陳 倩，張志亮，唐秋萍

(海南省血液中心臨床輸血研究室，海南 ?？?570311)

212例ABO新生兒溶血病血清學(xué)檢測結(jié)果分析

陳 倩，張志亮，唐秋萍

(海南省血液中心臨床輸血研究室，海南 ?？?570311)

目的 通過對本地區(qū)212例ABO新生兒溶血病(ABO-HDN)實驗室檢測結(jié)果及影響因素進(jìn)行分析，為臨床診斷與治療提供實驗室依據(jù)。方法對送檢的懷疑為ABO-HDN的212例新生兒血液標(biāo)本進(jìn)行ABO和Rh血型鑒定以及新生兒溶血3項試驗檢測。結(jié)果212例標(biāo)本中直接抗人球蛋白試驗陽性41例，占19.34%，游離抗體試驗陽性31例，占14.62%，抗體釋放試驗陽性119例，占56.13%。A型血患兒HDN的陽性檢出率高于B型患兒，女患兒HDN的陽性檢出率高于男患兒，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。HDN的陽性檢出率還與標(biāo)本送檢時間有關(guān)，患兒出生后3 d內(nèi)送檢標(biāo)本的陽性檢出率最高。結(jié)論血清學(xué)檢測有助于新生兒溶血病的早期診斷和治療；標(biāo)本送檢時間以及新生兒的性別和血型可能對臨床結(jié)果有一定影響。

新生兒溶血病；血清學(xué)檢測；直接抗人球蛋白試驗；游離抗體試驗；抗體釋放試驗

新生兒溶血病(Hemolytic disease of newborn，HDN)是由于母親的免疫系統(tǒng)受到來自胎兒的外源性紅細(xì)胞表面抗原刺激所發(fā)生的紅細(xì)胞同種免疫反應(yīng)，母體所產(chǎn)生的IgG性質(zhì)抗體通過胎盤進(jìn)入胎兒血液循環(huán)，導(dǎo)致胎兒紅細(xì)胞發(fā)生不同程度的溶血，進(jìn)而出現(xiàn)新生兒黃疸、貧血、肝脾腫大等癥狀，嚴(yán)重者可有水腫、核黃疸后遺癥，甚至死亡[1]。因此HDN的早期正確檢測對明確診斷、指導(dǎo)治療、降低患兒的病死率和改善預(yù)后具有重要意義。其中ABO-HDN的確診主要通過新生兒溶血3項試驗，即直接抗人球蛋白試驗、血清游離抗體試驗和紅細(xì)胞抗體釋放試驗。這3項試驗可直接確認(rèn)新生兒患病與否，并為制定治療方案提供依據(jù)。本文就近年來本地區(qū)送檢的212例新生兒高膽紅素血癥患兒及部分患兒母親的血清學(xué)檢測結(jié)果進(jìn)行總結(jié)分析，現(xiàn)報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 2012年1月1日至2014年5月31日，我中心及外院送檢的懷疑為ABO-HDN的新生兒血液標(biāo)本212例，其中A型血99例，B型113例，部分患兒同時送檢母親血樣，母親血型均為O型。

1.2 試劑/儀器 單克隆抗-A、抗-B標(biāo)準(zhǔn)血清、反定型用ABO細(xì)胞、抗D、抗人球蛋白試劑、篩選細(xì)胞為上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司產(chǎn)品，KA-2200細(xì)胞洗滌離心機(jī)購自日本Kubota公司，光學(xué)顯微鏡購自日本Olympus公司。

1.3 方法 對患兒和母親的血液標(biāo)本進(jìn)行ABO和Rh血型鑒定?；純簶?biāo)本同時進(jìn)行HDN 3項試驗，包括直接抗人球蛋白試驗、血清游離抗體試驗和紅細(xì)胞抗體釋放試驗，具體操作參照試劑操作說明書和《全國臨床檢驗操作規(guī)程》[2]。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同血型患兒ABO-HDN陽性檢出率比較 212例ABO-HDN患兒中A型血患兒99例，HDN的陽性檢出率為62.63%(62/99)，B型患兒113例，陽性檢出率為48.67%(55/113)，A型患兒HDN的陽性檢出率高于B型患兒，兩者比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=4.15，P＜0.05)。

2.2 不同血型患兒ABO-HDN陽性檢出率比較 212例ABO-HDN患兒中，男患兒111例，陽性檢出率為46.85%(52/111)，女患兒101例，陽性檢出率為60.40%(61/101)，女患兒HDN的陽性檢出率高于男患兒，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=6.31，P＜0.05)。

2.3 不同標(biāo)本送檢時間ABO-HDN陽性檢出率比較 隨著標(biāo)本送檢時間的不同，其HDN陽性檢出率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=9.75，P＜0.05)。其中出生后3 d內(nèi)送檢標(biāo)本的陽性檢出率高于第3～7天送檢者，其差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=10.76，P＜0.05)，而出生后第3～7天送檢標(biāo)本陽性檢出率與出生7 d后送檢標(biāo)本比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.055，P＞0.05)，見表1。

表1 不同標(biāo)本送檢時間ABO-HDN陽性檢出率比較(例)

2.4 ABO-HDN患兒溶血3項試驗結(jié)果分析 直抗試驗陽性41例，占19.34%，游離試驗陽性31例，占14.62%，釋放試驗陽性119例，占56.13%；其中直抗試驗和釋放試驗同時陽性者24例，占11.32%；游離試驗和釋放試驗同時陽性者17例，占8.02%，直抗試驗、游離試驗和釋放試驗3者同時陽性者13例，占6.13%。

3 討論

臨床上由母嬰血型不合引起的HDN雖然也可在MN、Kell、Kidd、Duffy等血型系統(tǒng)發(fā)生，但相對較少[3-4]，主要見于ABO和Rh血型系統(tǒng)。ABO-HDN是由于母親體內(nèi)免疫性IgG-抗A(B)抗體經(jīng)胎盤進(jìn)入胎兒的血液循環(huán)，致敏并破壞胎兒紅細(xì)胞，引發(fā)胎兒溶血。因O型母親血清中有IgG抗-A或抗-B抗體，且這些抗體具有較高效價，所以O(shè)型血的母親易引發(fā)HDN[5]。本研究中212例ABO-HDN患兒血型分別為A型與B型，母親血型均為O型；加之胎兒紅細(xì)胞上A位點抗原決定簇多于B位點，故ABO-HDN的發(fā)生以A型患兒為最多見[6]。本研究212例標(biāo)本中A型患兒HDN的陽性檢出率明顯高于B型患兒，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，實驗結(jié)果與文獻(xiàn)報道相符。

目前對ABO-HDN的診斷主要通過直接抗人球蛋白試驗、血清游離抗體試驗和紅細(xì)胞抗體釋放試驗等溶血3項試驗。這3項試驗的結(jié)果在HDN診斷中分別代表著不同的臨床意義。直抗試驗和釋放試驗主要檢測患兒紅細(xì)胞是否被來自母體的IgG類血型抗體所致敏，這兩項試驗分別都可作為HDN的確診試驗，不過由于ABO-HDN紅細(xì)胞上抗體結(jié)合量較少，直抗試驗結(jié)果常為陰性[7]，而釋放試驗靈敏度高，特異性強(qiáng)，因此成為判斷HDN最重要的指標(biāo)。游離試驗則檢測患兒血清中是否存在游離的血型抗體，其結(jié)果有助于對病情的預(yù)后做出判斷。游離試驗陽性，表明不僅紅細(xì)胞上有吸附抗體，血清中還存在著游離抗體，往往提示病情嚴(yán)重。本試驗中，212例HDN標(biāo)本直抗試驗陽性率為19.34%，游離試驗陽性率為14.62%，釋放試驗陽性率最高，為56.13%，說明在ABO-HDN的診斷中，釋放試驗是最敏感且最有價值的診斷標(biāo)準(zhǔn)。

對于HDN的發(fā)生是否與性別相關(guān)，不同的文獻(xiàn)報道結(jié)果有所不同。朱梅等[8]認(rèn)為ABO-HDN的發(fā)病與性別之間的差異無統(tǒng)計學(xué)意義，趙建萍等[9]研究結(jié)果則表明男患兒的HDN陽性率要高于女患兒。在本研究中，則發(fā)現(xiàn)女患兒HDN的陽性檢出率要高于男患兒(P＜0.05)，考慮可能是由于不同地區(qū)新生兒性別分布存在差異所致。

本研究還表明，HDN的陽性檢出率與標(biāo)本送檢時間存在著明顯的相關(guān)性。其中以患兒出生后小于3 d HDN的陽性檢出率最高，為66.35%，隨后HDN陽性檢出率開始明顯下降。這是由于早期抽血送檢的新生兒血液標(biāo)本中含有較多游離IgG血型抗體及致敏紅細(xì)胞，但隨著發(fā)病時間的延長，游離IgG血型抗體及致敏紅細(xì)胞的數(shù)量逐漸減少，且大部分IgG血型抗體以抗原抗體復(fù)合物形式存在，失去反應(yīng)原性，導(dǎo)致檢出率降低[6]。因此，對臨床上懷疑為ABO-HDN的患兒應(yīng)及早抽取血樣并及時送檢，提高標(biāo)本的陽性檢出率，避免耽誤臨床治療時機(jī)。本研究中，雖然3～7 d標(biāo)本的陽性率高于7 d后送檢標(biāo)本，但差異無統(tǒng)計學(xué)意義。其是否由于7 d后組樣本量小(僅為9例，陽性3例)而差異無統(tǒng)計學(xué)意義，還有待在今后的研究中擴(kuò)大該組樣本量進(jìn)一步觀察。

本研究結(jié)果表明血型血清學(xué)檢測可為HDN的診斷提供可靠的實驗室依據(jù)。因此臨床醫(yī)生應(yīng)意識到血清學(xué)檢測的必要性，及時送檢可疑標(biāo)本，從而有效提高標(biāo)本的陽性檢出率，為患兒診治爭取寶貴時間。HDN的防治更重要的在于其預(yù)防工作，對有流產(chǎn)、死胎、不育癥、輸血史及夫婦血型不合的孕婦應(yīng)加強(qiáng)產(chǎn)前血清學(xué)檢測，發(fā)現(xiàn)異常及時進(jìn)行妊娠期干預(yù)治療，從而有效預(yù)防和減少母嬰血型不合HDN的發(fā)生率。

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Analysis of serologic detection results in 212 cases of hemolytic disease of newborn.

CHEN Qian,ZHANG Zhi-liang,TANG Qiu-ping.
Department of Clinical Transfusion,Hainan Provincial Blood Center,Haikou 570311, Hainan,CHINA

ObjectiveTo investigate the serologic detection results and the influence factors of 212 cases of ABO-hemolytic disease of newborn(HDN)diagnosed in our area,and to provide the evidences for clinical diagnosis and therapy.MethodsThe samples of 212 suspected cases of ABO-HDN were analyzed by routine typing and three tests of ABO hemolysis.ResultsOf the 212 samples,direct antiglobulin test showed positive results in 41 cases (19.34%),serum free antibody test was positive in 31 cases(14.62%),and RBC antibody release test was positive in 119 cases(56.13%).The positive detection rate of HDN in newborns was significantly higher in A blood type compared with B blood type(P＜0.05).Comparison between gender revealed higher positivity in females than males(P＜0.05).The newborns within 3 days after birth were found to be at the highest risk of HDN.ConclusionSerologic detection can be useful in the early diagnosis and treatment of HDN.Sample delivery time,gender and blood type of the newborns may influence the clinical outcome.

Hemolytic disease of newborn;Serologic detection;Direct antiglobulin test;Free antibody test; Antibody release test

R722.18

A

1003—6350（2015）13—1932—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.13.0696

2014-09-28)

陳 倩。E-mail：cqzy4682@163.com