劉克萬(wàn)，陳偉

作者單位：230031合肥市解放軍第105醫(yī)院高壓氧科

自體干細(xì)胞移植聯(lián)合高壓氧治療失代償期肝硬化療效觀察

劉克萬(wàn)，陳偉

作者單位：230031合肥市解放軍第105醫(yī)院高壓氧科

第一作者：劉克萬(wàn)，男，44歲，主治醫(yī)師。E-mail: liukewan1971@aliyun.com

【摘要】目的探討自體骨髓干細(xì)胞移植聯(lián)合高壓氧治療失代償期肝硬化患者的療效。方法回顧性分析2010年10月～2012年10月在我院住院治療的48例失代償期肝硬化患者在接受自體骨髓干細(xì)胞移植或/和聯(lián)合高壓氧治療后6個(gè)月時(shí)的療效。結(jié)果24例接受聯(lián)合治療的患者在治療后2天所有患者失眠、納差、乏力癥狀開始改善，而24例對(duì)照組只有1例患者以上癥狀開始改善；在治療后6個(gè)月，聯(lián)合治療患者血清總膽紅素、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、白蛋白和凝血酶原活動(dòng)度分別為（28.6±19.1）μmol/L、（111.0±55.2）U/L、（35.2±8.5）g/L和（75.6±10.4）%，而對(duì)照組則分別為[（35.3±21.7）μmol/L、（267.0±124.0）U/L、（28.8±7.8）g/L和（57.9±11.7）%，P<0.05]。結(jié)論自體骨髓干細(xì)胞移植聯(lián)合高壓氧治療失代償期肝硬化患者能迅速改善臨床癥狀，促進(jìn)睡眠，且能在近期恢復(fù)肝功能。

【關(guān)鍵詞】失代償期肝硬化；干細(xì)胞；高壓氧；治療

Autologous bone marrow stem cell transplantation in combination of hyperbaric oxygenation in treatment of patients

decompensated liver cirrhosis

Liu Kewan，Chen Wei. Department of Hyperbaric Oxygenation，105th Hospital，Hefei 230031

【Key words】Liver cirrhosis；Autologous bone marrow stem cell transplantation；Hyperbaric oxygenation；Efficacy

肝硬化是世界性分布的常見(jiàn)病，病因多樣，各國(guó)多發(fā)病因也不一樣。我國(guó)以乙型肝炎和丙型肝炎肝硬化為多，其發(fā)病率未見(jiàn)減少。在大多數(shù)患者，因疾病和社會(huì)因素的影響，多伴有不同程度的睡眠障礙或失眠。對(duì)于失代償期肝硬化患者，常規(guī)內(nèi)科只能針對(duì)病因治療和給予對(duì)癥處理。尋求療效較好的治療失代償期肝硬化或阻止或延緩其病情進(jìn)展的方法顯得尤為重要。干細(xì)胞來(lái)源豐富，且可取自自體骨髓，進(jìn)行干細(xì)胞移植可避免排斥反應(yīng)，取材方便，能被一般患者所接受。目前，國(guó)內(nèi)外已經(jīng)有干細(xì)胞移植治療肝硬化的臨床觀察報(bào)告，很多學(xué)者開展了一系列基礎(chǔ)和臨床研究，并取得了一定的成果，為骨髓干細(xì)胞移植提供了較為完備的理論和實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)，而自體骨髓干細(xì)胞經(jīng)肝功脈插管介入移植治療在臨床上已經(jīng)成為一種可行的技術(shù)。但干細(xì)胞移植仍然處于起步階段，要大規(guī)模地應(yīng)用于臨床，還需要更深入的探索。本文就我院近年來(lái)采用自體骨髓干細(xì)胞移植聯(lián)合高壓氧（Hyperbaric oxygenation,HBO）治療活動(dòng)性肝硬化患者的療效觀察匯報(bào)如下。

1　資料與方法

1.1病例選擇2010年10月～2012年10月我院收治的失代償期肝硬化患者48例，其中肝炎肝硬化30例（62%），酒精性肝硬化6例（13%），原發(fā)性膽汁性肝硬化4例（8%），血吸蟲病性肝硬化2例（4%）,隱源性肝硬化6例（13%）。診斷符合2010年中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)和感染病學(xué)分會(huì)修訂的慢性乙型肝炎防治指南[1]及其相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。研究計(jì)劃經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)備案，全部患者入組時(shí)均對(duì)治療研究充分知情并簽字同意。采用隨機(jī)數(shù)字表法將患者分為聯(lián)合治療組和對(duì)照組各24例。聯(lián)合治療組中男性15例，女性9例，年齡20～63歲，平均年齡（39.3±3.7）歲；對(duì)照組中男性14例，女性10例，年齡21～65歲，平均（40.4±4.0）歲。兩組患者在性別、年齡和病因方面比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。入組病人均有納差、乏力和失眠癥狀，均無(wú)活動(dòng)性出血、氣胸、精神異常及氧中毒史等高壓氧治療絕對(duì)禁忌證。

1.2治療方法給予對(duì)照組經(jīng)肝動(dòng)脈自體骨髓干細(xì)胞移植術(shù)及內(nèi)科常規(guī)應(yīng)用促肝細(xì)胞生長(zhǎng)素、苦參堿抗肝纖維化、降低門靜脈壓及對(duì)癥支持等治療；聯(lián)合治療組在對(duì)照組的基礎(chǔ)上聯(lián)合高壓氧治療：使用蕪湖潛水裝備廠生產(chǎn)的大型醫(yī)用高壓氧艙（證書編號(hào)為CY2003352），加壓25 min,穩(wěn)定壓力為0.20 MPa（2.0 ATA），穩(wěn)壓時(shí)間為70 min，穩(wěn)壓期間吸管道純氧30 min后休息，休息期間呼吸艙內(nèi)空氣，休息10 min后再吸純氧30 min，減壓30 min出艙。吸氧方式為戴面罩吸氧，1次/d，連續(xù)20 d。每次治療后，艙內(nèi)行空氣消毒。

1.3觀察指標(biāo)常規(guī)檢測(cè)血生化、凝血等指標(biāo)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理計(jì)量資料以（x±s）表示，應(yīng)用SPSS 13.0軟件行t檢驗(yàn)，P<0.05為具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2　結(jié)果

2.1臨床癥狀改善情況聯(lián)合治療組所有患者在治療2天后失眠、納差、乏力癥狀開始改善，而對(duì)照組只有1例患者以上癥狀開始改善。

2.2肝功能指標(biāo)變化情況治療后6月觀察療效，結(jié)果見(jiàn)表1。

3　討論

在肝硬化的發(fā)病過(guò)程中，由于毒物或致病微生物的不斷作用，肝細(xì)胞發(fā)生水腫、變性、壞死；而另一方面，由于肝細(xì)

胞壞死可誘發(fā)周圍非實(shí)質(zhì)細(xì)胞受損，纖維結(jié)締組織增生，肝組織瘀血，氧供給障礙，引起肝損傷進(jìn)一步加重，形成惡性循環(huán)。近來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)，肝硬化患者不僅存在肝臟局部瘀血等因素所致的內(nèi)呼吸障礙，還有肝-肺綜合征樣的外呼吸異常。據(jù)報(bào)道，30%～70%肝硬化患者存在低氧血癥[2]。缺血和缺氧可影響肝細(xì)胞線粒體功能和肝組織微循環(huán)功能，影響肝細(xì)胞新陳代謝。在肝硬化形成過(guò)程中，大量纖維結(jié)締組織增生，膠原纖維沉積于肝竇血管壁內(nèi)、外，使肝竇毛細(xì)血管化，導(dǎo)致氧彌散距離延長(zhǎng)，引起缺氧；在肝纖維化假小葉內(nèi)，由2～3層細(xì)胞組成的肝細(xì)胞板層取代了正常的單層細(xì)胞層，使肝組織血管表面積與肝竇面積之比的絕對(duì)值下降，導(dǎo)致肝細(xì)胞和肝組織缺氧。另外，由于長(zhǎng)期的疾病折磨，久治不愈和病情反復(fù)發(fā)作，肝硬化患者病情逐漸進(jìn)展和加重，使其對(duì)治療失去信心，長(zhǎng)期治療的經(jīng)濟(jì)壓力增加，擔(dān)心疾病影響了工作，這些因素都能導(dǎo)致患者睡眠障礙或失眠，如此惡性循環(huán)，造成肝損害加重，出現(xiàn)納差、乏力、尿黃和失眠。

干細(xì)胞具有自我更新、增殖和多向潛能分化的細(xì)胞，可不對(duì)稱分裂和無(wú)限增殖。按來(lái)源不同，可將干細(xì)胞分為胚胎干細(xì)胞和成體干細(xì)胞[3]。骨髓干細(xì)胞就是成體干細(xì)胞的一種。骨髓干細(xì)胞有多向分化潛能及自身增殖的特性，且取材方便，組織損傷小，易于自體移植、無(wú)排斥反應(yīng)，而且沒(méi)有胚胎干細(xì)胞移植的倫理學(xué)爭(zhēng)論，是理想的細(xì)胞來(lái)源，所以迄今應(yīng)用于臨床研究的主要是骨髓干細(xì)胞。目前，國(guó)內(nèi)外有研究證實(shí)，從骨髓中分離出來(lái)的干細(xì)胞在體外分化誘導(dǎo)劑的作用下可分化為肝樣細(xì)胞。干細(xì)胞移植的途徑有原位移植和非原位移植。非原位移植包括外周靜脈移植，但外周靜脈移植可能由于肺的攔截作用，使到達(dá)病灶的干細(xì)胞數(shù)目受限。本組選用自體骨髓干細(xì)胞是存在于骨髓中的多潛能細(xì)胞，在放射介入下經(jīng)導(dǎo)管插入肝動(dòng)脈進(jìn)行細(xì)胞移植。

患者在高于1個(gè)大氣壓（ATA）的環(huán)境里吸入100%純氧治療疾病的過(guò)程即為高壓氧治療。2006年，美國(guó)Stephen教授在《美國(guó)心臟與循環(huán)生理雜志》上發(fā)表了《高壓氧治療使干細(xì)胞釋放》的論文，將高壓氧治療帶入了又一個(gè)里程碑。他認(rèn)為，干細(xì)胞對(duì)損傷的修復(fù)起決定性作用，高壓氧治療的患者體內(nèi)循環(huán)干細(xì)胞數(shù)量增加了8倍。高壓氧治療是臨床上提升干細(xì)胞數(shù)量最安全的方法，比其他任何藥物都安全有效。本組病例中高壓氧在其中起到一舉兩得的效果：對(duì)“病肝”的治療作用，主要與與HBO特性有關(guān)：（1）HBO能提高動(dòng)脈血氧分壓，增加氧的有效彌散半徑及彌散速度，使腦組織獲得了充足的氧供，使大腦氧代謝增強(qiáng)，葡萄糖利用率增加，ATP生成增多，能使網(wǎng)狀系統(tǒng)和腦干部位供血增加，從而改善垂體、邊緣系統(tǒng)及大腦皮層的功能，使失調(diào)的大腦皮層的生理活動(dòng)逐漸得到恢復(fù)，改善睡眠[4，5]，使食欲增強(qiáng)，體力恢復(fù)；（2）HBO能明顯增加血液中物理溶解氧，提高血氧含量，減輕肝組織瘀血，改善缺血、缺氧；（3）HBO能增加微血管血流速度，減少紅細(xì)胞和血小板聚集，改善紅細(xì)胞彈性和變形能力，對(duì)于微循環(huán)紊亂的肝硬化組織也有益處；（4）HBO可以促進(jìn)血管成纖維細(xì)胞的活動(dòng)和分裂，促進(jìn)新生血管的形成，加速側(cè)支循環(huán)的建立，從而明顯改善肝臟血液循環(huán)，改善血液黏滯度，促進(jìn)受損組織的再生與修復(fù)，恢復(fù)肝功能。高壓氧治療能促進(jìn)干細(xì)胞增殖和分化。彭爭(zhēng)榮等[6]在培養(yǎng)神經(jīng)干細(xì)胞時(shí)，在不同條件下培養(yǎng)，將高壓氧組置于高壓動(dòng)物艙內(nèi)，給予0.2 MPa （2.0 ATA）大氣壓，氧濃度在80%以上；高壓力組給予細(xì)胞0.2 MPa（2.0 ATA）大氣壓的壓縮空氣；高濃度氧組給予80%以上的氧；對(duì)照組給予正常氣壓和正常氧濃度。7 d后發(fā)現(xiàn)高壓氧組神經(jīng)元分化率明顯高于對(duì)照組、高濃度氧組和高氣壓組，膠質(zhì)細(xì)胞分化率卻低于以上3組，表明高壓氧處理能上調(diào)神經(jīng)干細(xì)胞向神經(jīng)元分化的比例，高壓氧還能促進(jìn)干細(xì)胞在體內(nèi)存活、遷移。在移植干細(xì)胞后，主要存在的問(wèn)題是移植細(xì)胞能否存活并到達(dá)受損部位，高壓氧在這方面能起到積極的作用。

干細(xì)胞治療失代償期肝硬化患者的效果已經(jīng)在臨床實(shí)驗(yàn)中得到證實(shí)。從本文資料看，聯(lián)合高壓氧治療，可進(jìn)一步增加療效?？梢酝茰y(cè)聯(lián)合高壓氧可能成為治療多種疾病的新思路及有效手段，不失為一種經(jīng)濟(jì)有效的方法。由于本次觀察病例數(shù)較少，時(shí)間不長(zhǎng)，其療效仍需觀察。由于檢測(cè)指標(biāo)的局限，尚缺乏病理學(xué)和超聲影像學(xué)方面的資料，每次移植干細(xì)胞的數(shù)目、移植次數(shù)、移植間隔及高壓氧穩(wěn)定在多大的壓力為宜尚無(wú)文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)，這些問(wèn)題都有待于后續(xù)研究探索。

【參考文獻(xiàn)】

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[6]彭爭(zhēng)榮，王素娥，肖平田.高壓氧對(duì)腦源性神經(jīng)干細(xì)胞分化的影響.中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù)，2007，11:427-430.

（收稿：2015-05-30）

（本文編輯：陳宗炳)

·短篇論著·

DOI：10.3969/j.issn.1672-5069.2015.04.025