劉小瑜，蘇子劍，王聰仁，潘群雄（福建醫(yī)科大學(xué)附屬泉州第一醫(yī)院腫瘤外科，福建 泉州 362000）

近年，有學(xué)者提出腫瘤的發(fā)生、發(fā)展不僅取決于腫瘤細(xì)胞本身，而且還取決于腫瘤細(xì)胞賴以生存的土壤，即腫瘤微環(huán)境（Tumor microenvironment），免疫和炎性反應(yīng)均可構(gòu)成腫瘤微環(huán)境的基本特征[1-2]。而炎性反應(yīng)在某些類型的腫瘤的發(fā)展中起著重要的作用，補(bǔ)體系統(tǒng)在炎性反應(yīng)過(guò)程中自然而然成為主要參與者[3]。補(bǔ)體系統(tǒng)既可對(duì)腫瘤的生長(zhǎng)提供保護(hù)機(jī)制，亦有抑制腫瘤生長(zhǎng)的作用。研究表明CD88可提供腫瘤生長(zhǎng)所需的抑制性免疫微環(huán)境[4]。

1 CD88 的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)

CD88屬于G蛋白偶聯(lián)受體（Gprotein coupled receptor，GPCR），存在于細(xì)胞膜表面，含有7次跨膜結(jié)構(gòu)，是一個(gè)由74個(gè)氨基酸組成的糖肽。在中性粒細(xì)胞上的CD88共由350位氨基酸組成，其中37位組成N端膜外區(qū)，44位構(gòu)成c端胞內(nèi)區(qū)，7個(gè)TMD在20～27位氨基酸之間，6個(gè)連接突環(huán)i1最短，e2最長(zhǎng)。在el-109與e2-188兩個(gè)Cys間形成一個(gè)二硫鍵，一個(gè)N-連糖位于N端第5位殘基上。中性粒細(xì)胞上的CSaR的分子量在40～49 kDa之間；而嗜酸性粒細(xì)胞上該受休的分子量較中性粒細(xì)胞多5～8 kDa[5-6]。CD88通過(guò)兩個(gè)結(jié)合位點(diǎn)與C5a結(jié)合，第1個(gè)識(shí)別位點(diǎn)直接作用于配體或間接通過(guò)改變配體的構(gòu)象，通過(guò)N端與C5a的二硫鍵結(jié)合，使C5a的C末端充分作用并活化CD88的第二位點(diǎn)，介導(dǎo)一系列信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。其中CD88上的7個(gè)跨膜螺旋區(qū)也是配體結(jié)合、G蛋白活化、信號(hào)傳導(dǎo)的關(guān)鍵部位[7]。

2 CD88 的生物學(xué)特性

CD88又稱C5aR，在人和嚙齒類動(dòng)物的實(shí)質(zhì)器官都有表達(dá)，特別是肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞、肺平滑肌細(xì)胞、肺毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞（PVEC）、支氣管上皮細(xì)胞和肺泡上皮細(xì)胞等，在急性肺損傷、膿毒血癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、腎小球腎炎、腫瘤等病理生理過(guò)程中發(fā)揮重要作用。Haviland和McCoy等率先在血管平滑肌細(xì)胞、人肺支氣管上皮細(xì)胞、肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)了CD88的表達(dá)[8]。Fayyazzi等發(fā)現(xiàn)在枯否氏細(xì)胞和肝星形細(xì)胞存在廣泛表達(dá)，在肝臟纖維化和炎性反應(yīng)中發(fā)揮重要作用[9]。CD88的配體C5a，C5a是補(bǔ)體成分c5的活化產(chǎn)物，含74個(gè)氨基酸殘基，過(guò)敏毒素C5a具有強(qiáng)烈的趨化作用，C5a只有與CD88結(jié)合才能被激活，進(jìn)而引發(fā)一系列生物學(xué)功能[10]，刺激白細(xì)胞定向移行；促進(jìn)靶細(xì)胞釋放溶酶體酶、白三烯（LT）、前列腺素（PG）、5一羥色胺、組胺、超氧離子、IL一1、IL-6等多種生物活性物質(zhì)，引起平滑肌收縮、血管舒張、毛細(xì)血管通透性增加等一系列生理改變。

3 CD88 在腫瘤中的表達(dá)情況

C5a通過(guò)CD88誘導(dǎo)白細(xì)胞趨化來(lái)制造腫瘤生長(zhǎng)所需的微環(huán)境。C5a是在補(bǔ)體系統(tǒng)的激活過(guò)程中由C5轉(zhuǎn)化形成的，它的觸發(fā)被認(rèn)為可能是針對(duì)癌細(xì)胞的[11]。Kasthuri等人通過(guò)建立荷瘤小鼠模型，在小鼠身上的癌細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)存在由組織因子觸發(fā)的這種級(jí)聯(lián)反應(yīng)[12]。Zwirner等發(fā)現(xiàn)CD88的表達(dá)可誘導(dǎo)上皮細(xì)胞炎性反應(yīng)和感染，在肝癌的標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)CD88功能性表達(dá)，而在正常肝細(xì)胞中未表達(dá)[13]。Hidetoshi Nitta等通過(guò)免疫組化研究在225例人類癌癥標(biāo)本中CD88的表達(dá)情況[14]，發(fā)現(xiàn)在鱗狀細(xì)胞癌，腺癌和移行細(xì)胞癌中存在CD88表達(dá)，但在不同部位的腫瘤細(xì)胞中CD88陽(yáng)性百分比各不相同。在結(jié)腸，膽管，腎臟和前列腺癌中，超過(guò)50%的情況下檢測(cè)到CD88陽(yáng)性。Markiewski等通過(guò)建立小鼠子宮頸癌模型，發(fā)現(xiàn)補(bǔ)體C5a和CD88在各種疾病中發(fā)揮著重要的作用，包括慢性炎性反應(yīng)和宮頸癌腫瘤的發(fā)生出現(xiàn)CD88的過(guò)度激活[15]。Mohd Noor等通過(guò)建立犬乳腺癌模型，經(jīng)PCR分析發(fā)現(xiàn)在腫瘤的病理切片中均存在CD88表達(dá)。相反，在犬乳腺正常組織未表達(dá)CD88，提出CD88的激活促進(jìn)腫瘤的發(fā)展[16]。Markiewski等通過(guò)小鼠子宮頸癌模型發(fā)現(xiàn)使用選擇性拮抗劑抑制CD88表達(dá)引起腫瘤明顯縮小。Gu J等發(fā)現(xiàn)CD88在非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞的表達(dá)顯著高于正常支氣管上皮細(xì)胞，而且CD88高表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移正相關(guān)，CD88高表達(dá)患者5年總體生存率明顯低于CD88低表達(dá)組，多變量分析顯示CD88表達(dá)是獨(dú)立預(yù)后因素[17]。CD88的表達(dá)可能與腫瘤存在一定關(guān)系，但CD88是否在腫瘤細(xì)胞中存在特異性表達(dá)，尚無(wú)明確定論。

4 CD88 的作用機(jī)制

4.1 CD88與基質(zhì)金屬蛋白酶的關(guān)系：基質(zhì)金屬蛋白酶對(duì)于癌細(xì)胞向周圍組織侵襲不可缺少的，Hidetoshi Nitta等通過(guò)對(duì)比經(jīng)C5a刺激和未經(jīng)C5a刺激的人膽管癌細(xì)胞培養(yǎng)基中MMPs的濃度，發(fā)現(xiàn)未經(jīng)C5a刺激組MMPs濃度明顯低于經(jīng)C5a組，推測(cè)CD88可能是通過(guò)與C5a相互作用從而促進(jìn)基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）的釋放，進(jìn)而增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞的增殖及轉(zhuǎn)移能力。Nabha SM等通過(guò)Transwell小室發(fā)現(xiàn)C5a能明顯增強(qiáng)表達(dá)CD88癌細(xì)胞的侵襲能力，而當(dāng)加入MMP抑制劑GM6001后，癌細(xì)胞的增殖及向外侵襲的能力明顯受到阻礙而終止。Hidetoshi Nitta等又經(jīng)過(guò)對(duì)基質(zhì)金屬蛋白酶表達(dá)陣列分析顯示C5a促進(jìn)人黏液表皮樣癌MEC細(xì)胞中的MMP-1，3，9，10，和13顯著分泌。同時(shí)在MEC（Microvascular Endothelial Cells）中發(fā)現(xiàn)，在C5a的刺激下MEC的侵襲能力增加了3.2倍，同時(shí)MMP-8釋放量增加3.7倍，提出CD88促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)主要機(jī)制可能是通過(guò)CD88刺激腫瘤細(xì)胞大量分泌基質(zhì)金屬蛋白酶，進(jìn)而促進(jìn)了腫瘤細(xì)胞的增殖。

4.2 CD88與髓源性抑制細(xì)胞的關(guān)系：髓源性抑制細(xì)胞（Myeloidderived suppressor cells，MDSCs）是骨髓來(lái)源的一群異質(zhì)性細(xì)胞，是樹(shù)突狀細(xì)胞（dendritic cells，DCs）、巨噬細(xì)胞和（或）粒細(xì)胞的前體，具有顯著抑制免疫細(xì)胞應(yīng)答的能力。在腫瘤、感染、炎性反應(yīng)、敗血癥、外科損傷等其他病理?xiàng)l件下，受細(xì)胞因子的作用，這些髓系來(lái)源的前體細(xì)胞成熟受阻，因而停留在各個(gè)分化階段，成為具有免疫抑制功能的MDSCs。MDSCs作為重要的免疫調(diào)節(jié)細(xì)胞，被認(rèn)為是腫瘤免疫逃逸機(jī)制的關(guān)鍵。Gabrilovich等建立荷瘤小鼠模型，降低MDSCs在腫瘤組織中的數(shù)量，導(dǎo)致腫瘤生長(zhǎng)的顯著延遲[18]。Markiewski等研究發(fā)現(xiàn)髓源性抑制細(xì)胞在炎性反應(yīng)中受CD88的配體C5a調(diào)節(jié)的[19]，Maciej等通過(guò)研究免疫系統(tǒng)是否通過(guò)調(diào)節(jié)髓源性抑制細(xì)胞來(lái)抑制荷瘤小鼠上的C5a表達(dá)發(fā)現(xiàn)在正常健康小鼠和荷瘤小鼠身上發(fā)現(xiàn)MDSCs均表達(dá)CD88。而且這些受體部分存在于腫瘤相關(guān)的MDSCs上，這表明MDSCs經(jīng)常暴露在腫瘤微環(huán)境中c5a的刺激。C5a趨化抑制腫瘤生長(zhǎng)的細(xì)胞的能力受類似于中性粒細(xì)胞的MDSCs亞群（（PMN MDSCs）所限制[20]。相反，似單核細(xì)胞的MDSCs亞群（Mo MDSCs）卻不對(duì)C5a產(chǎn)生影響，PMN MDSCs 抑制C5a趨化其他抗腫瘤細(xì)胞，介導(dǎo)了腫瘤免疫逃逸的機(jī)制。但是Markiewski等卻發(fā)現(xiàn)Mo MDSCs在C5a的刺激下，釋放出活性氧（ROS）和活性氮（RNS），從而介導(dǎo)抗腫瘤作用。因此，C5a介導(dǎo)的Mo MDSCs釋放ROS和生產(chǎn)RNS顯然有助于免疫應(yīng)答中的腫瘤抑制作用。然而，髓源性抑制細(xì)胞是抑制C5a而介導(dǎo)腫瘤免疫逃逸，促進(jìn)了腫瘤的生長(zhǎng)。還是C5a誘導(dǎo)髓源性抑制細(xì)胞發(fā)生抗腫瘤作用，尚需進(jìn)一步論證。但可以確定的是，C5a與髓源性抑制細(xì)胞的相互作用參與腫瘤的發(fā)生發(fā)展。Markiewski等從CD88缺陷的小鼠身上分離出的MDSCs無(wú)法抑制腫瘤細(xì)胞的增殖[21]。Maciej M等從缺乏CD88荷瘤小鼠身上分離出的MDSCs，對(duì)抑制具抗腫瘤作用的T細(xì)胞的只有低水平的抑制能力，無(wú)法抑制腫瘤的增殖。從而推測(cè)，C5a可能是通過(guò)先作用于MDSCs上的CD88，進(jìn)而引發(fā)MDSCs產(chǎn)生一系列生物學(xué)效應(yīng)，進(jìn)而影響了腫瘤的生長(zhǎng)。

4.3 CD88與T細(xì)胞：Jason Dunkelberger等通過(guò)建立小鼠疾病模型敲除小鼠CD88表達(dá)對(duì)同種異體器官移植實(shí)驗(yàn)、自身免疫性腦脊髓炎、過(guò)敏性哮喘和病毒感染等疾病通過(guò)綠色熒光蛋白（GFP）敲進(jìn)小鼠細(xì)胞內(nèi)，并且用GFP作為替代標(biāo)記檢測(cè)CD88mRNA的表達(dá)。通過(guò)CDNA探針檢測(cè)，在T細(xì)胞核的周圍區(qū)域，發(fā)現(xiàn)GFP表達(dá)，在其他細(xì)胞未檢測(cè)到，從而認(rèn)為在細(xì)胞內(nèi)CD88可以發(fā)出信號(hào)促進(jìn)T細(xì)胞的活化和分化，對(duì)T細(xì)胞免疫應(yīng)答產(chǎn)生影響[22]，但機(jī)制尚未明確。C5a可募集髓源性抑制細(xì)胞來(lái)抑制CD8 + T細(xì)胞抗腫瘤反應(yīng)，表明其間接保護(hù)了癌細(xì)胞避開(kāi)抗腫瘤CD8 + T細(xì)胞的作用，進(jìn)而促進(jìn)了腫瘤的生長(zhǎng)。Markiewski等通過(guò)使用CD88拮抗劑處理在小鼠中存在CD8 + T細(xì)胞的腫瘤的實(shí)驗(yàn)，證實(shí)C5a通過(guò)抑制T細(xì)胞的抗腫瘤反應(yīng)，促進(jìn)了腫瘤的生長(zhǎng)。Lalli等研究結(jié)果顯示，C5a結(jié)合T細(xì)胞上的C5aR后，對(duì)于T細(xì)胞的活化和增殖是必須的，甚至可以防止T細(xì)胞凋亡。CD88與T細(xì)胞的關(guān)系，以及兩者在腫瘤的作用及機(jī)制，尚需進(jìn)一步研究。

補(bǔ)體系統(tǒng)中CD88可能參與腫瘤免疫， CD88可能可作為抗腫瘤治療的新靶點(diǎn)。隨著對(duì)CD88研究的不斷深入，可能對(duì)腫瘤的發(fā)生發(fā)展機(jī)制及治療提供新的思路和想法，應(yīng)用抗CD24單克隆抗體或者去除、降低CD88表達(dá)可能是治療表達(dá)CD24腫瘤的一種新方案。

[1] Hanahan D,Weinberg RA.The hallmarks of cancer[J].Cell,2000,100(1):57.

[2] 趙 敏.炎性反應(yīng)在腫瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的作用[J].吉林醫(yī)學(xué),2014,35(7):1488.

[3] Hezmee MN,Tanner M,Lee JY,et al.Increased expression of C5a receptor(CD88) mRNA in canine mammary tumors[J].Vet Immunol Immunopathol,2011,139(1):50.

[4] Corrales L,Ajona D,Rafail S,et al.Anaphylatoxin C5a creates a favorablemicroenvironment for lung cancer progression[J].J Immunol,2012,189(9):4674.

[5] Monk PN,Scola AM,Madala P,et a1.Function,structure and therapeuticpotential of complement C5a receptors[J].Br J Pharmacol,2007,152(4):429.

[6] 趙修竹.C5a受體(C5aR，CD88)[J].細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志,1997,13(3):60.

[7] Klos A,Tenner AJ,Johswich KO,et al.The role of the anaphylatoxins in health and disease[J].Mol Immunol,2009,46(14):2753.

[8] Hafiland DL,McCoy RL.CeUular expression of the C5a anaphylatoxin receptor(C5Ar):Demonstration of C5aR on nonmyeloid cells of the liver and lung[J].J Immunol,1995,154(4):1861.

[9] Fayyazzi A,Scheel O,et a1.The C5a receptor is expressed in renal proximal tubular but not in pulmonary or hepatic epithelial cells[J].Immunology,2000,99(1):38.

[10] Wenderfer SE,Ke B,Hollmann TJ,et al.C5a receptor deficiency attenuates T cell function and renal disease in MRLlpr mice[J].J Am Soc Nephrol,2005,16(12):3572.

[11] Niculescu F,Rus HG,Retegan M,et al.Persistent complement activation on tumor cells in breast cancer[J].Am J Pathol,1992,14(5):1039.

[12] Kasthuri RS,Taubman MB,Mackman N.Role of tissue factor in cancer[J].J Clin Oncol,2009,27(25):4834.

[13] Zwirner J,Fayyazi A,Gotze O.Expression of the anaphylatoxin C5a receptor in non-myeloid cells[J].Mol Immunol,1999,36(4):877.

[14] Hidetoshi N,Yoshihiro W,Yoshiaki K,et al.Enhancement of human cancer cell motility and invasiveness by anaphylatoxin C5a via aberrantly expressed C5a-receptor(CD88)[J].Clin Cancer Res,2013,19(8):2004.

[15] Maciej M,Markiewsk I,Robert A,et a1.Modulation of the anti-tumor immune response by complement[J].Nat Immunol,2008,9(11):1225.

[16] Mohd N,Myat K,Jia Y,et al.Increased expression of C5a receptor(CD88) mRNA in canine mammary tumors[J].Vet Immunol Immunopathol,2011,139(1):50.

[17] Gu J,Ding JY,Lu CL,et al.Overexpression of CD88predicts poor prognosis in non-small-cell lung cancer[J].Lung Cancer,2013,81(2):259.

[18] Gabrilovich DI,Nagaraj S.Myeloid-derived suppressor cells as regulators of the immune system[J].Nat Rev Immunol,2009,9(1):162.

[19] Markiewski MM,Lambris JD.The role of complement in inflammatory diseases from behind the scenes into the spotlight[J].Am J Pathol,2007,17(3):715.

[20] Markiewski MM,Lambris JD.Unwelcome complement[J].Cancer Res,2009,69(16):6367.

[21] Jason D,Lin Z,Takashi M,et al.C5aR Expression in a Novel GFP Reporter Gene Knockin Mouse:Implications for the Mechanism of Action of C5aR Signaling in T Cell Immunity[J].J Immunol,2012,188(20):4032.

[22] Lalli PN,Strainic MG,Yang M,et al.Locally produced C5a binds to T cell-expressed C5aR to enhance effector T-cell expansion by limiting antigen-induced apoptosis[J].Blood,2008,112(5):1759.