齊 軼　王海麗　劉承軍　馬考成

（①山東省東營市畜牧獸醫(yī)局　257091?、诹某锹殬I(yè)技術(shù)學院　山東 聊城③山東省聊城市動物醫(yī)院）

衛(wèi)生檢疫

規(guī)模養(yǎng)豬場免疫抑制病發(fā)病機理及綜合防控技術(shù)的研究

齊 軼①王海麗②*劉承軍③馬考成①

（①山東省東營市畜牧獸醫(yī)局257091②聊城職業(yè)技術(shù)學院山東 聊城③山東省聊城市動物醫(yī)院）

PRRSV、PCV2、霉菌毒素都能引起豬免疫抑制，PRRSV可干擾豬免疫因子的合成、促進PAM及淋巴組織中淋巴細胞凋亡，PCV2可抑制淋巴細胞激活和增殖、降低PAM吞噬功能、引起豬淋巴細胞耗竭和淋巴細胞亞群發(fā)生變化，霉菌毒素可造成豬免疫器官發(fā)生病變甚至萎縮、抑制T細胞和B細胞增殖反應且誘導其凋亡、引起豬合成免疫球蛋白和抗體減少。加強飼養(yǎng)、建立微生物安全制度、嚴格馴化、科學免疫及科學使用藥物是應對豬場免疫抑制的有效措施。免疫抑制是指動物免疫系統(tǒng)受到損傷，導致機體暫時性或持久性的發(fā)生免疫應答障礙。致病因素主要是通過損傷動物機體免疫器官或者免疫細胞組織機構(gòu)，抑制或者阻斷病原呈遞，誘導免疫細胞凋亡，抑制免疫細胞、免疫因子及抗體的形成等方面造成免疫抑制。豬群發(fā)生免疫抑制的主要表現(xiàn)為商品豬發(fā)病不斷，死亡率較正常水平明顯偏高，豬群抗病能力降低，同一時期的豬群發(fā)生多種疾病，血清抗體檢測合格率偏低等現(xiàn)象。多種因素可造成豬發(fā)生免疫抑制，其中是豬繁殖與呼吸綜合癥病毒、豬圓環(huán)病毒Ⅱ型、霉菌毒素被認為是豬發(fā)生免疫抑制的主要原因。

1　豬繁殖與呼吸綜合癥病毒對豬造成免疫抑制的機理

大量研究表明，豬繁殖與呼吸綜合癥病毒（PRRSV）可與多種病原體發(fā)生協(xié)同，研究發(fā)現(xiàn)，豬繁殖與呼吸綜合癥病毒（PRRSV）可增加豬對豬流感病毒（SIV）、豬呼吸道副粘病毒、豬呼吸道冠狀病毒（PRCV）三種病毒易感性。

1.1PRRSV對機體合成炎性因子的干擾攻毒試驗發(fā)現(xiàn)，PRRSV感染的特征之一就是感染豬的肺內(nèi)炎性銀子表達不明顯，尤其表現(xiàn)為Ⅰ型干擾素、白細胞介素-1和腫瘤壞死銀子-α合成不足。I型干擾素作為動物非特異性免疫應答的組要組成部分，具有誘導相關(guān)免疫細胞表面產(chǎn)生抗病毒蛋白，增強免疫活性的功能，起到抗病毒的作用。研究表明，PRRSV能明顯抑制機體產(chǎn)生Ⅰ型干擾素，導致免疫細胞活性受到限制。Suradhat等檢測PRRSV感染豬支氣管灌洗液時發(fā)現(xiàn)，白細胞介素-10（IL-10）的表達量顯著提高，并認為PRRSV可通過提高外周血單核細胞中IL-10mRNA表達量來參與調(diào)節(jié)免疫反應。IL-10分泌增多和Ⅰ型干擾素減少則表現(xiàn)為非特異性免疫抑制，這有利于其他病原微生物對豬群造成感染和傳播。

1.2PRRSV引起肺巨噬細胞死亡POL等第一次對PRRS對豬的致病機理進行論證的時候發(fā)現(xiàn)，豬巨噬細胞（PAM）和支氣管上皮細胞是PRRSV感染宿主的主要靶細胞。PAM和單核細胞對細菌和病毒具有吞噬的作用。并且這種吞噬作用是病毒感染后機體只管重要的免疫應答反應。在體外試驗中，運用PRRSV感染PAM時發(fā)現(xiàn)，PRRSV可使培養(yǎng)液中PAM在攻毒后24h內(nèi)迅速凋亡，PRRSV 科研可引起溶解性抑制因子的缺失，導致巨噬細胞吞噬能力降低。PAM的損傷必然導致機體免疫功能的下降，為呼吸道繼發(fā)病原微生物感染創(chuàng)造機會。

1.3PRRSV對淋巴組織的影響PRRSV具有嗜巨噬細胞的特性，淋巴結(jié)和脾臟含有大量游離和固定的巨噬細胞。當PRRSV感染豬后首先PAM和肺內(nèi)皮細胞巨噬崩解，釋放出的病毒借助血液及淋巴循環(huán)到全身淋巴結(jié)和脾臟。進入淋巴結(jié)和脾臟的PRRSV可引起廣泛性的血管炎和炎性細胞聚集，被其他巨噬細胞吞噬，致使其他巨噬細胞崩解，最終導致外周淋巴組織器官出現(xiàn)壞死性炎癥。由于淋巴結(jié)、淋巴小結(jié)和副皮質(zhì)區(qū)及脾白髓和紅髓都受到廣泛性損傷，致使機體體液免疫和細胞免疫功能損傷。

2　豬圓環(huán)病毒Ⅱ型（PCV2）對豬造成免疫抑制的作用機理

一般認為，豬圓環(huán)病毒Ⅱ型（PCV2）是引起仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合癥（PMWS）的主要病原體，其發(fā)生的有平常主要為PCV2使仔豬淋巴組織、肺和肝出現(xiàn)以細胞浸潤為特征的炎性病變，當病變不能進行代償與修復時，機體代謝機能出現(xiàn)障礙最終導致PMWS，PMWS組織學上另外的顯著特征病變是淋巴濾泡區(qū)減小或缺失，淋巴細胞減少。從組織學病變觀察得知，PCV2能導致患病豬發(fā)生免疫抑制。

2.1PCV2對機體淋巴細胞激活及增加抑制Darwich等通過檢測PCV2感染豬血清樣品時發(fā)現(xiàn)，PCV2可使感染豬的百細胞介素-8和IFN-γ產(chǎn)量與健康豬相比明顯下降，PCV2還可誘導單核細胞產(chǎn)生IL-10，抑制干擾素分泌INF-α間接影響樹突狀細胞進一步發(fā)育成熟，最終導致DC的先天性免疫功能受到影響。PVC2還可在集體中其他單核細胞、巨噬細胞等抗原遞呈細胞中存在，并引起機體對于抗原遞呈能力的降低。說明PCV2能抑制感染豬產(chǎn)生炎癥反應，參與免疫調(diào)節(jié)的細胞因子表達數(shù)量的改變使得PCV2感染后淋巴細胞不能有效激活或增殖，最終破壞免疫功能。

2.2PCV2對PAM功能的影響MCneilly等在體外培養(yǎng)的豬PAM中進行Pcv2攻毒，結(jié)果發(fā)現(xiàn)PCV2感染后8天可降低PAM主要組織相容性方程基因-Ⅱ類抗原的表達，導致集體感染免疫反應不能及時啟動，并且，PCV2對巨噬細胞介導的淋巴細胞增生有明顯抑制作用。

2.3PCV2引起患豬淋巴細胞耗竭PCV2感染豬外周血液中B細胞和T 細胞數(shù)量較正常豬少，此為PCV2導致患病豬免疫抑制的另外一個主要原因。PCV2引發(fā)PMWS癥狀出現(xiàn)的根本原因是PCV2感染豬可誘導機體淋巴細胞數(shù)量減少，尤其在感染初期，B細胞和T細胞減少更為顯著，患病豬器官逐漸表現(xiàn)為功能性障礙。研究表明，PMWS患病豬淋巴細胞減少的主要原因是PCV2可抑制淋巴細胞增殖。

2.4PCV2引起患豬淋巴細胞亞群發(fā)生變化大量研究表明，自然或人工感染PCV2豬外周血液中的淋巴細胞亞群比例發(fā)生變化，Darwich等通過研究進一步證明了PCV2具有降低患病豬外周血液中CD8+細胞和DP細胞比例的作用。CD8+細胞及DP細胞在機體免疫反應中發(fā)揮著非常重要的作用，其減少必將影響機體的免疫應答。

3　霉菌毒素對豬造成免疫抑制的作用原理

霉菌毒素作為霉菌的次級代謝產(chǎn)物，在自然系中種類繁多，目前發(fā)現(xiàn)300多種有各種毒性作用的霉菌毒素廣泛存在于食品和飼料原料中。霉菌毒素對豬的危害主要體現(xiàn)在對豬免疫系統(tǒng)的破壞及對免疫應答的強烈抑制，主要表現(xiàn)為免疫蛋白和抗體水平的下降、網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)損傷、細胞介導的免疫功能下降以及免疫器官發(fā)育異常等。有研究表明，黃曲霉毒素和T-2毒素可通過有 胸腺組織細胞DNA和RNA結(jié)合并抑制其繁殖，引起胸腺發(fā)育不良甚至萎縮。導致胸腺組織中淋巴細胞減少，且玉米赤霉烯酮可導致免疫器官實質(zhì)性損傷，抑制T、B淋巴細胞增殖，對集體造成免疫抑制。

4　豬場免疫抑制的應對措施

可造成豬發(fā)生免疫抑制的因素眾多，包括物理環(huán)境因素、化學因素、營養(yǎng)及其他病原微生物等因素，涉及豬場的掛你、用藥和防疫等多哥方面。一般情況下，當豬場發(fā)生免疫抑制時候，種母豬血清抗體水平下降，表現(xiàn)為仔豬出生后通過哺乳獲得的母源抗體保護力降低或保護時間縮短，導致仔豬發(fā)病率較正常水平高。此外，發(fā)生免疫抑制的懷孕母豬容易感染某些具有胎毒性的病原體如豬瘟病毒。為避免豬發(fā)生免疫抑制，必須做好以下幾點：

4.1提高豬場飼養(yǎng)管理水平保證豬舍適宜的通風、溫度、濕度、養(yǎng)殖密度，夏季注意通風降溫，冬季將強保溫工作，避免圈舍過于潮濕。保證豬群飲水清潔，特別是采用地下水飼喂的情況下，暴雨過后需在飲水中添加適量消毒藥。杜絕使用霉變飼料，在潮濕季節(jié)可在飼料中添加脫霉素。保證日糧營養(yǎng)全面和均衡，適當補充微量元素。盡量為豬群飲食休息提供良好的環(huán)境，避免豬場因應激產(chǎn)生免疫抑制。

4.2建立嚴格的微生物安全制度一般情況下，豬舍需每周交替使用不同的消毒劑消毒1～2次，消毒時應保證衛(wèi)生死角的徹底消毒。豬場盡量避免外來人員進入豬舍，外來人員進入豬舍必須經(jīng)消毒、洗澡、更衣、隔離2～5天后方可進入豬舍。豬場內(nèi)工作人員每次由生活區(qū)進入生產(chǎn)區(qū)前要經(jīng)過洗澡、更衣后方可進入豬舍。

4.3及時隔離或者淘汰重大疫病患豬定期對豬場進行重大一并抽樣檢測，及時預防、發(fā)現(xiàn)并處理豬場疾病的發(fā)生。當發(fā)現(xiàn)豬場有疑似重大動物疫病時，為防止病原體傳播，應盡早進行隔離或淘汰處理，并對豬群進行必要的緊急接種和藥物預防，最大限度避免一并所導致的豬場免疫抑制。

4.4嚴格執(zhí)行馴化工作為防止新引進的豬群攜帶并傳播重大免疫抑制性疾病，新引進的豬群必須在隔離區(qū)飼養(yǎng)2～3個月左右方可與原來的豬群混合飼養(yǎng)，切混群飼養(yǎng)前必須對新引進的豬群根據(jù)豬場實際情況完成疫苗接種，馴化過程中要密切觀察整個豬群健康狀況，如遇發(fā)病，應及時采取有效措施，帶豬群恢復后，再次開始馴化工作，嚴禁縮短馴化時間。

4.5科學制訂免疫程序豬場應進行血清課題檢測3～4次/年，根據(jù)血清抗體檢測結(jié)果調(diào)整或制定豬場免疫程序。在重大一并高發(fā)區(qū)，對相應疾病疫苗及時接種。關(guān)于PRRS疫苗免疫，應盡量使用弱毒疫苗免疫，一般情況下每年接種HP-PRRSV弱毒疫苗4次、口蹄疫4次、豬瘟3～4次。為減少疫苗接種產(chǎn)生的應激，防止疫苗接種可能產(chǎn)生的免疫抑制，應盡量避免同時接種多種疫苗，接種前后在飲水中添加電解多維等。

4.6科學使用藥物有些藥物如地塞米松等糖皮質(zhì)激素類藥物、四環(huán)素類藥物，即使在質(zhì)量量水平也可在有一程度上造成豬免疫損傷。豬場大劑量、長時間使用某種抗生素導致病原微生物耐藥基因產(chǎn)生，且該情況下更容易對豬群造成免疫器官損傷，導致免疫抑制的發(fā)生。豬場應避免長時間使用某一種抗生素，正確的方法是將多種抗生素交替使用。適時向日糧中添加微生態(tài)制劑，改善豬群亞健康，減少豬場抗生素使用頻率及使用量。

中圖分類號：S852.4

文獻標識碼：C

文章編號：1007-1733（2015）04-0042-02

收稿日期：（2015-01-20）

基金項目：山東省高等學?？萍及l(fā)展計劃（課題編號：J14LF56）