史順宏 劉祥祥

(濟(jì)源市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所,河南濟(jì)源 459000)

動(dòng)物檢疫材料的采集和檢疫方法探討

史順宏 劉祥祥

(濟(jì)源市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所,河南濟(jì)源 459000)

動(dòng)物檢疫是消滅畜禽傳染病的重要手段,是獸醫(yī)防疫工作的重要組成部分。認(rèn)真做好動(dòng)物檢疫工作能夠避免畜禽類傳染病的發(fā)生。動(dòng)物檢疫工作具體包括使用各種診斷方法對(duì)動(dòng)物產(chǎn)品,進(jìn)行疾病和疫情的檢測(cè),確定其是否帶病,一旦發(fā)現(xiàn)疫情必須立刻采取相應(yīng)措施防止疫病的進(jìn)一步擴(kuò)散和蔓延。因此做好動(dòng)物檢疫材料的采集和檢疫十分重要。

動(dòng)物檢疫;采集;檢疫方法

動(dòng)物檢疫就是應(yīng)用各種診斷方法，對(duì)畜禽及畜禽產(chǎn)品進(jìn)行疫病檢查，確定病情，并采取相應(yīng)的措施，防止疫病的發(fā)生、擴(kuò)散和蔓延，盡快地?fù)錅缫卟〉牧餍?。文章就?dòng)物檢疫材料的采集和檢疫方法展開(kāi)討論，介紹動(dòng)物材料的采集原則和目前比較常用的檢疫方法以及在工作中的心得體會(huì)闡述如下。

1 動(dòng)物檢疫材料的采集原則

動(dòng)物檢疫材料的采集一般要遵循以下幾個(gè)原則標(biāo)準(zhǔn)，分別為典型原則、合理原則、適時(shí)原則、無(wú)菌采樣和安全采樣。（1）樣本的選擇要具有代表性，如果是活體采樣要挑選典型動(dòng)物，具體為具有典型癥狀并且沒(méi)有接受任何藥物治療的動(dòng)物。確定動(dòng)物個(gè)體后，對(duì)于材料的選擇也要求典型，如應(yīng)該選擇病原體含量比較高的部位進(jìn)行采樣。對(duì)于患細(xì)菌性疾病的動(dòng)物，應(yīng)注意采集其血液、口鼻分泌物、乳汁、膿汁或局部腫脹滲出液、體腔液、尿液、生殖道分泌物和糞便等。動(dòng)物尸體采樣：以無(wú)菌操作采集有病變的組織、器官或病變最明顯、最典型的部位，含病毒或細(xì)菌量最多的臟器或內(nèi)容物；供病理組織切片的樣品，應(yīng)包含有病變和其周圍較正常的組織，包含器官的重要組成部分。（2）采樣是還要選擇合理的個(gè)體數(shù)目，一般而言對(duì)于群體發(fā)病類的疾病，需要選取至少5個(gè)動(dòng)物個(gè)體作為原始樣本。同時(shí)一定要保證樣本的數(shù)量可以滿足實(shí)驗(yàn)需求，還要考慮到備樣的可能性。（3）采集樣本時(shí)要根據(jù)具體情況進(jìn)行分析，比如應(yīng)該注意采樣的節(jié)令性，對(duì)于病死的動(dòng)物要求立刻進(jìn)行采樣，尤其在氣溫比較高的夏季，為了避免動(dòng)物尸體進(jìn)一步腐爛，采樣時(shí)間一般不能超過(guò)死亡時(shí)間后4h。拖延過(guò)久，則組織變性、腐敗，影響檢驗(yàn)結(jié)果。而對(duì)于初步診斷為病毒感染的動(dòng)物，如從其活體上采集病料，必須在發(fā)病初期、急性期或發(fā)熱期進(jìn)行，否則病毒會(huì)很快在血液中消失，組織內(nèi)病毒的含量也因抗體的產(chǎn)生而迅速下降。（4）采樣過(guò)程應(yīng)該為無(wú)菌的過(guò)程，因?yàn)樵S多樣本需要進(jìn)一步進(jìn)行微生物學(xué)、血液學(xué)的相關(guān)檢測(cè)，所以必須符合相關(guān)的實(shí)驗(yàn)要求，采樣部位、采樣用具、盛放樣品的容器均需滅菌處理。做到既要避免污染，又要防止病毒被滅活。（5）采樣過(guò)程中的采樣人員的安全性也十分重要，相關(guān)采樣人員要嚴(yán)格按照規(guī)范采樣流程進(jìn)行操作，避免可能的感染事故發(fā)生，一旦發(fā)現(xiàn)疫情也要及時(shí)匯報(bào)并隔離病源，防止進(jìn)一步的環(huán)境污染和疫情擴(kuò)散。當(dāng)懷疑為炭疽時(shí)應(yīng)禁止剖檢，可在頸靜脈處切開(kāi)皮膚，抽取血液做血片數(shù)張，立即送檢。

2 動(dòng)物檢疫的方法

動(dòng)物檢疫包括臨場(chǎng)檢疫、抽樣檢疫、隔離檢疫和實(shí)驗(yàn)室檢疫。臨場(chǎng)檢疫包括問(wèn)診、嗅診、聽(tīng)診、叩診、觸診、視診等一系列的檢查，是動(dòng)物檢疫的常用方法。個(gè)體檢查主要針對(duì)具有可疑病態(tài)的動(dòng)物，檢驗(yàn)的目的是初步判斷動(dòng)物個(gè)體是否有病，然后再進(jìn)一步進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的步驟。人體肉眼無(wú)法準(zhǔn)確觀測(cè)到樣品組織的許多病變過(guò)程，如腫瘤的發(fā)生、腦組織病變等。所以需要借助組織切片和染色技術(shù)，如石蠟切片、蘇木素染色法等技術(shù)。

2.1 病理學(xué)檢查技術(shù)

被檢動(dòng)物中，具有臨床癥狀，一般的檢疫方法又不能確診，或病畜出現(xiàn)死亡，則應(yīng)進(jìn)行病理學(xué)檢查。有些疫病如豬萎縮性鼻炎、馬鼻疽、新城疫等通過(guò)病理剖檢?？色@得確診。即使不能確診，也能提示出診斷方向。進(jìn)行病理剖檢時(shí)，還需無(wú)菌采取病變組織。以供組織學(xué)檢查或病原學(xué)檢查。

2.1.1 病理剖檢檢查技術(shù)

動(dòng)物病理剖檢檢查技術(shù)主要包括：（1）剖檢前尸體表征檢查。對(duì)動(dòng)物尸體剖檢前檢查尸體體表特征，以排除炭疽等惡性傳染病。惡性傳染病禁止剖檢。（2）外部檢查。檢查尸體變化、皮膚、被毛及營(yíng)養(yǎng)狀況以及天然孔。（3）內(nèi)部檢查。皮下檢查、內(nèi)臟器官的檢查、口腔、鼻腔和頸部器官的檢查。（4）剖檢檢查。

2.1.2 病理組織學(xué)檢查

病理組織學(xué)檢查能夠彌補(bǔ)肉眼檢查的不足，進(jìn)一步明確病變性質(zhì)，常使疫病得到確診。常用的有石蠟切片、蘇木素一伊紅（H·E）染色法、快速冰凍切片。

2.2 病原學(xué)檢查技術(shù)

動(dòng)物的很多傳染病都只能通過(guò)病原學(xué)檢查技術(shù)進(jìn)行確診，它的特點(diǎn)是較復(fù)雜，要求一定的技術(shù)和設(shè)備條件。（1）細(xì)菌性傳染病病原檢查：顯微鏡檢查法、培養(yǎng)檢查法、生化試驗(yàn)、動(dòng)物試驗(yàn)。（2）病毒性傳染病病原檢查：先要進(jìn)行病毒分離培養(yǎng)．而后采用以下檢查方法：包涵體檢查（狂犬病、偽狂犬病、犬瘟熱病毒的包涵體）、病毒培養(yǎng)性狀觀察（雞新城疫病毒、雞痘病毒、細(xì)胞病變）、病毒形態(tài)學(xué)觀察（有直接電鏡觀察和免疫電鏡技術(shù)）、病毒核酸檢測(cè)（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）。（3）寄生蟲(chóng)病病原檢查：蟲(chóng)卵檢查法（直接涂片鏡檢和集卵法檢查）、蟲(chóng)體檢查法。（4）PCR技術(shù)：在動(dòng)物檢疫中，它主要用于微量樣品和不完整病原的檢測(cè)，尤其適用于個(gè)體極小、難于觀察且難于人工培養(yǎng)的病毒的檢測(cè)。過(guò)去用常規(guī)檢測(cè)技術(shù)幾天甚至幾周才能完成的試驗(yàn)，用該技術(shù)幾個(gè)小時(shí)便可完成，這使禽流感等疫病的病原檢測(cè)技術(shù)獲得突破。并且該技術(shù)操作的每一步都不需要活的病毒，不會(huì)造成病原對(duì)環(huán)境的污染，對(duì)防疫有重大意義。

2.3 免疫學(xué)檢查技術(shù)

免疫學(xué)檢查技術(shù)對(duì)于傳染病的診斷是非常必要的。由于許多傳染病的抗原、陽(yáng)性血清和診斷液已商品化，只要采取可作為抗原的被檢病料或被檢血清等便可進(jìn)行。免疫學(xué)診斷具有需時(shí)較短、操作簡(jiǎn)便、結(jié)果可靠的優(yōu)點(diǎn)。主要方法有凝集反應(yīng)，如直接凝集反應(yīng)、間接凝集反應(yīng)、血凝和血凝抑制試驗(yàn)；沉淀反應(yīng)，如環(huán)狀沉淀反應(yīng)、瓊脂擴(kuò)散反應(yīng)。

[1] 王柏學(xué).動(dòng)物檢疫樣品的采集和檢疫方法初探[J].吉林畜牧獸醫(yī)，2009，30（12）：54.