鄭之琬，史亞利，鄭小波

（西南大學(xué)榮昌校區(qū)動(dòng)物醫(yī)學(xué)系，重慶榮昌402460）

絲裂霉素在不同年齡段犬眼小梁切除術(shù)中有效量的初探

鄭之琬，史亞利，鄭小波

（西南大學(xué)榮昌校區(qū)動(dòng)物醫(yī)學(xué)系，重慶榮昌402460）

為了研究絲裂霉素在不同年齡段犬眼小梁切除術(shù)中的有效用量，將24只實(shí)驗(yàn)犬按照年齡段分為青幼年犬組、老年犬組，每組各12只，組內(nèi)再隨機(jī)分為A、B、C、D四個(gè)小組，每小組各3只，各組犬的雙眼均行小梁切除術(shù)，術(shù)中A、B、C、D四組使用的絲裂霉素溶液的濃度分別是0.67mg/mL，0.50mg/mL，0.40mg/mL，0.00mg/mL，觀察術(shù)后1個(gè)月的濾過泡形態(tài)并測量眼壓。結(jié)果青幼年犬組的A組均形成功能型濾過泡，B、C、D組形成的多為非功能型濾過泡，且A組與B、C、D組間眼壓差值差異性顯著。老年犬組的A、B組均形成功能型濾過泡，C、D組中形成的多為非功能型濾過泡，且A、B組與C、D組間眼壓差值均為顯著性差異。表明青幼年犬小梁切除術(shù)中的絲裂霉素溶液有效濃度0.67mg/mL，老年犬小梁切除術(shù)中的絲裂霉素溶液有效濃度為0.50mg/mL。

絲裂霉素；犬眼小梁切除術(shù)；濾過泡；眼壓

犬青光眼是眼房液排除受阻、眼壓升高、視神經(jīng)受損的一種犬眼部疾病。病初可能無癥狀，或有輕微的瞳孔散大，短暫的角膜水腫等輕微癥狀。隨著病情的發(fā)展鞏膜深層血管充血，瞳孔散大，對光反射消失。最后晶體脫位，視神經(jīng)乳頭萎縮、凹陷，視力完全消失。純種犬易發(fā)此病，其中比格犬和大丹犬已證明有遺傳特性［1］。

隨著科技的進(jìn)步，在犬青光眼的治療上開始應(yīng)用犬眼小梁切除術(shù)，然而濾過泡瘢痕化是手術(shù)失敗的主要原因［2］。在小梁切除術(shù)中應(yīng)用抗愈合藥物能夠有效提高手術(shù)的成功率，其中最常見的抗愈合藥物是絲裂霉素。

1983年Chen等［3］首次應(yīng)用絲裂霉素于青光眼濾過術(shù)有效的提高了手術(shù)成功率，該藥物是一種細(xì)胞毒性藥物，在抑制濾過泡瘢痕化的同時(shí)，對周邊的組織也有一定的殺傷作用，因此，對其用量有著嚴(yán)格的要求，絲裂霉素很早以前就廣泛用于人眼科臨床［4］。在臨床上根據(jù)術(shù)式不同，患者年齡的大小應(yīng)用絲裂霉素的濃度也有所改變［5］。但是在犬眼科方面，還沒有詳細(xì)的用量說明或類似的研究。本文探索絲裂霉素在不同年齡段犬眼小梁切除術(shù)中的用量，以提高不同年齡段犬手術(shù)的成功率，避免相關(guān)并發(fā)癥的發(fā)生。為犬眼小梁切除術(shù)中絲裂霉素提供臨床用藥指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料Tono-Pen眼壓計(jì)、呼吸麻醉機(jī)、心電監(jiān)護(hù)儀、眼科手術(shù)顯微鏡、顯微眼科手術(shù)器械、裂隙燈、丙泊酚注射液、異氟烷、鹽酸奧布卡因、注射用絲裂霉素、地塞米松眼膏、各年齡段無眼疾的犬（重慶市畜科院提供）。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 犬小梁切除術(shù)（1）術(shù)前檢查：對試驗(yàn)犬進(jìn)行血液常規(guī)和生化等的檢查，當(dāng)試驗(yàn)犬各項(xiàng)指標(biāo)都正常時(shí)方可進(jìn)行手術(shù)，通過術(shù)前檢查24只犬均符合手術(shù)條件；（2）術(shù)前準(zhǔn)備：術(shù)前清潔眼部周圍的毛發(fā)，清洗試驗(yàn)犬眼部，用奧布卡因滴眼做表面麻醉，用Tono-Pen眼壓計(jì)測量眼壓3次，取平均值作為術(shù)前眼壓值。術(shù)前30 min皮下注射阿托品0.04mg/kg體重，15min后靜脈緩慢推注丙泊酚0.6mL/kg體重，誘導(dǎo)麻醉后，氣管插管，異氟烷維持麻醉。對術(shù)眼周圍進(jìn)行常規(guī)消毒，鋪創(chuàng)巾暴露術(shù)眼準(zhǔn)備手術(shù)；（3）做直肌牽引線：用開瞼器常規(guī)開瞼暴露眼球，做上直肌牽引線，使眼球下轉(zhuǎn)，并固定眼球，充分暴露手術(shù)區(qū)域；（4）做球結(jié)膜瓣：以1mL無菌注射器用0.1mL奧布卡因滴眼液做筋膜下表面麻醉，用無菌棉簽按壓使麻醉劑進(jìn)一步擴(kuò)散。用角膜剪做以角膜緣為基底的6～8 mm結(jié)膜瓣，分離筋膜至角膜緣，充分顯露上方鞏膜；（5）做鞏膜瓣：用燒灼器在準(zhǔn)備做鞏膜瓣的切口處燒灼止血，用15度銳刀做以角膜緣為基底的鞏膜瓣，先做兩條垂直于角膜緣的切口，切口約1/2鞏膜厚度，前端直至清亮的角膜，但不能傷及球結(jié)膜瓣。然后做一平行于角膜緣的切口，并將三邊連起，做成3mm×2mm的四邊形。用顯微無齒鑷夾住鞏膜瓣邊緣，盡量翻轉(zhuǎn)，向瞳孔側(cè)輕輕牽拉。用銳刀以幾乎平貼鞏膜的方向輕輕地向前分離，直至角膜區(qū)內(nèi)約0.5mm［6］；（6）放置絲裂霉素棉片：將青幼年犬組及老年犬組，各組12只犬，分別隨機(jī)分成四組，每組3只犬。在手術(shù)中分別使用不同濃度的絲裂霉素溶液，以及生理鹽水空白對照。將浸有絲裂霉素溶液的棉片放置在鞏膜瓣及結(jié)膜瓣下，遮蓋結(jié)膜瓣，放置約5min，然后用300mL生理鹽水徹底沖洗結(jié)膜瓣及鞏膜瓣；（7）切除小梁組織：先用6號針頭由角鞏膜緣刺入前房，放出適量的房水。助手用鑷子夾住鞏膜瓣邊緣輕輕掀起，術(shù)者以鞏膜瓣基底為前界，切除約1.5×1 mm的含有小梁的角鞏膜組織；（8）周邊虹膜根部切除：用鑷子夾住角鞏膜切口中暴露的虹膜組織，輕輕提起，將虹膜剪平行于角鞏膜緣做周邊部虹膜切除，蓋上鞏膜瓣，輕按角膜，恢復(fù)虹膜；（9）縫合鞏膜瓣：將鞏膜瓣復(fù)位。于其兩游離角各用10-0眼科鏟針縫線間斷縫合，打結(jié)。然后將生理鹽水經(jīng)角膜穿刺處注入前房，觀察鞏膜瓣側(cè)邊液體外滲情況。如果外滲過多，應(yīng)加鞏膜瓣縫線，如果外滲過少，表明鞏膜瓣縫線太緊，應(yīng)予調(diào)整；（10）縫合筋膜及球結(jié)膜：筋膜用10-0眼科鏟針縫線間斷縫合，等距的2～3針即可。結(jié)膜用10-0眼科鏟針縫線連續(xù)褥式縫合?？p合完成后，再次向前房注入生理鹽水。并適當(dāng)加壓，觀察結(jié)膜縫合口是否滲水，濾過泡隆起情況。

1.2.2 術(shù)后護(hù)理手術(shù)后7 d內(nèi)每日涂地塞米松眼膏，佩戴伊麗莎白圈，防止動(dòng)物抓撓術(shù)眼，限制活動(dòng)，防止縫線斷裂和晶體異位的情況發(fā)生，每天嚴(yán)密觀察術(shù)部變化情況。

1.2.3 觀察濾過泡的形成情況用裂隙燈對術(shù)后濾過泡的形態(tài)及大小進(jìn)行觀察，用Kronfeld法［7］對濾過泡分級?？煞譃椋汗δ苄詾V過泡Ⅰ型（微小囊狀型）、Ⅱ型（扁平彌散型）；無功能性濾過泡Ⅲ型（瘢痕型）、Ⅳ型（包裹型）。其中Ⅰ型（微小囊狀型）表現(xiàn)為薄壁無血管多呈微囊狀。Ⅱ型（扁平彌散型）表現(xiàn)為扁平、彌散呈蒼白狀，相對壁較厚。Ⅲ型（瘢痕型）表現(xiàn)為無濾過泡或球結(jié)膜充血為隆起，結(jié)膜下瘢痕化，多血管。Ⅳ型（包裹型）局部圓頂狀隆起，呈囊腫樣增生。

1.2.4 測量眼壓用Tono-Pen眼壓計(jì)測量雙眼術(shù)前及術(shù)后的眼壓，并計(jì)算眼壓差。術(shù)后每天定時(shí)測量，每次測量前先校準(zhǔn)眼壓計(jì)，用鹽酸奧布卡因滴術(shù)眼進(jìn)行表面麻醉，測量3次取其平均值作為眼壓值。每次測量完成后對眼壓計(jì)進(jìn)行常規(guī)消毒。

1.2.5 統(tǒng)計(jì)分析方法采用SPSSStatistics 17.0統(tǒng)計(jì)分析軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，結(jié)果以-X±SD表示。

2 結(jié)果

2.1 術(shù)后30 d濾過泡的形成情況術(shù)后30 d青幼年犬組的A組均形成功能型濾過泡，B、C、D組形成的多為非功能型濾過泡。老年犬組的A、B組均形成功能型濾過泡，C、D組中形成的多為非功能型濾過泡（見表1）。

2.2 術(shù)后30 d不同絲裂霉素濃度對眼壓的影響

表1 術(shù)后30 d各組犬濾過泡的形成情況

將30 d后測得的眼壓與術(shù)前相比得出眼壓差，將各組眼壓差值進(jìn)行差異性比較，得出青幼年犬組的A組（0.67mg/mL）與B組（0.50mg/mL）、C組（0.40mg/mL）、D（0.00mg/mL）組間眼壓差值差異性顯著（見表2）。老年犬組A組（0.67mg/mL）、B組（0.50mg/mL）與C組（0.40mg/mL）、D（0.00mg/mL）組間眼壓差值均為顯著性差異（見表3）。說明青幼年犬組0.67mg/mL的絲裂霉素溶液起到了很好的降眼壓效果，老年犬組0.67mg/mL和0.50mg/mL的絲裂霉素溶液起到了很好的降眼壓效果。

表2 青幼犬組不同用藥組之間眼壓差值的差異性比較

表3 老年犬組不同用藥組之間眼壓差值的差異性比較

3 分析與討論

絲裂霉素是一種抗腫瘤藥物，它可以破壞DNA的結(jié)構(gòu)和功能，抑制增殖期細(xì)胞DNA的復(fù)制，并抑制DNA依賴性RNA合成，從而有效地抑制球結(jié)膜下成纖維細(xì)胞的增殖并阻止產(chǎn)生膠原物質(zhì)，以減少青光眼手術(shù)濾過泡的瘢痕形成［8］，提高手術(shù)的成功率。然而，由于絲裂霉素毒性大在抑制成纖維細(xì)胞增值的同時(shí)，也不可避免地破壞了球結(jié)膜及其周圍組織的正常結(jié)構(gòu)和正常生理功能。所以在臨床上應(yīng)該嚴(yán)格控制絲裂霉素的用量，合理使用藥物濃度，減少因?yàn)橛盟幎霈F(xiàn)的并發(fā)癥，進(jìn)一步提高手術(shù)的成功率。

試驗(yàn)中老年犬組A組有3只眼出現(xiàn)術(shù)后角膜水腫，有2只術(shù)眼在術(shù)后3 d出現(xiàn)巨大濾過泡及低眼壓。這些并發(fā)癥的產(chǎn)生，因?yàn)樵摻M絲裂霉素濃度過高抑制了角膜上皮細(xì)胞的愈合的同時(shí)，還可破壞睫狀體上皮的線粒體及損傷睫狀體神經(jīng)，使其功能減退，從而角膜水腫、出現(xiàn)傷口漏、低眼壓并發(fā)癥［9］。試驗(yàn)A組0.67mg/mL的濃度對于老年犬來說濃度過高，而老年犬組B組0.50mg/mL的濃度均形成了功能性濾過泡，且降眼壓效果顯著，并發(fā)癥少。在術(shù)后30 d，試驗(yàn)A組，在青幼年犬組、老年犬組都產(chǎn)生功能性濾過泡，而對照組D組都產(chǎn)生非功能性濾過泡并且眼壓明顯高于A組，說明A組絲裂霉素濃度在0.67 mg/mL時(shí)，對濾過泡瘢痕化有明顯的抑制作用，從而有效的保證了手術(shù)的成功。然而，老年犬A組術(shù)眼均出現(xiàn)了并發(fā)癥，說明在老年犬中0.67mg/mL的絲裂霉素其濃度過高，該濃度對青年犬組和幼年犬組均形成了功能性濾過泡，且降眼壓效果顯著，并發(fā)癥少。實(shí)驗(yàn)C組，除老年犬組一只術(shù)眼形成功能性濾過泡外，其他術(shù)眼都為非功能性濾過泡，并且眼壓和對照組差異不顯著，說明0.40mg/mL的絲裂霉素其對術(shù)后濾過泡瘢痕化無有效的抑制作用。

在抗青光眼手術(shù)中應(yīng)用絲裂霉素的研究的重點(diǎn)不僅僅在于其濃度的選擇，還要考慮棉片放置的位置、用藥時(shí)間、術(shù)部傷口的沖洗量、清除殘余絲裂霉素的程度、傷口嚴(yán)密縫合等一系列因素，以求最適宜的用藥方案，防止并發(fā)癥的發(fā)生及減輕藥物的毒副作用，確保手術(shù)的安全性，有效提高手術(shù)成功率。

青幼年犬眼小梁切除術(shù)中的絲裂霉素溶液有效濃度為0.67mg/mL，老年犬眼小梁切除術(shù)中的絲裂霉素溶液有效濃度為0.50mg/mL。

［1］侯加法.小動(dòng)物疾病學(xué)［M］.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2002：316.

［2］Ourmans S.Efieeta of aminopropionitrile on glaucoma filter blebs inrabbits［J］.Ophthalmic Surg，1998，19（9）：649-652.

［3］Chen CW.Enhanced intraocular pressure controlling effective?ness of trabeculectomy by local application of mitomycin-C［J］. Asia-Pacific Acad Ophthalmol，1983，9：172.

［4］Mandal A K，VJalton D S，John T，etal.Mitomycin C-augmented trabeculectomy in refractory congenital glaucoma［J］.Ophthalmolo?gy，1997，104（6）：996.

［5］李霞，高曉唯，王瑞夫，等.絲裂霉素在青光眼濾過術(shù)中的用量控制及臨床應(yīng)用［J］.眼外傷職業(yè)眼病雜志，2007，29（10）：783.

［6］許悅鈞，祁瑩.小梁切除術(shù)治療青光眼的臨床分析［J］.中國醫(yī)藥指南，2013，11（20）：177.

［7］Kronfeld pC.Functional characteristics of surgically produced outflow channels［J］.Trans Am Acad Ophthalmol Otolaryngol，1969，73：177-193.

［8］Perkins T W，Gangnon R，Ladd W，et al.Trabeculectomy with mitomycin C：Intermediate-term results［J］.JGlaucoma，1998，7：230.

［9］熊鳳枝.絲裂霉素C與青光眼濾過術(shù)后低眼壓的關(guān)系［J］.眼外傷職業(yè)眼病雜志，2004，26（9）：623-624.

Study on the Effective DosageofM itom ycin in Canines Eyes Trabeculectom y in Different Ages

ZHENG Zhi-wan，SHIYa-li，ZHENG Xiao-bo
（Departmentof Veterinary Medicine，Southwest University，Rongchang Campus，Chongqing 402460，China）

In order to study the effective dosage ofmitomycin C in differentages of canine trabeculectomy，we divided 24 ex?perimental dogs into 2 groups:younger and older groups according to their age.Each grouphad 12 dogs，which were divided into 4 sub-groups of A，B，C，and D with 3 dogs each subgroup.And then their eyeswere done trabeculectomy.The concentration ofmito?mycin for the 4 groupswas 0.67mg/m L，0.50mg/m L，0.40mg/m L，and 0.00mg/mL，respectively.The form of filtering bleb was ob?served，and the intraocular pressurewasmeasured onemonth later.Indicated that groupA of the puppy and youth formed function?al filtering bleb，and groupB，C，D formed non-functional one.There was significant difference in intraocular pressure between groupA and groupB，C，D.GroupA and B of elderly dogswere formed functional filtering bleb，and groupC，D formed the nonfunctional one.And there was significant difference in intraocular pressure between groupA，B and groupC，D.Our data showed that the effective concentration ofmitomycin solution in trabeculectomy for puppy and young dog is 0.67 mg/mL，and is 0.50 mg/ m L for older dogs.

mitomycin；canines eyes trabeculectomy；filtering bleb；intraocular pressure Corresponding au thor：ZHENG Xiao-bo

S858.292

A

0529-6005（2015）12-0073-03

2015-08-10

鄭之琬（1990-），男，獸醫(yī)師，碩士，主要從事小動(dòng)物外科眼科生殖調(diào)控方向研究，E-mail：18623142171@163.com

鄭小波，E-mail：oppyp@163.com