李紅彬，陳為龍，費(fèi) 青，林子清

（1.伊通滿族自治縣公安局，吉林 伊通 130700；2.吉林省公安廳，吉林 長(zhǎng)春 130051；3.中國(guó)刑事警察學(xué)院，遼寧 沈陽(yáng) 110035）

一、材料與方法

（一）樣本

400例人右側(cè)肋骨中段約4cm；13種常見動(dòng)物右側(cè)肋骨中段4cm。其中，每種動(dòng)物50只共計(jì)650只動(dòng)物。包括：馬、牛、豬、山羊、綿羊、狗、貓、兔、鵝、鴨、雞、龜、鱉。

（二）試劑與儀器

硫瑾（上海國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司），苦味酸（沈陽(yáng)市強(qiáng)華試劑廠），冰凍切片機(jī)（Bright Instrument Company LTD Huntingdon England，Made In Britain），Nikon Eclipse 80i高倍顯微鏡（日本尼康），病理圖像處理系統(tǒng)（美國(guó)，Motic）。

（三）組織切片的制作

將上述檢材鋸成厚約0.5cm的薄片后，在10%甲醛溶液中固定3天，放入5%硝酸溶液中脫鈣3天（每天更換脫鈣液），水洗12小時(shí)后用冰凍切片機(jī)切成厚約25μm的切片，經(jīng)硫瑾/苦味酸染色后，用光學(xué)顯微鏡在200倍和400倍下拍攝圖片，輸入計(jì)算機(jī)，并用病理圖像處理系統(tǒng)軟件觀察和測(cè)量選定各項(xiàng)指標(biāo)。

（四）指標(biāo)的選擇

為了全面研究肋骨的組織學(xué)形態(tài)特征，我們從環(huán)層骨板、骨單位、以及骨細(xì)胞等多個(gè)層次選定了以下25個(gè)指標(biāo)：200倍鏡下一個(gè)視野的哈氏系統(tǒng)數(shù)量、面積、直徑，舊骨單位數(shù)量，內(nèi)環(huán)骨板厚度、內(nèi)環(huán)骨板相對(duì)厚度、外環(huán)骨板厚度、外環(huán)骨板平均相對(duì)厚度，非哈氏管數(shù)量，骨小梁寬度、骨小梁間距、骨小梁面積百分比等12項(xiàng)數(shù)量指標(biāo)，以及哈氏系統(tǒng)形態(tài)、骨單位排列狀況、舊骨單位的形態(tài)、舊骨單位的排列情況、舊骨單位環(huán)層骨板形態(tài)，以及骨小梁起始部骨單位情況等6項(xiàng)形態(tài)指標(biāo)；在400倍鏡下哈氏系統(tǒng)的環(huán)層骨板數(shù)量、哈氏管直徑、哈氏管面積，舊骨單位的環(huán)層骨板數(shù)量，骨陷窩的數(shù)量、骨陷窩的面積、骨陷窩的排列狀況等7項(xiàng)指標(biāo)。每項(xiàng)指標(biāo)至少觀察4個(gè)視野，取4個(gè)視野的平均值作為該項(xiàng)指標(biāo)的測(cè)量數(shù)據(jù)。

（五）數(shù)理統(tǒng)計(jì)

應(yīng)用SPSS14統(tǒng)計(jì)軟件包對(duì)各項(xiàng)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，包括每種動(dòng)物各項(xiàng)指標(biāo)的平均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差、兩種動(dòng)物間各項(xiàng)指標(biāo)的比較分析、以及二者間的判別分析等。

二、結(jié)果

經(jīng)上述切片染色處理后，切片在顯微鏡下顯示骨質(zhì)顏色為深黃色，骨單位、骨陷窩和骨小管被染成紫褐色。在觀察中發(fā)現(xiàn)并經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，在25項(xiàng)觀測(cè)指標(biāo)中，有哈氏系統(tǒng)數(shù)量（X1）、哈氏系統(tǒng)直徑（X2）、哈氏系統(tǒng)面積、環(huán)層骨板數(shù)（X4）、哈氏管直徑（X5）、哈氏管面積（X6）、骨陷窩數(shù)量、以及骨陷窩面積（X16）、骨小梁寬度、骨小梁面積百分比（X18）、骨小梁間距（X19）等11項(xiàng)指標(biāo)具有明顯的種屬特異性，其他指標(biāo)沒有明顯差異。依據(jù)這些結(jié)果，利用多元判別分析方法，建立了人與動(dòng)物的股骨種屬鑒別的數(shù)學(xué)模型判別公式如下［1］：Y1=人；Y2=動(dòng)物

Y1=-20.4946+0.0614X1+0.2089X2-0.009X3-0.0373X4+0.0403X5-0.0008X6+0.1425X15+0.1842X16+0.0573X17+0.0007X18+0.0054X19

Y2=-25.7922+0.0899X1+0.2308X2-0.0010X3+0.4454X4+0.0390X5+0.0006X6+0.1406X15+0.2280X16+0.0286X17+0.0070X18+0.0003X19

判別正確率：91.2%

三、討論

人與動(dòng)物的種屬鑒別歷來是公安實(shí)際工作中的熱點(diǎn)之一，也是各國(guó)法醫(yī)學(xué)家們研究的重點(diǎn)內(nèi)容。藤田等曾對(duì)焚燒骨骼進(jìn)行了種屬鑒別的研究，［2］［3］認(rèn)為骨骼焚燒后其組織學(xué)形態(tài)特征不能被燒毀，可以根據(jù)其形態(tài)特點(diǎn)進(jìn)行人獸鑒別。Bloom W、Weiss L等對(duì)人的骨組織學(xué)及常見幾種動(dòng)物的骨組織學(xué)特征進(jìn)行了描述，［4］［5］但這些研究都存在動(dòng)物樣本少、不能進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析的問題，也沒有建立種屬鑒別的數(shù)學(xué)判別公式。我們利用人400例和常見動(dòng)物650例個(gè)體的大樣本數(shù)據(jù)，研究改進(jìn)了骨切片制作方法，選擇肋骨為代表，系統(tǒng)探索了人和動(dòng)物肋骨的組織學(xué)形態(tài)特征，發(fā)現(xiàn)兩者組織學(xué)結(jié)構(gòu)存在明顯不同。該結(jié)果與張繼宗的報(bào)道相近，［6］但二者的觀測(cè)指標(biāo)截然不同，在我們所選擇研究的25項(xiàng)指標(biāo)中，有11項(xiàng)測(cè)量指標(biāo)具有明顯的差異，具有各自種屬的特點(diǎn)，這些特點(diǎn)為從微觀水平進(jìn)行人和動(dòng)物的骨骼種屬鑒別奠定了基礎(chǔ)。

根據(jù)人和動(dòng)物肋骨的組織學(xué)特點(diǎn)，通過多元判別分析，我們建立了鑒別人和動(dòng)物骨骼碎片種屬鑒別的數(shù)學(xué)公式，經(jīng)過盲測(cè)分析，其準(zhǔn)確判別率可以達(dá)到91.2%。該公式的建立，為法醫(yī)學(xué)解決可能遇到的需要通過骨骼碎片鑒別是人還是動(dòng)物的各類刑事案件和民事案件提供了新的有效方法和手段。

［1］林子清，費(fèi)青，劉維賢.人及常見動(dòng)物骨骼和牙齒形態(tài)結(jié)構(gòu)特征圖譜［M］.沈陽(yáng)：遼寧教育出版社，2010.

［1］藤田昌宏，谷井広樹，石橋宏.骨組織の法醫(yī)學(xué)的研究（I）焼骨の人獣鑑別［J］.日法醫(yī)誌，1986，（5）.

［2］藤田昌宏，谷井広樹，石橋宏.骨組織の法醫(yī)學(xué)的研究（Ⅱ）焼骨の人獣鑑別［J］.日法醫(yī)誌，1988，（6）.

［3］Bloom W，Lon W.A Text book Histology［M］.Tenth Edition，Philadelphia：W.B.SAUNDERS COMPANY，1975.

［4］Weiss L，Greep RQ.Histology［M］.Forth Edition，USA：McGraw-Hill Inc.，1977.

［5］張繼宗.骨骼種屬鑒定的組織學(xué)研究［J］.法醫(yī)學(xué)雜志，2001，（3）.