張香齋，張艷英，張召興，史秋梅，賈青輝，李蘊(yùn)玉，李佩國(guó)

（河北科技師范學(xué)院河北省預(yù)防獸醫(yī)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河北昌黎066600）

河北省蛋雞群ALV p27抗原ELISA檢測(cè)

張香齋，張艷英，張召興，史秋梅，賈青輝，李蘊(yùn)玉，李佩國(guó)

（河北科技師范學(xué)院河北省預(yù)防獸醫(yī)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，河北昌黎066600）

禽白血?。ˋvian Leukusis，AL）是由反轉(zhuǎn)錄病毒科禽白血病/肉瘤病毒群病毒引起的禽類(lèi)多種腫瘤性疾病的總稱(chēng)，可引起感染雞免疫抑制和多組織器官發(fā)育遲緩、萎縮以及腫瘤等，造成雞的生產(chǎn)性能下降甚至死亡，由雞分離的ALV劃分為A、B、C、D、E、J六個(gè)亞群。自2002年蛋雞群發(fā)現(xiàn)禽白血病以來(lái)，全國(guó)各地頻發(fā)，特別是自2009年以來(lái)，湖北、山東等地雞白血病疑似病例頻發(fā)，雞群ALV的感染率高達(dá)60%，病死率高達(dá)50%以上［1］。崔治中報(bào)道，目前A/B亞群、J亞群ALV在中國(guó)均存在普遍感染［2］，尤其是致病力較強(qiáng)的J亞群ALV腫瘤發(fā)病率較高，對(duì)中國(guó)養(yǎng)禽業(yè)造成了巨大危害。目前沒(méi)有疫苗和有效藥物可預(yù)防和治療該病，因此，控制AL的主要方法是通過(guò)病原檢測(cè)，淘汰陽(yáng)性雞，凈化種群。為此，作者對(duì)在河北省不同地區(qū)蛋種雞場(chǎng)、商品蛋雞場(chǎng)和疑似禽白血病的蛋雞場(chǎng)分別采集樣品，進(jìn)行p27抗原檢測(cè)，以了解河北省蛋雞ALV感染及流行現(xiàn)狀，為禽白血病的凈化提供參考。

1 材料與方法

1.1 樣品采集河北省唐山、保定、石家莊、邢臺(tái)、邯鄲等地區(qū)11個(gè)種雞場(chǎng)種蛋2 847枚，9個(gè)商品代蛋雞場(chǎng)商品蛋1 656枚。從秦皇島盧龍、昌黎、山海關(guān)和滄州泊頭等地11個(gè)養(yǎng)雞場(chǎng)分別采集疑似禽白血病的病死雞腫瘤組織（肝臟、脾臟、腎臟）39份。

1.2 試劑禽白血病p27抗原ELISA檢測(cè)試劑盒，購(gòu)自美國(guó)IDEXX公司。

1.3 試驗(yàn)方法參照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

2 結(jié)果與分析

2.1 種雞場(chǎng)檢測(cè)結(jié)果11個(gè)種雞場(chǎng)檢測(cè)結(jié)果顯示，有54.5%的雞場(chǎng)檢測(cè)出ALV p27抗原陽(yáng)性樣本，以保定地區(qū)雞場(chǎng)陽(yáng)性率最高，達(dá)100%（2/2），石家莊、唐山、邯鄲、邢臺(tái)等地雞場(chǎng)陽(yáng)性率分別為66.7%、50.0%、33.3%、0；個(gè)體陽(yáng)性率差異較大，其中石家莊1號(hào)雞場(chǎng)個(gè)體陽(yáng)性率高達(dá)66.9%（453/677），保定1號(hào)、石家莊3號(hào)、保定2號(hào)、唐山1號(hào)、邯鄲2號(hào)場(chǎng)陽(yáng)性率分別為15.2%、13.3%、1.6%、1.3%、1.1%，其余5個(gè)種雞場(chǎng)未檢測(cè)到陽(yáng)性樣品（表1）。

表1 種雞場(chǎng)檢測(cè)

2.2 商品代蛋雞場(chǎng)檢測(cè)結(jié)果由表2可見(jiàn)，9個(gè)商品代雞場(chǎng)中有4個(gè)雞場(chǎng)檢出p27抗原陽(yáng)性樣本，陽(yáng)性率達(dá)44.4%，其中保定地區(qū)雞場(chǎng)陽(yáng)性率最高，達(dá)100%（2/2），邢臺(tái)和石家莊地區(qū)雞場(chǎng)陽(yáng)性率分別為50.0%、33.3%，邯鄲地區(qū)未檢出；從個(gè)體陽(yáng)性率分析，保定地區(qū)1號(hào)場(chǎng)最高，達(dá)16.8%（31/ 184），邢臺(tái)2號(hào)、保定2號(hào)和石家莊1號(hào)場(chǎng)分別為3.3%、2.2%和1.1%，而其他場(chǎng)均未檢測(cè)到陽(yáng)性樣品。

2.3 病死雞腫瘤組織檢測(cè)結(jié)果由表3可見(jiàn)，11個(gè)疑似AL蛋雞場(chǎng)中39份被檢樣品中有32份ALV p27抗原陽(yáng)性，檢出率為82.1%。

表2 商品代蛋雞場(chǎng)檢測(cè)

表3 病死雞腫瘤組織樣品檢測(cè)

3 討論

目前，國(guó)內(nèi)外已經(jīng)建立了許多禽白血病的檢測(cè)方法，如酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、PCR、RT-PCR、原位雜交（ISH）、間接免疫熒光（IFA）等，其中ELISA方法具有操作簡(jiǎn)便，成本相對(duì)較低，所需時(shí)間短等特點(diǎn)。奚德華等［3］報(bào)道，ELISA是適合規(guī)模化檢測(cè)且便于推廣應(yīng)用的檢測(cè)方法，該方法更適合作為養(yǎng)殖企業(yè)觀(guān)察雞群感染ALV程度的監(jiān)測(cè)工具以及凈化時(shí)的批量檢測(cè)工具。崔治中等［4］、秦愛(ài)建等［5］以及陳福勇等［6］均利用ELISA方法檢測(cè)p27抗原或各亞群抗體進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查。本研究選用ELISA方法對(duì)河北省蛋雞場(chǎng)p27抗原進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查。

XUBR等［7］首次報(bào)道了國(guó)內(nèi)蛋雞骨髓細(xì)胞瘤型J亞群禽白血病病例。楊鳳等［8］報(bào)道山東各品系蛋雞群p27抗原陽(yáng)性率達(dá)19.36%。白海瑛［9］、楊峰等［10］分別報(bào)道，貴陽(yáng)、北京等地雞場(chǎng)禽白血病平均感染率分別為27.2%和2.39%。張淼潔等調(diào)查的4個(gè)地區(qū)進(jìn)口雞群中均存在ALV感染［11］。本研究表明，河北省蛋種雞場(chǎng)陽(yáng)性率較高，達(dá)54.5%（6/11），且不同地區(qū)間雞場(chǎng)陽(yáng)性率和個(gè)體陽(yáng)性率差異均較大，其中保定地區(qū)雞場(chǎng)陽(yáng)性率最高（100%），石家莊1號(hào)場(chǎng)的雞個(gè)體陽(yáng)性率高達(dá)66.9%（453/677），河北省商品代雞場(chǎng)陽(yáng)性率高達(dá)44.4%（4/9），保定1號(hào)場(chǎng)個(gè)體陽(yáng)性率最高達(dá)16.8%（31/184）。不同地區(qū)、不同雞場(chǎng)間存在較大差異，可能由于不同地域雞場(chǎng)引種來(lái)源不同、雞場(chǎng)管理水平不同等原因所致。

羅明星等［12］報(bào)道，貴州省某雞場(chǎng)肝臟樣本的禽白血病病原核酸檢出率達(dá)到91.6%。張康等［13］（2013）對(duì)華東北部地區(qū)禽腫瘤病進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，禽白血病在臨床上感染率較高。本研究檢測(cè)的秦皇島及滄州等地蛋雞場(chǎng)的39份疑似AL病死雞腫瘤組織（肝臟、脾臟、腎臟）p27抗原陽(yáng)性率為82.1%（32/39），與上述不同地區(qū)的報(bào)道基本一致。

4 小結(jié)

本研究從種雞場(chǎng)、商品代蛋雞場(chǎng)和疑似病料組織中均檢測(cè)到ALV p27抗原陽(yáng)性樣品，且種雞場(chǎng)陽(yáng)性率高，表明河北省蛋種雞禽白血病感染情況比較普遍，感染率較高，潛在的流行威脅不容忽視，應(yīng)加強(qiáng)種群凈化，達(dá)到有效防制本病地目的。

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S852.65+9.3

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0529-6005（2015）12-0046-02

2014-04-28

河北省蛋雞產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)專(zhuān)項(xiàng)（2014553957）；河北省高校百名優(yōu)秀創(chuàng)新人才支持計(jì)劃Ⅱ（13R2-112）；秦皇島市農(nóng)業(yè)科學(xué)院資助項(xiàng)目（2015-15）

張香齋（1970-），女，教授，碩士，主要從事禽類(lèi)疫病研究，E-mail：zhangxiangzhai@163.com

李佩國(guó)，E-mail：lpeiguo@163.com