李美珠，劉朝律，林裕玲，覃燕梅，何振輝

（1.佛山市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 佛山 528000；2.佛山科學(xué)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)系，廣東 佛山 528000；3.廣東醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究所，廣東 湛江 524023）

腎移植患者FK506血藥濃度與肝功能檢測(cè)指標(biāo)的相關(guān)性分析

李美珠1，劉朝律2，林裕玲2，覃燕梅3，何振輝2

（1.佛山市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣東 佛山 528000；2.佛山科學(xué)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)系，廣東 佛山 528000；3.廣東醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究所，廣東 湛江 524023）

目的 探討腎移植患者血他克莫司(FK506)治療窗濃度與肝功能檢測(cè)指標(biāo)的相關(guān)性。方法采用酶放大免疫測(cè)定法對(duì)85例腎移植患者進(jìn)行FK506血藥濃度監(jiān)測(cè)，根據(jù)腎移植術(shù)后FK506血藥濃度分為高濃度組(10～20 ng/ml)40例和低濃度組(5～10 ng/ml)45例。同時(shí)檢測(cè)兩組患者的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、總膽紅素(TBIL)和谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)水平。結(jié)果肝功能異常率按TBIL、AST、ALT、GGT順序分別為FK506高濃度組(5.0 ng/ml、2.5 ng/ml、15.0 ng/ml、25.0 ng/ml)、低濃度組(6.7 ng/ml、11.1 ng/ml、22.2 ng/ml、24.4 ng/ml），兩組比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；兩組患者的FK506血藥濃度與AST、ALT、GGT、TBIL水平無(wú)相關(guān)性(rs＜0.3，P＞0.05)。結(jié)論腎移植術(shù)后患者肝功能檢測(cè)指標(biāo)與FK506血藥濃度無(wú)相關(guān)。

腎移植；FK506；血藥濃度；肝功能

FK506通用名為他克莫司(Tacrolimus)，屬于鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶抑制劑，臨床上主要用于肝、腎等器官移植術(shù)后的免疫抑制治療，藥效是環(huán)孢素A(CsA)的10～100倍。但FK506治療范圍狹窄，治療劑量和中毒劑量非常接近，而且其藥物代謝的個(gè)體差異很大[1-2]。因此，需要對(duì)FK506的血藥濃度進(jìn)行監(jiān)測(cè)，以確保用藥的安全和有效。FK506治療主要的不良反應(yīng)是引起腎損傷，也有文獻(xiàn)報(bào)道FK506可致肝臟損害、糖尿病、肺部感染等[3-4]。但FK506治療引起肝功能損傷的研究較少，F(xiàn)K506對(duì)肝功能的影響尚未有明確的結(jié)論。本文通過(guò)對(duì)85例腎移植患者定期進(jìn)行FK506血藥濃度及肝功能檢測(cè)，分析在不同F(xiàn)K506血藥濃度水平時(shí)肝功能的變化，以探討FK506治療濃度與肝功能指標(biāo)的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 以2012年7月至2014年4月在我院監(jiān)測(cè)FK506血藥濃度的85例腎移植患者為研究對(duì)象，其中男性59例，女性26例；年齡19～70歲，平均(44.3±12.0)歲，男女比例約2.3:1。根據(jù)腎移植術(shù)后FK506血藥濃度水平將患者分為高濃度組(10～20 ng/ml)40例和低濃度組(5～10 ng/ml)45例，標(biāo)本均來(lái)自本院腎內(nèi)科患者。

1.2 免疫抑制劑治療方案 腎移植患者術(shù)后采用FK506+MMF(霉芬酸酯)+強(qiáng)的松三聯(lián)免疫抑制方案，每一位患者所用強(qiáng)的松和霉酚酸酯的劑量基本相同?；颊咭浦残g(shù)后第3天開(kāi)始服用FK506，起始劑量為0.1～0.15 mg/(kg·d)，早晚間隔12 h分兩次服用，以后根據(jù)FK506血藥濃度及患者臨床情況及時(shí)調(diào)整用藥劑量。血藥濃度監(jiān)測(cè)和肝功能，如丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、總膽紅素(TBIL)和谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(GGT)數(shù)據(jù)均來(lái)自移植術(shù)后一個(gè)月內(nèi)。

1.3 采集樣本 患者用藥后12 h(次日清晨給藥前)，使用含有EDTA抗凝劑的一次性真空采血管采靜脈血2 ml，混勻后用于FK506血藥濃度檢測(cè)，所需的樣本為全血200 μl；同時(shí)用干燥管抽血3 ml，分離血清備用。

1.4 檢測(cè)方法 FK506濃度采用 DADE Vival-E藥物濃度分析儀測(cè)定，操作步驟嚴(yán)格按照FK506檢測(cè)試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行；ALT、AST、TBIL、GGT各濃度采用西門(mén)子ADVIA2400全自動(dòng)分析儀測(cè)定。我院成人正常參考范圍分別為血GGT 10～60 U/L，TBIL 5.1～21 μmol/L，ALT 9～50 U/L，AST 15～40 U/L，超出范圍上限視為異常，四項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)，在標(biāo)本送檢后1 h內(nèi)出結(jié)果。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，兩組之間均值比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，率的比較采用χ2檢驗(yàn)，采用Spearman等級(jí)相關(guān)分析，以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 不同F(xiàn)K506血藥濃度患者的肝功能異常比較 FK506不同血藥濃度患者的肝功能異常發(fā)生率比較差別均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，見(jiàn)表1。

表1 不同F(xiàn)K506血藥濃度患者的肝功能異常比較[例（%）]

2.2 不同F(xiàn)K506血藥濃度患者的肝功能指標(biāo)比較 兩組患者的肝功能檢測(cè)指標(biāo)比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，見(jiàn)表2。

表2 不同F(xiàn)K506血藥濃度患者的肝功能檢測(cè)指標(biāo)比較(±s)

表2 不同F(xiàn)K506血藥濃度患者的肝功能檢測(cè)指標(biāo)比較(±s)

組別ALT(U/L)AST(U/L)GGT(U/L)TBIL(μmol/L)低濃度組(n=45)高濃度組(n=40)t檢驗(yàn)P值39.34±22.57 30.77±22.48 1.75＞0.05 20.04±19.45 21.00±20.31 0.22＞0.05 49.27±46.53 54.58±32.00 0.61＞0.05 10.44±5.30 10.75±4.76 0.28＞0.05

2.3 FK506血藥濃度與肝功能指標(biāo)的相關(guān)性 在FK506低濃度組中，F(xiàn)K506血藥濃度與ALT、AST、GGT、TBIL濃度的相關(guān)系數(shù)rs分別為-0.175 3、-0.040 2、-0.184 1、0.090 6，P值分別為 0.129 8、0.723 4、0.102 1、0.439 7；在FK506高濃度組中，F(xiàn)K506血藥濃度與ALT、AST、GGT、TBIL濃度的相關(guān)系數(shù)rs分別為-0.233 3、-0.186 0、-0.181 9、-0.215 8，P值分別為0.336 4、0.445 8、0.456 2、0.374 9。按α=0.05檢驗(yàn)水準(zhǔn)，可以認(rèn)為兩組病例中FK506血藥濃度與ALT、AST、GGT、TBIL水平無(wú)相關(guān)性。

3 討論

本研究采用均相酶免疫法測(cè)定全血中FK506血藥濃度。樣本中FK506與試劑中標(biāo)記有重組葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(rG6PDH)的FK506競(jìng)爭(zhēng)性地與FK506的單克隆抗體結(jié)合(該抗體結(jié)合FK506后可抑制rG6PDH的活性)，活性的游離型的rG6PDH與氧化型煙酰胺嘌呤二核苷酸(NADH)輔酶相偶聯(lián)而轉(zhuǎn)化為還原型酰胺嘌呤二核苷酸(NAD)，通過(guò)檢測(cè)NADH吸光度的動(dòng)態(tài)變化而測(cè)出FK506濃度。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道[5-6]，該方法的分析測(cè)量范圍為2.0～30.0 ng/ml，分析靈敏度為2.0 ng/ml，特異性強(qiáng)，精密度好，平均回收率為(98.0±8.8)%，該法與液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MC)法具有良好的相關(guān)性，是臨床上測(cè)定FK506較為準(zhǔn)確的免疫學(xué)方法。

王意如等[7]報(bào)道國(guó)內(nèi)FK506治療引起的肝功能異常率為8.41%。本研究結(jié)果顯示患者服用FK506后ALT、AST、GGT超過(guò)參考范圍的比率均高于10%，甚至達(dá)到25%，可能是本課題病例組部分患者在用藥前存在肝功能指標(biāo)異常，也可能是本課題研究例數(shù)較少，各指標(biāo)水平分布存在片面性，而導(dǎo)致本研究肝功能結(jié)果異常率的偏高；同時(shí)高低兩組之間異常率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，說(shuō)明FK506用藥濃度在5～20 ng/ml內(nèi)對(duì)肝功能影響無(wú)差別。報(bào)道FK506引發(fā)的肝功能異常大多為暫時(shí)性的，停藥后患者的肝功能一般情況下會(huì)恢復(fù)正常。

有文獻(xiàn)[8]報(bào)道FK506治療后不同血藥濃度組ALT、TBIL比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本研究結(jié)果顯示，F(xiàn)K506高、低血藥濃度組肝功能檢測(cè)指標(biāo)(ALT、AST、GGT、TBIL)比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；另在FK506血藥濃度與肝功能指標(biāo)的相關(guān)性分析中，結(jié)果顯示，兩組患者血清肝功能4項(xiàng)指標(biāo)與FK506血藥濃度均無(wú)相關(guān)性；通過(guò)對(duì)兩組病例在手術(shù)前、后肝功能檢測(cè)各指標(biāo)進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其中個(gè)別FK506濃度大于治療窗濃度的病例結(jié)果差異亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明FK506的治療濃度對(duì)肝臟的毒性較小，其可能原因?yàn)镕K506的治療窗濃度遠(yuǎn)小于引起肝毒性的閾濃度。另有文獻(xiàn)[9]報(bào)道，F(xiàn)K506在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中具有促進(jìn)肝細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞再生的作用，其機(jī)制涉及抑制自然殺傷細(xì)胞的活性?？傊現(xiàn)K506的治療濃度窗對(duì)肝功能指標(biāo)未引起改變。由于本研究收集病例存在局限性，F(xiàn)K506在臨床器官移植中的長(zhǎng)期療效及對(duì)肝臟的毒副作用仍有待于進(jìn)一步研究。

綜上所述，腎移植患者的FK506血藥濃度與肝功能檢測(cè)指標(biāo)沒(méi)有相關(guān)性。

[1]謝 華,王 榮,武曉玉,等.他克莫司血藥濃度監(jiān)測(cè)與合理用藥分析[J].中國(guó)藥房,2013,24(26):2427-2429.

[2]丁 俊.他克莫司的藥理作用及臨床應(yīng)用研究概況[J].臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2010,9(17):1347-1348.

[3]馬 嶸,胡翠華,劉桂芹,等.多元分析模板圖在監(jiān)測(cè)肝移植受者FK506治療窗濃度中的應(yīng)用[J].微循環(huán)學(xué)雜志,2010,20(3): 41-43.

[4]Mesar I,Kes P,Hudolin T,et al.Rescue therapy with sirolimus in a renal transplant recipient with tacrolimus-induced hepatotoxicity [J].Ren Fail,2013,35(10):1434-1435.

[5]蘭 順,葉冬梅,莫廣艷.他克莫司血藥濃度與腎病綜合征的臨床療效相關(guān)性研究[J].中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué),2013,30(8):896-900.

[6]Wu P,Ni X,Wang M,et al.Polymorphisms in CYP3A5*3 and MDR1,and haplotype modulate response to plasma levels of tacrolimus in Chinese renal transplant patients[J].Ann Transplant, 2011,16(1):54-60.

[7]王意如,王學(xué)鋒,劉世坤,等.他克莫司在932例腎移植患者中的應(yīng)用[J].中國(guó)藥房,2002,13(4):225-226.

[8]張啟瑜,吳存造,廖 毅,等.不同血藥濃度FK506在肝移植術(shù)后應(yīng)用的比較[J].肝膽胰外科雜志,2010,22(2):92-93,96.

[9]Yan Y,Sun HH,Hunter DA,et al.Efficacy of short-term FK506 administration on accelerating nerve regeneration[J].Neurorehabil Neural Repair,2012,26(6):570-580.

Correlation analysis of FK506 blood concentration with liver function index in renal transplant recipients.

LI Mei-zhu1,LIU Chao-lv2,LIN Yu-ling2,TAN Yan-mei3,HE Zhen-hui2.1.Department of Clinical Laboratory,the First People's Hospital of Foshan,Foshan 528000,Guangdong,CHINA;2.Specialty of Medical Laboratory,Medical School of Foshan Science and Technology College,Foshan 528000,Guangdong,CHINA;3.Research Institute of Biochemistry and Molecular Biology,Guangdong Medical School,Zhanjiang 524023,Guangdong,CHINA

ObjectiveTo investigate the correlation between blood tacrolimus(FK506)therapeutic window concentration and liver function index in renal transplant recipients.MethodsThe FK506 concentration in blood of 85 renal transplant recipients were detected by the enzyme-multiplied immunoassay test(EMIT).According to the FK506 concentration after renal transplantation,the subjects were divided into high concentration(10～20 ng/ml)group(n=40)and low concentration(5～10 ng/ml)group(n=45).The alanine aminotransferase(ALT),aspartate aminotransferase (AST),total bilirubin(TBIL)and glutamyltranspeptidase(GGT)in two groups were determined.ResultsFor abnormal liver function,the TBIL,AST,ALT and GGT was respectively 5.0 ng/ml,2.5 ng/ml,15.0 ng/ml and 25.0 ng/ml in high concentration group,and 6.7 ng/ml,11.1 ng/ml,22.2 ng/ml and 24.4 ng/ml in low concentration group.The difference between the two groups was not statistically significant(P＞0.05).There was no correlation between the FK506 concentration andALT,AST,GGT and TBIL levels in two groups(rs＜0.3，P＞0.05).ConclusionThe liver function indexes of patients after renal transplantation are not correlated to the blood concentration of FK506.

Renal transplantation;FK506;Blood concentration;Liver function

R699.2

A

1003—6350（2015）17—2549—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.17.0923

2014-12-27)

廣東省大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目(編號(hào)：201411847042)

何振輝。E-mail：hezhenhui@tom.com