤和水里，而且在18 ～30 ℃很容易生長，這是它們比其他微生物更容易引起感染的主要原因。另外觀察到，奶牛在環(huán)境溫度15 ～35 ℃比15 ℃以下具有更高的陽性率。因此，在黑龍江省晚春和初秋期間(15 ～35 ℃) 真菌性乳房炎發(fā)病率(56.3%)比較高。

表4 表明，病程不到一個(gè)月的病例中，真菌性乳房炎感染率不到15%。然而，對(duì)于那些病程超過一個(gè)月的病例，這個(gè)比例有所增加，當(dāng)病程達(dá)到60 d 左右時(shí)，真菌性乳房炎陽性率驟然增加。我們的調(diào)查結(jié)果表明，通過流行病學(xué)方法分析，病程對(duì)于真菌性乳腺炎發(fā)病率之間有著動(dòng)態(tài)關(guān)系。這個(gè)結(jié)果對(duì)牛真菌性乳房炎的臨床診斷有重要的參考意義。病程45 d 以上的奶牛乳房炎病例由酵母菌或者酵母樣真菌感染的機(jī)率非常高，治療時(shí)可以嘗試按照真菌性乳房炎采取措施。此外還說明，發(fā)現(xiàn)乳腺炎病例應(yīng)該及時(shí)治療。

總之，慢性乳房炎在具有臨床癥狀的情況下，發(fā)生真菌感染的機(jī)率可高達(dá)39.8%。假絲酵母菌(68.2%)是黑龍江省真菌性乳房炎的主要病原體，其中克魯斯念珠菌(29.6%) 和白色念珠菌(12.4%)是真菌性乳房炎的主要流行病原體。我們發(fā)現(xiàn)，散養(yǎng)方式飼養(yǎng)、環(huán)境溫度高(15 ～35 ℃)和疾病病程長(超過30 d) 是霉菌性乳房炎重要的風(fēng)險(xiǎn)因素(OR ＞1)，但是與奶牛品種和胎次沒有必然聯(lián)系。然而，我們的研究也有不足之處，比如樣本數(shù)量不夠大以及采樣地點(diǎn)不夠豐富。因此，我們將繼續(xù)在更廣泛地區(qū)收集更多的樣本，對(duì)我們的結(jié)論進(jìn)一步驗(yàn)證。