張仟春， 羅夏琳， 李攻科* ， 肖小華*

（1. 中山大學(xué)化學(xué)與化學(xué)工程學(xué)院，廣東 廣州510275；2. 興義民族師范學(xué)院生物與化學(xué)學(xué)院，貴州 興義562400）

隨著生物、醫(yī)藥、食品、環(huán)境等研究領(lǐng)域的研究發(fā)展，核苷類、酚類、胺類、雜環(huán)類、糖苷類、氨基酸類等極性小分子化合物迅速成為廣受關(guān)注的研究對(duì)象。但這些化合物化學(xué)結(jié)構(gòu)差異大、含量跨度范圍廣且樣品基體復(fù)雜多變，基于有機(jī)聚合物、炭材料和硼酸材料的固相萃取、整體柱等樣品前處理技術(shù)受到了越來越多的關(guān)注；另一方面，這些極性小分子化合物往往揮發(fā)性較差，紫外吸收弱、無熒光基團(tuán)和且可供離子化的官能團(tuán)不多，使其快速靈敏的分析檢測(cè)受到了限制［1］。因此，針對(duì)復(fù)雜基體中各種極性小分子化合物開展快速高效的樣品前處理方法和靈敏準(zhǔn)確的分析方法研究成為近年來的熱點(diǎn)。本文綜述了硅膠材料、有機(jī)聚合物、炭材料和硼酸材料等樣品前處理介質(zhì)及氣相色譜、反相液相色譜和親水作用色譜等分析方法在復(fù)雜樣品中痕量極性小分子化合物分析方面的應(yīng)用研究進(jìn)展。

1 樣品前處理分離介質(zhì)

1.1 硅膠基質(zhì)介質(zhì)

硅膠具有良好的穩(wěn)定性和良好的可修飾性，是極性小分子樣品前處理方法中應(yīng)用最廣的分離介質(zhì)［2］。為了增強(qiáng)它對(duì)極性化合物的吸附能力，常用氰基丙基、二醇基、苯磺酸、三甲基氨丙基等官能團(tuán)對(duì)硅膠進(jìn)行修飾。Self 等［3］和崔曉美等［4］均以氰基丙基鍵合硅膠（CN）為吸附劑，采用基質(zhì)固相分散萃取方法，分別富集金槍魚和鰹魚中胍丁胺、尸胺、組胺、苯乙胺、腐胺、色胺、酪胺等生物胺，定量限可達(dá)0.1 mg／kg，遠(yuǎn)低于美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局（FDA）規(guī)定的食品中組胺最大允許含量50 mg／kg。Magiera 等［5］對(duì)比了C2、C8、C18、三甲基氨丙基鍵合硅膠（SAX）和混合型C8＋苯磺酸鍵合硅膠（SCX）等不同硅膠基質(zhì)分離介質(zhì)對(duì)尿樣中肉毒堿和酰肉堿類化合物的富集能力。結(jié)果表明，C18和SAX 的富集能力較差，C2和C8對(duì)肉豆蔻酰肉堿和棕櫚酰肉毒堿的富集效果較好，而C8與SCX 混合時(shí)，對(duì)左旋肉堿、乙酰肉堿、丙酰肉堿、己酰肉堿、辛酰肉堿、癸酰肉堿、月桂酰肉堿都有良好的富集效果。C18是富集分離氨基酸的有效分離介質(zhì)，Wang等［6］使用C18固相萃取柱對(duì)茶葉浸漬液中的17 種氨基酸進(jìn)行分離富集，獲得了理想的效果。

1.2 有機(jī)聚合物介質(zhì)

與硅膠相比，有機(jī)聚合物具有孔徑可控、滲透性好、pH 適用范圍寬、生物相容性好等優(yōu)點(diǎn)，近年來作為分離介質(zhì)在樣品前處理等領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。常用的有機(jī)聚合物材料有聚苯乙烯類、聚甲基丙烯酸酯類、聚丙烯酰胺類等。高交聯(lián)聚苯乙烯-二乙烯基苯（PS-DVB）的吸附能力強(qiáng)，但其極性較低，不適合極性小分子的分離富集。采用N-吡咯烷酮（NVP）對(duì)其進(jìn)行改性可制備HLB 填料，其中親脂性DVB 可吸附非極性分子，而親水性的NVP 可以吸附極性化合物，大大拓展了DVB-NVP 的應(yīng)用范圍。如Li 等［7］以HLB 為吸附介質(zhì)富集環(huán)境水中的萘胺、苯胺、N，N-二甲基苯胺、N，N-二乙基苯胺、聯(lián)苯胺等芳香胺，方法的回收率高于75%。采用苯磺酸基進(jìn)一步修飾DVB-NVP 得到混合型陽離子交換反相吸附劑（MCX 吸附劑），它不僅對(duì)堿性化合物具有高選擇性，而且兼具陽離子交換和反相吸附的能力。如Tang 等［8］采用MCX 固相萃取小柱實(shí)現(xiàn)了豆腐乳樣品中生物胺的高效富集。用N-乙烯吡咯烷酮修飾的聚合物吸附劑比傳統(tǒng)的C18吸附劑能更有效地吸附極性分析物。Fernández-Franzón 等［9］比較了C18、未封尾的C18和PS-DVB-NVP 固相萃取吸附劑對(duì)魚樣中尸胺、組胺、苯乙胺、腐胺、精胺、亞精胺、酪胺和色胺等生物胺的富集效果，結(jié)果表明，以封尾的C18鍵合硅膠為萃取介質(zhì)時(shí)，樣品回收率較低；未封尾的C18鍵合硅膠對(duì)多數(shù)生物胺的萃取效果比封尾的C18好，但它不適用于精胺和亞精胺；而PS-DVB-NVP 材料對(duì)這些生物胺具有最好的萃取吸附效果。與聚苯乙烯類聚合物相比，具有氨基、羧基等親水性官能團(tuán)的聚氨酯、聚甲基丙烯酸酯和聚丙酰胺類聚合物可直接有效萃取極性化合物。如Johnson 等［10］采用聚氨酯泡沫材料萃取了水相中的2，4-二氨基甲苯、2，6-二氨基甲苯、4，4′-亞甲基雙苯胺，采用HPLC-MS／MS 分析的檢出限低于50 fmol。聚合物整體柱具有通透性好、萃取容量大、容易修飾等特點(diǎn)，Wu 等［11］制備了聚甲基丙烯酸-二甲基丙烯酸乙二醇酯聚合物微萃取整體柱，可以高效富集尿液中的單胺類神經(jīng)遞質(zhì)，檢出限小于21 nmol／L。

分子印跡聚合物具有預(yù)定性、識(shí)別性、廣泛適用性等特點(diǎn)，可以有效地提高聚合物的吸附選擇性。Jégourel 等［12］使用5-甲基尿苷為模板分子，丙烯酰胺為單體、季戊四醇三丙烯酸酯為交聯(lián)劑合成了一種對(duì)嘧啶核苷具有高特異性選擇的分子印跡聚合物，該介質(zhì)能從尿液中選擇性富集嘧啶核苷。Zhu等［13］采用久效磷為模板分子，制備了分子印跡聚合物，實(shí)現(xiàn)了土壤等復(fù)雜基質(zhì)中痕量的強(qiáng)極性久效磷、速滅磷、磷胺、氧化樂果的選擇性富集，該方法回收率為77.5% ～99.1%。為了簡(jiǎn)化前處理操作，Bouri等［14］制備了多巴胺磁性分子印跡聚合物，該材料兼具分子識(shí)別和磁分離功能，可以選擇性富集尿液中的多種單胺類遞質(zhì)及其代謝物，且材料可重復(fù)使用。這些印跡材料在復(fù)雜體系中痕量極性小分子化合物的分析中具有良好的應(yīng)用前景。

1.3 炭材料介質(zhì)

炭材料具有比表面積大、吸附性強(qiáng)和穩(wěn)定性高等優(yōu)點(diǎn)，可分為零維富勒烯，一維單壁碳納米管、多壁碳納米管和碳納米纖維，二維的石墨烯，三維的介孔炭材料和石墨炭黑等。炭材料可通過π-π 作用力、范德華力和疏水相互作用等非共價(jià)作用力與目標(biāo)分子結(jié)合。石墨炭黑是6 個(gè)碳原子構(gòu)成的平面六角形，這種六元環(huán)結(jié)構(gòu)對(duì)平面芳香結(jié)構(gòu)以及具有六元環(huán)結(jié)構(gòu)的分子具有較好的選擇性。因石墨炭黑表面結(jié)構(gòu)含有氧的復(fù)合物，其表面帶有正電荷，具有陰離子交換功能，可以用于高效萃取樣品中的酸性化合物。隋凱等［15］以C18鍵合硅膠和石墨炭黑為吸附材料，采用固相萃取方法富集了磺酰脲，結(jié)合HPLC分析檢測(cè)了大米中12 種極性較強(qiáng)的殘余磺酰脲類除草劑。丙烯酰胺、N，N-二甲基甲酰胺和N，N-二甲基乙酰胺均能與水及多數(shù)有機(jī)溶劑混溶，并且在C18固相萃取柱上無保留。張明等［16］先用C18柱除去非極性干擾物，用石墨炭黑柱吸附分析對(duì)象，最后用乙腈洗脫目標(biāo)化合物，可以實(shí)現(xiàn)環(huán)境水樣中N，N-二甲基甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺和丙烯酰胺的高效凈化。石墨炭黑的價(jià)格比較昂貴，陳玲等［17］用活性炭代替石墨炭黑作吸附劑，對(duì)強(qiáng)極性丙烯酰胺進(jìn)行了固相萃取，結(jié)果表明活性炭對(duì)丙烯酰胺有更好的保留特性。與C18等鍵合硅膠和炭黑等材料相比，碳納米管的比表面積大且化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，對(duì)大部分有機(jī)化合物有較強(qiáng)的吸附能力，且用極性較大的有機(jī)溶劑（如甲醇、乙腈）洗脫還原后可以重復(fù)利用，是很好的分離介質(zhì)。如Cai 等［18］用多壁碳納米管作為固相萃取填料成功地富集了雙酚A、4-壬基苯酚、對(duì)特辛基苯酚等物質(zhì)。石墨烯擁有和碳納米管相似甚至更優(yōu)異的性能，江桂斌研究組［19］首先將石墨烯用作固相萃取介質(zhì)，用于富集強(qiáng)極性的氯酚，并據(jù)此建立了環(huán)境水樣中氯酚的SPE-HPLC 分析方法。8 種氯酚的回收率為91.0% ～109.4%。石墨烯的極性較弱，采用化學(xué)方法對(duì)其進(jìn)行修飾改性增加其極性，可以大大拓寬石墨烯材料的應(yīng)用范圍。Zhang 等［20］通過對(duì)石墨烯進(jìn)行酰胺化，提高石墨烯的極性，增強(qiáng)它對(duì)極性化合物的富集能力，并據(jù)此建立了食品中極性的痕量雜環(huán)胺的微固相萃取-高效液相色譜在線聯(lián)用分析方法；針對(duì)目前商業(yè)化的固相微萃取涂層依舊存在不耐高溫、高成本、對(duì)極性化合物及離子化合物萃取效率低等缺點(diǎn)，Zou 等［21］采用電化學(xué)方法制備了一種新型的聚吡咯／石墨烯復(fù)合材料涂層，可以高效富集苯酚類物質(zhì)。

1.4 硼酸親和介質(zhì)

在水溶液中，硼酸基團(tuán)由三鍵共面結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變成四面體結(jié)構(gòu)，該結(jié)構(gòu)可與共面的順式二羥基形成穩(wěn)定的五元環(huán)絡(luò)合物；在酸性條件下，這種絡(luò)合物可還原成硼酸和順式二羥基基團(tuán)［22，23］。硼酸親和材料就是利用硼酸基團(tuán)的這一特性對(duì)含有順式二羥基的化合物進(jìn)行分離、富集和純化。邵琳智等［24］建立硼酸親和整體柱分離富集雞肉樣品中金剛烷胺和利巴韋林，并與MCX、PS-DVB-NVP、SCX 介質(zhì)對(duì)利巴韋林和金剛烷胺的萃取效果進(jìn)行了對(duì)比。研究結(jié)果表明，硼酸親和整體柱對(duì)含有順式二醇結(jié)構(gòu)的利巴韋林具有較強(qiáng)的吸附作用，它能與金剛烷胺中的氨基發(fā)生共價(jià)保留，產(chǎn)生很高的選擇性和凈化效果，與之相比，其他介質(zhì)的SPE 柱不能同時(shí)保留兩種分析物。Yang 等［25］利用原位聚合的方法，制備了4-乙烯基苯硼酸-二甲基丙烯酸乙二醇酯整體柱，建立了該整體柱的在線分離富集方法，方法對(duì)含有順式二醇結(jié)構(gòu)的去甲腎上腺素、腎上腺素和多巴胺的富集倍數(shù)分別為243、223 和246 倍，而對(duì)不含有順式二醇結(jié)構(gòu)的5-羥色胺的富集倍數(shù)僅為17 倍，該方法成功用于尿液中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的分析。Jiang 等［26］發(fā)現(xiàn)氨基苯硼酸修飾的磁性納米粒子對(duì)去甲腎上腺素、腎上腺素和多巴胺3 種極性兒茶酚胺類化合物具有高選擇性分離富集效果，他們建立的磁性SPEHPLC-ECD 聯(lián)用方法可實(shí)現(xiàn)尿液中兒茶酚胺類化合物的高靈敏分析檢測(cè)。此外，段語暉等［27］采用“點(diǎn)擊化學(xué)”方法，將炔基化3-氨基苯硼酸與疊氮化硅膠反應(yīng)，制備了炔基化3-氨基苯硼酸固相萃取吸附劑，分子鏈中包含的羥基、三唑環(huán)等極性基團(tuán)可以增強(qiáng)吸附劑的親水性，更適合極性小分子化合物的分離富集。

1.5 其他分離介質(zhì)

除上述常用分離介質(zhì)外，羥丙基葡聚糖凝膠、免疫親和、限進(jìn)介質(zhì)材料也在復(fù)雜體系中極性小分子前處理中具有很好的應(yīng)用。羥丙基葡聚糖凝膠以凝膠過濾作用為主，兼具反相分配的作用。Kosińska等［28］采用羥丙基葡聚糖凝膠固相分離多酚類化合物，取得了較好的富集效果?；诳乖?抗體相互作用的免疫親和材料可以高選擇性地一步分離富集目標(biāo)化合物，Geng 等［29］系統(tǒng)對(duì)比了C18鍵合硅膠和免疫親和介質(zhì)對(duì)脫氧雪腐鐮刀菌烯醇-3-葡萄糖苷的富集效果。結(jié)果表明，因脫氧雪腐鐮刀菌烯醇-3-葡萄糖苷的極性較強(qiáng)，普通C18鍵合硅膠的回收率低于41.7%，而采用免疫親和分離介質(zhì)時(shí)，回收率為93.9% ～95.1%。他們同時(shí)還采用HILIC 柱分離富集，發(fā)展了可同時(shí)分析14 種谷物中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇-3-葡萄糖苷的紫外檢測(cè)方法和LC-MS／MS 分析方法。限進(jìn)介質(zhì)可以吸附目標(biāo)化合物，并且通過對(duì)外表面進(jìn)行親水性修飾，可以減少大分子化合物的干擾。Rodríguez-Gonzalo 等［30］用N-乙烯基乙酰胺共聚物作為限進(jìn)介質(zhì)固相萃取材料，結(jié)合兩性離子親水作用色譜-質(zhì)譜在線聯(lián)用建立了尿液中的內(nèi)源性核苷和核酸堿基的分析方法，該方法具有自動(dòng)化、靈敏度高、樣品分析量少等優(yōu)點(diǎn)，檢出限為0.1 ～1.3 ng／mL。

2 分析方法

GC 和LC 是目前應(yīng)用最廣泛的分離分析方法，也是食品、生物、環(huán)境等樣品中極性小分子化合物分析的重要手段［31］。但極性小分子化合物一般揮發(fā)性較差，采用GC 分析時(shí)需對(duì)其進(jìn)行衍生化，繁瑣不便。因此，以反相液相色譜和親水作用色譜（HILIC）為代表的液相色譜成為復(fù)雜體系中極性小分子化合物含量分析的主要方法［32-35］。同時(shí)，極性化合物一般紫外吸收弱、熒光基團(tuán)少，高靈敏的質(zhì)譜成為其主要檢測(cè)手段。

2.1 氣相色譜法

采用全氟丁酸酐、異丁基氯甲酸酯等試劑將極性小分子化合物衍生后，可采用氣相色譜對(duì)其進(jìn)行分析定量。Fernandes 等［36］將二元胺、多元胺和芳香胺等胺類化合物通過全氟丁酸酐衍生化，采用GC-MS 進(jìn)行分析，葡萄酒和葡萄汁樣品中各種胺的檢出限均低于10 μg／L。他們［37］還采用異丁基氯甲酸酯衍生化生物胺，結(jié)合GC-MS 分析了啤酒中的22 種生物胺，方法的檢出限為5 ～10 μg／L，RSD小于7.2%，回收率大于86.9%。為改善極性小分子化合物在氣相色譜柱中的保留及其譜峰拖尾，Casal 等［38］以N-（叔丁基二甲基硅烷基）和N-甲基三氟乙酰胺為衍生化試劑，采用GC-MS 實(shí)現(xiàn)了食品中12 種極性雜環(huán)胺的高靈敏分析。在酚類小分子化合物分析方面，Padilla-Sánchez 等［39］以乙酸酐和吡啶作為衍生劑，結(jié)合GC-MS／MS 建立了農(nóng)業(yè)土壤中13 種酚類化合物的分析方法，檢出限滿足國(guó)家限量要求。

2.2 反相液相色譜法

反相液相色譜是經(jīng)典、廣譜的液相色譜法，一般以C4、C8、C18、苯基等修飾的硅膠為柱填料，廣泛應(yīng)用于弱極性和中等極性化合物的分離分析中，對(duì)離子和極性化合物的保留和分離較差。當(dāng)采用非極性的C18鍵合硅膠為色譜柱時(shí)，極性化合物的保留較弱，分析時(shí)需采用柱前衍生或者在流動(dòng)相中加入離子對(duì)試劑。Tang 等［8］以4-氯-3，5-二硝基三氟甲苯為衍生試劑，建立了腐乳中色胺、組胺、腐胺和酪胺等生物胺的HPLC-UV 分析方法，檢出限為16 ～67 μg／kg；Marengo 等［40］以烷基銨鹽為離子對(duì)試劑，采用HPLC 方法分析了9 種氯苯胺異構(gòu)體，檢出限低至4.0 ～21.0 μg／L。采用C18鍵合硅膠為填料時(shí)，強(qiáng)極性化合物往往需在純水相中才能達(dá)到有效的分離和保留，這容易導(dǎo)致色譜柱發(fā)生坍塌。將硅膠用氨基等極性基團(tuán)修飾后，可以增加硅膠的親水性，避免色譜柱在純水或高含水相中發(fā)生坍塌。Aral 等［41］以酰胺修飾的硅膠基質(zhì)為色譜固定相，分析了酚類、苯胺類、氯化除草劑、蘇丹染料、核苷酸和核苷等極性小分子化合物。結(jié)果表明，與傳統(tǒng)的C18柱相比，這種酰胺修飾硅膠基質(zhì)的固定相對(duì)極性化合物具有更好的分離能力。另一方面，Ma 等［42］在分析花生皮中的酚酸類、芪類、酮類、雙黃酮類等極性化合物時(shí)，對(duì)比了紫外、熒光和質(zhì)譜等檢測(cè)技術(shù)對(duì)這些極性化合物的檢測(cè)靈敏度。結(jié)果表明，質(zhì)譜對(duì)極性小分子化合物具有更好的響應(yīng)和更高的靈敏度。分析時(shí)常綜合考慮分析對(duì)象有無紫外吸收及其極性等，采用多種技術(shù)結(jié)合進(jìn)行分析，如Tao 等［43］采用超高效液相色譜-光電二極管陣列／質(zhì)譜檢測(cè)器聯(lián)用檢測(cè)狹葉香蒲花粉中的核苷和核酸堿基，為了加強(qiáng)對(duì)極性化合物的保留，使用Acquity UPLC HSS T3 柱進(jìn)行分離。

2.3 親水作用色譜

親水作用色譜一般采用親水性材料如裸硅膠、氨基鍵合硅膠、二醇基鍵合硅膠為固定相，高比例有機(jī)溶劑做流動(dòng)相，它對(duì)極性化合物有較好的保留，是傳統(tǒng)的反相和正相液相色譜的重要補(bǔ)充［44］，為強(qiáng)極性和離子型化合物分析提供了一個(gè)很好的選擇［45，46］；此外，采用HILIC 可提高極性化合物在質(zhì)譜檢測(cè)器中的電離效率和去溶劑效果，提高分析靈敏度高達(dá)10 ～20 倍［47-49］。其中，裸硅膠是HILIC中應(yīng)用最廣的色譜固定相［50］，Li 等［7］以其為固定相，建立了萘胺、苯胺、N，N-二甲基苯胺等5 種芳香胺的HILIC 分析方法，檢出限為0.02 ～0.2 mg／L；同樣，張明等［16］采用裸硅膠色譜柱，建立了環(huán)境水樣中丙烯酰胺、N，N-二甲基甲酰胺和N，N-二甲基乙酰胺的HILIC-二極管陣列檢測(cè)器（DAD）分析方法，檢出限達(dá)0.01 mg／L，回收率為84.1% ～106%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.8% ～10.4%，方法快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，滿足環(huán)境水樣中痕量酰胺類污染物的分析要求。與裸硅膠相比，采用氨基、酰胺、醇羥基和兩性離子基團(tuán)等修飾的硅膠固定相親水性更強(qiáng)，不僅有利于極性化合物的分離，同時(shí)還可提高色譜柱在中性或堿性條件下的穩(wěn)定性。氨基修飾的硅膠最早用于HILIC 中，但氨基修飾的硅膠與酸性化合物結(jié)合能力過強(qiáng)，一些強(qiáng)酸性化合物容易在色譜柱上產(chǎn)生死吸附等情況。相比于氨基硅膠，酰胺修飾的硅膠具有更好的穩(wěn)定性和分離能力。Xu 等［51］合成了一種包含伯氨、叔氨基團(tuán)的、可用于HILIC 及離子交換色譜的新型酰胺類固定相，可用于核苷、磺胺類及喹諾酮類等極性化合物的分離分析。二醇基鍵合硅膠具有一定的氫鍵作用，其表面極性大于氰基鍵合硅膠，Guo 等［52］采用“點(diǎn)擊化學(xué)”技術(shù)制備了一系列以醇羥基修飾硅膠的HILIC 固定相，包括單羥基固定相、多羥基固定相、環(huán)糊精固定相、葡萄糖固定相和麥芽糖固定相等，成功地應(yīng)用于果糖、葡萄糖、蔗糖和麥芽糖等糖類化合物的分析中。兩性離子鍵合相具有良好的親水性，Qiu 等［53］發(fā)展了兩性離子HILIC 固定相，該固定相特別適合分離核苷、水溶性維生素和水楊酸等類似物。為減少或避免衍生化步驟，提高紫外吸收弱、無熒光基團(tuán)的小分子化合物的檢出靈敏度，李玉珍等［54］結(jié)合HILIC 與蒸發(fā)光散射檢測(cè)器（ELSD），實(shí)現(xiàn)了保健食品中L-亮氨酸、L-異亮氨酸和L-纈氨酸3 種支鏈氨基酸的直接無衍生分析。液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)具有良好的分離和鑒定能力，可以直接分析不揮發(fā)性極性化合物。Fontanals 等［55］使用HILIC-MS 分析了環(huán)境水樣中的可卡因、嗎啡、可待因等毒品及代謝物，該方法的檢出限低于2 ng／L，回收率接近100%。Zhou 等［56］采用HILIC-MS／MS 聯(lián)用能有效定量檢測(cè)銀杏種子中的20 種極性核苷和核酸堿基，該方法快速、簡(jiǎn)單，靈敏度為0.02 ～42.54 ng／mL。Pan 等［57］同樣采用HILIC-MS／MS 方法分析了板藍(lán)根中的16 種核苷即核酸堿基，定量限為0.05 ～98.18 ng／mL，并且具有較高的回收率（93.8% ～106%）。

2.4 其他方法

除了常用的GC、LC 和HILIC 等方法之外，多維液相色譜、電化學(xué)和毛細(xì)管電泳等方法在極性小分子化合物分析中也有應(yīng)用。Montero 等［2］采用親水作用色譜×反相液相色譜構(gòu)建二維液相色譜，結(jié)合DAD-MS／MS 聯(lián)用分析了蘋果中的極性酚類化合物，50 min 內(nèi)完成了蘋果中65 種極性酚類化合物的分析檢測(cè)。Kalili 等［58］使用親水作用色譜-反相色譜構(gòu)建二維液相色譜分析原花青素。在第一維親水模式下，原花青素在二醇基硅膠柱上按聚合度大小依次被洗脫，這些相同分子量的組分在第二維C18硅膠柱上根據(jù)極性進(jìn)一步分離，并用熒光、紫外和質(zhì)譜進(jìn)行檢測(cè)，實(shí)現(xiàn)了可可豆和蘋果樣品中酚類化合物的分離檢測(cè)。

此外，白萬喬等［59］采用電聚合方法制備了石墨烯／聚硫堇復(fù)合膜修飾玻碳電極，成功建立了一種快速檢測(cè)沙丁胺醇的電化學(xué)分析方法，進(jìn)行了人體尿樣的檢測(cè)，回收率為96.0% ～104.2%。Fang 等［60］用毛細(xì)管電泳-循環(huán)伏安聯(lián)用技術(shù)分析了果蠅幼蟲中的多巴胺、五羥色胺和酪胺等生物胺，結(jié)合場(chǎng)放大樣品堆積技術(shù)，該方法的檢出限低于4 nmol／L。

3 展望

生物、環(huán)境、食品等復(fù)雜樣品中的極性小分子化合物功能多樣、種類繁多、含量范圍廣且基體復(fù)雜多變，雖然目前基于硅膠、聚合物和炭材料的樣品前處理技術(shù)受到了大家的關(guān)注和重視，但廣譜性和高選擇性的樣品前處理技術(shù)仍然是這些極性小分子化合物分析檢測(cè)的難點(diǎn)和重點(diǎn)，如何結(jié)合新型材料發(fā)展快速高效的樣品前處理方法和技術(shù)是其核心；另一方面，受小分子化合物紫外和熒光響應(yīng)弱、電離難的限制，如何結(jié)合表面增強(qiáng)拉曼光譜、高分辨質(zhì)譜等技術(shù)發(fā)展簡(jiǎn)捷、靈敏、準(zhǔn)確的分析方法是小分子化合物分析檢測(cè)的另一個(gè)研究重點(diǎn)。而結(jié)合快速高效的前處理技術(shù)和靈敏準(zhǔn)確的分析方法發(fā)展樣品前處理-分析檢測(cè)聯(lián)用技術(shù)，尤其是在線分析聯(lián)用技術(shù)，有望成為復(fù)雜體系中小分子化合物分析方面新的研究方向。

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