劉維明，張金良(莒縣人民醫(yī)院，山東莒縣76500;濱州醫(yī)學(xué)院)

不同膽結(jié)石患者血漿和腸黏膜組織中D-乳酸及DAO活性觀察

劉維明1，張金良2
(1莒縣人民醫(yī)院，山東莒縣276500;2濱州醫(yī)學(xué)院)

摘要:目的探討膽石癥患者血漿和腸黏膜組織的D-乳酸及二胺氧化酶(DAO)活性變化的臨床意義。方法選擇105例膽石癥患者作為觀察組，分析結(jié)石性質(zhì)，對比患者血漿和腸黏膜組織的D-乳酸及二胺氧化酶(DAO)活性，并與健康對照組比較。結(jié)果根據(jù)結(jié)石化學(xué)性質(zhì)，膽色素結(jié)石患者所占比例最高，為44.76%，其次為膽固醇結(jié)石，混合性結(jié)石最低;膽色素結(jié)石患者血漿與腸黏膜的D-乳酸活性顯著低于對照組、膽固醇結(jié)石者及混合性結(jié)石者，DAO活性顯著高于對照組、膽固醇結(jié)石者及混合性結(jié)石者(P均＜0.05)。除膽色素結(jié)石外，不同性質(zhì)和部位的結(jié)石患者血漿與腸黏膜的D-乳酸活性及DAO活性比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義，與對照組相比差異亦無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論膽色素結(jié)石患者血漿與腸黏膜的D-乳酸活性較低、DAO活性較高，腸黏膜受損更嚴(yán)重。

關(guān)鍵詞:膽石癥;腸黏膜通透性; D-乳酸;二胺氧化酶

研究顯示，腸道屏障功能受損可能是膽結(jié)石產(chǎn)生的重要因素之一［1］。D-乳酸和二胺氧化酶(DAO)活性檢測是評價腸黏膜通透性的可靠指標(biāo)［2］。本研究觀察了不同部位及不同結(jié)石性質(zhì)的膽石癥患者血漿和腸黏膜組織的D-乳酸及DAO活性的變化，現(xiàn)報告如下。

1　資料與方法

1.1臨床資料選擇2012年9月～2013年9月我院收治的膽石癥手術(shù)治療患者105例(觀察組)，男65例、女40例，年齡29～58(36.8±3.7)歲。均符合WHO制定的膽石癥診斷標(biāo)準(zhǔn)，臨床表現(xiàn)為反復(fù)發(fā)作性膽絞痛亦或上腹部疼痛，經(jīng)腹部B超、胰膽管造影等證實為膽結(jié)石［2］。排除年齡≥60歲、有手術(shù)禁忌證、合并嚴(yán)重心、肺器官衰竭者［3］。選擇同期在我院健康體檢的志愿者30例作為對照組，男19例、女11例，年齡30～60(37.2±2.2)歲。根據(jù)結(jié)石化學(xué)性質(zhì)，膽色素結(jié)石47例、膽固醇結(jié)石41例、混合性結(jié)石17例;根據(jù)結(jié)石部位，膽囊結(jié)石35例、膽管結(jié)石35例、膽囊結(jié)石合并膽管結(jié)石35例，

1.2檢測方法健康對照組于體檢當(dāng)日、觀察組于術(shù)前1 d采集清晨空腹靜脈血6 mL，分裝在3個試管內(nèi)，分別加入30 μL 10%的EDTA-Na2、30 μL抑肽酶、30 μL生理鹽水，混勻后4℃下1 500 r/min離心15 min，－70℃保存待測。清潔腸道后通過腸鏡取回腸末段黏膜組織4塊，稱取200 mg放入勻漿器內(nèi)，加入PBS冰浴勻漿，離心。采用分光光度計檢測血液和腸黏膜組織的D-乳酸及DAO活性水平，嚴(yán)格按試劑盒說明書操作。DAO活性=勻漿液的DAO含量/蛋白含量×0.05。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件，計量數(shù)據(jù)以珋x±s表示，采用配對t檢驗，率的比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2　結(jié)果

對照組血漿和腸黏膜組織D-乳酸分別為(4.58 ±0.34)、(54.11±3.22)μg/mL，DAO活性分別為(4.47±0.28)、(62.64±4.11) U/L。膽色素結(jié)石患者血漿與腸黏膜的D-乳酸活性顯著低于對照組、膽固醇結(jié)石者及混合性結(jié)石者，DAO活性顯著高于對照組、膽固醇結(jié)石者及混合性結(jié)石者，P均＜0.05。除膽色素結(jié)石外，不同性質(zhì)和部位的結(jié)石患者血漿與腸黏膜的D-乳酸活性及DAO活性差異均無統(tǒng)計學(xué)意義，與對照組比較差異亦無統(tǒng)計學(xué)意義。詳見表1。

3　討論

膽石癥的發(fā)生機(jī)制目前尚未闡明。研究認(rèn)為，細(xì)菌感染和腸屏障功能性損傷在膽石形成的進(jìn)程中具有一定作用［3］。膽道感染致病菌源自腸道細(xì)菌逆行感染，進(jìn)而影響腸道屏障功能，促使腸道細(xì)菌及內(nèi)毒素更易進(jìn)到肝膽系統(tǒng)，從而參與膽石癥發(fā)病進(jìn)程［4］。研究不同部位及不同性質(zhì)的膽石癥患者腸道屏障功能對了解膽結(jié)石發(fā)病進(jìn)程具有重要意義。

D-乳酸是胃腸道固有細(xì)菌的產(chǎn)物，正常情況下很少被機(jī)體吸收，人體也不具備分解D-乳酸的酶系統(tǒng)。當(dāng)腸黏膜受損時，D-乳酸可以通過損傷的腸黏膜進(jìn)入血液導(dǎo)致血漿D-乳酸水平升高。因此測定血漿D-乳酸水平可以反映腸黏膜損傷情況，進(jìn)而反映腸黏膜通透性變化。DAO是腸黏膜上層絨毛細(xì)胞中具有高度活性的細(xì)胞內(nèi)酶，存在于小腸黏膜的上層絨毛內(nèi)。當(dāng)腸黏膜細(xì)胞受損，壞死細(xì)胞脫落后，其被釋放而經(jīng)腸腔入血，其水平可以反映腸黏膜損傷情況和腸黏膜通透性變化［5，6］。

本研究根據(jù)結(jié)石部位分類發(fā)現(xiàn)，膽囊結(jié)石、膽管結(jié)石、膽囊結(jié)石合并膽管結(jié)石患者所占比例相同;根據(jù)結(jié)石性質(zhì)分類發(fā)現(xiàn)，膽色素結(jié)石患者所占比例高于膽固醇結(jié)石、混合性結(jié)石患者。與Brun等［7］報道相似，表明膽石癥發(fā)生的部位比較隨機(jī)，但在性質(zhì)上，膽色素結(jié)石則相對更為常見。不同部位膽結(jié)石患者血漿和腸黏膜D-乳酸及DAO活性兩兩比較均無統(tǒng)計學(xué)差異;而膽色素結(jié)石患者血漿和腸黏膜的D-乳酸水平更低，但DAO活性均顯著高于其他三者，其余各組間血漿與腸黏膜D-乳酸及DAO活性均無統(tǒng)計學(xué)差異。表明膽結(jié)石患者腸黏膜通透性的變化與結(jié)石性質(zhì)有關(guān)，與結(jié)石部位無明顯相關(guān)。其原因可能是由于機(jī)體內(nèi)的生理變化致使腸道屏障功能減弱，此種異常性改變可因繼發(fā)性的細(xì)菌移位、內(nèi)毒素血癥及膽汁β型葡萄糖醛酸酶水平變化而改變［8］。這對于膽色素結(jié)石的產(chǎn)生具有一定的影響，腸道通透性增大可能會影響膽色素結(jié)石的病情進(jìn)展，而腸屏障功能損傷則在其形成和進(jìn)展中具有一定的促進(jìn)作用［9］。由于膽石癥患者腸黏膜通透性的改變主要與膽石癥的性質(zhì)有關(guān)，因此臨床上對膽結(jié)石高?；颊叩姆乐螒?yīng)重視腸屏障功能的變化。從本研究結(jié)果來看，膽色素結(jié)石患者的血漿和腸黏膜組織內(nèi)的D-乳酸水平更低，DAO活性更高，這種特點使得膽色素結(jié)石更易于鑒別。

綜上所述，膽色素結(jié)石患者血漿和腸黏膜組織內(nèi)的D-乳酸水平更低，DAO活性更高，說明此類患者的腸黏膜功能更易受損。臨床上應(yīng)重視此類患者腸屏障功能的變化，以更好地指導(dǎo)治療。

表1　不同結(jié)石性質(zhì)以及結(jié)石部位的膽結(jié)石患者血漿和腸黏膜組織D-乳酸及DAO活性(±s)

結(jié)石分類　n　D-乳酸(μg/mL)血漿　腸黏膜DAO活性(U/L)血漿　腸黏膜結(jié)石性質(zhì)膽色素結(jié)石　47　4.06±0.98*　51.09±7.46*　4.87±0.63*　69.92±4.27*膽固醇結(jié)石　41　4.47±0.72　53.18±7.19　4.45±0.55　63.52±8.88混合性結(jié)石　17　4.52±0.32　52.38±4.07　4.42±0.32　63.06±3.38結(jié)石部位膽囊結(jié)石　35　4.68±0.64　56.43±7.36　4.49±0.52　65.29±7.92膽管結(jié)石　35　4.73±0.57　57.30±8.29　4.46±0.47　65.14±8.27膽囊結(jié)石合并膽管結(jié)石　35　4.64±0.72　55.73±7.81　4.42±0.48　64.43±9.03

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(收稿日期:2014-11-18)

基金項目:濱州市科技發(fā)展計劃資助項目(2010ZC0768)。

文章編號:1002-266X(2015)18-0053-02

文獻(xiàn)標(biāo)志碼:B

中圖分類號:R575.6

doi:10.3969/j.issn.1002-266X.2015.18.019