陳傳秀，金 青

(青島科技大學(xué)化工學(xué)院，山東青島 266042)

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2種輔料對蘋果蠹蛾性信息素含量測定的影響

陳傳秀，金 青*

(青島科技大學(xué)化工學(xué)院，山東青島 266042)

[目的]研究淀粉、β-環(huán)糊精(β-CD)2種輔料對蘋果蠹蛾性信息素含量測定的影響。[方法]采用氣相色譜法，檢測淀粉、β-CD以及分別采用淀粉、β-CD制成的粉劑和顆粒劑中蘋果蠹蛾性信息素的含量。[結(jié)果]混合物中蘋果蠹蛾性信息素的提取回收率為99.64%～100.02%；粉劑和顆粒劑中蘋果蠹蛾性信息素的平均回收率為99.95%～100.00%。[結(jié)論] β-CD和淀粉均不影響蘋果蠹蛾性信息素的含量測定，相容性較好，可進(jìn)一步進(jìn)行劑型研究。

淀粉；β-CD；蘋果蠹蛾性信息素；含量測定；氣相色譜法

Starch；β-CD；Cydiapomonella(L.) sex pheromone；Content determination；Gas chromatography

蘋果蠹蛾[Cydiapomonella(L. )]是仁果類主要的害蟲之一，自19世紀(jì)50年代侵入新疆地區(qū)以來，給我國造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[1]。蘋果蠹蛾對環(huán)境的適應(yīng)能力強(qiáng)，以幼蟲蛀果危害，防治難度高[2]；同時(shí)化學(xué)農(nóng)藥長期大量的使用也造成了蘋果蠹蛾抗藥性的增加，給防治工作帶來了困難[3]。

昆蟲性信息素[4]被國外稱為“第3代農(nóng)藥”，具有高效、無毒、無污染、不傷害益蟲等優(yōu)點(diǎn)，利用性信息素誘捕害蟲成為一種切實(shí)可行并且應(yīng)用廣泛的害蟲管理技術(shù)。1971年，Roelofs等[5]首次鑒定出蘋果蠹蛾性信息素的主要成分為E8，E10-十二碳二烯醇，現(xiàn)在主要利用誘芯來監(jiān)測和誘殺害蟲。由于目前蘋果蠹蛾性信息素的使用方式較為單一，筆者研究了淀粉和β-CD 2種常用緩釋材料對蘋果蠹蛾性信息素含量測定的影響，以期為利用該2種輔料制備緩釋制劑的研究奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 主要儀器。電子分析天平(上海精密科學(xué)儀器有限公司，F(xiàn)A1004N型)、氣相色譜儀(Agilent 6890N GC)、標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)篩(24、100目，浙江省上虞市滬江儀器紗篩廠)、西林瓶(10 ml，安徽華欣藥用玻璃有限公司)、有機(jī)濾膜(0.25 μm，上海市新亞凈化器件廠)、溫濕度計(jì)(上海晨光文具股份有限公司)。

1.1.2 試劑。淀粉(藥用，天津市廣成化學(xué)試劑有限公司)、β-環(huán)糊精(藥用，天津博迪化工股份有限公司)、蘋果蠹蛾性信息素(原料藥，純度97%，E8，E10-十二碳二烯醇，上海遐瑞醫(yī)藥科技有限公司)、正己烷(色譜純，天津市津東天正化學(xué)試劑廠)、無水乙醇(分析純，山東萊陽經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)精細(xì)化工廠)。

1.2 方法

1.2.1 蘋果蠹蛾性信息素分析方法的建立。

1.2.1.1 色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)。色譜條件：毛細(xì)色譜柱(30.0 m×250.00 μm×0.25 μm)，普通氮?dú)鉃檩d氣，以氫氣為燃?xì)?，空氣為助燃?xì)猓魉贋? ml/min，初溫120 ℃，保留1 min，升溫速率為20 ℃/min，終溫300 ℃，保留 6 min，檢測器300 ℃，氣化室250 ℃，進(jìn)樣量1 μl。

1.2.1.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。稱取E8，E10-十二碳二烯醇，用正己烷稀釋成濃度為80.5、161.0、241.5、323.0、402.5、563.5 μg/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液，置于10 ml容量瓶中，用Agilent 6890N氣相色譜儀測定不同濃度對應(yīng)的峰面積。

1.2.2 輔料對蘋果蠹蛾性信息素含量測定影響的研究。配制低、中、高(243.0、304.0、365.0 μg/ml)3個(gè)濃度的性信息素溶液，各取10 ml，分別與1.0 g輔料充分混勻，密閉。5 min后過濾，進(jìn)樣1 μl測其峰面積，計(jì)算回收率，考察2種輔料對不同濃度蘋果蠹蛾性信息素含量測定的影響程度。

1.2.3 方法學(xué)考察。

1.2.3.1 精密度試驗(yàn)。量取濃度為304.0 μg/ml的E8，E10-十二碳二烯醇對照品溶液1 μl進(jìn)樣，測其峰面積值，重復(fù)6次，計(jì)算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)。

1.2.3.2 穩(wěn)定性試驗(yàn)。于0、1、4、8、12、24 h量取304.0 μg/ml E8，E10-十二碳二烯醇對照品溶液1 μl進(jìn)樣，對其峰面積進(jìn)行積分，計(jì)算RSD。

1.2.4 樣品的測定。

1.2.4.1 粉劑中信息素含量的測定。稱取適量蘋果蠹蛾性信息素溶解在1 ml正己烷中，與輔料混合均勻，按每份1 g(約含信息素10 mg)分裝在西林瓶中密封。制備3批。每次取3份樣品，分別倒入25 ml容量瓶中，用正己烷定容，超聲10 min后，0.25 μm濾膜過濾，進(jìn)樣1 μl測其峰面積。

1.2.4.2 顆粒劑中信息素含量的測定。輔料過100目篩，稱取處方量蘋果蠹蛾性信息素溶解在適量無水乙醇中，緩慢加入處方量的淀粉中，邊加邊攪拌，攪拌均勻后加適量無水乙醇制軟材，過14目篩制濕顆粒。按每份1 g(約含信息素10 mg)分裝在西林瓶中密封。制備3批。每次取3份樣品，分別倒入25 ml容量瓶中，用正己烷定容，超聲10 min后，0.25 μm濾膜過濾，進(jìn)樣1 μl測其峰面積。

2 結(jié)果與分析

2.1 蘋果蠹蛾性信息素含量測定的標(biāo)準(zhǔn)線性關(guān)系

以E8，E10-十二碳二烯醇的濃度(C)對峰面積平均值(A)回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程：A=0.794C-14.194，R2=0.999 7，即蘋果蠹蛾性信息素在濃度為80.5～563.5 μg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.2 輔料對蘋果蠹蛾性信息素含量測定的影響

由表1可知，2種緩釋材料中蘋果蠹蛾性信息素的回收率在99.64%～100.02%，因此，淀粉和β-CD對蘋果蠹蛾性信息素含量的測定幾乎無影響。

表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果 %

2.3 方法學(xué)考察

2.3.1 精密度。試驗(yàn)結(jié)果測得的含量分別為理論值的100.13%、99.66%、98.79%、99.99%、99.97%、100.04%，RSD為0.50%，表明該方法精密度良好。

2.3.2 穩(wěn)定性。測得含量分別為理論值的98.92%、99.91%、101.00%、99.67%、99.88%、99.14%，RSD為0.74%，表明E8，E10-十二碳二烯醇供試液在24 h內(nèi)無顯著變化，穩(wěn)定性良好。

2.4 樣品的測定

2.4.1 粉劑中蘋果蠹蛾性信息素含量。3批淀粉粉劑中蘋果蠹蛾性信息素的回收率分別為100.10%、99.93%、99.83%，平均回收率為99.95%，RSD為0.140%；3批β-CD粉劑中蘋果蠹蛾性信息素的回收率分別為99.97%、99.92%、100.06%，平均回收率為99.98%，RSD為0.071%。

2.4.2 顆粒劑中蘋果蠹蛾性信息素含量。3批淀粉顆粒劑中蘋果蠹蛾性信息素的回收率分別為100.06%、100.03%、99.92%，平均回收率為100.00%，RSD為0.074%；3批β-CD顆粒劑中蘋果蠹蛾性信息素的回收率分別為99.89%、99.99%、100.01%，平均回收率為99.96%，RSD為0.064%。

3 結(jié)論與討論

該研究采用氣相色譜法分析測定淀粉、β-CD 2種輔料制成的粉劑、顆粒劑中蘋果蠹蛾性信息素含量。結(jié)果表明，

β-CD和淀粉均不影響蘋果蠹蛾性信息素的含量測定，相容性較好，可進(jìn)一步研究開發(fā)其劑型。

氣相色譜法是藥物含量測定和質(zhì)量檢查、中藥揮發(fā)油分析、體內(nèi)藥物分析、溶劑殘留分析中不可或缺的手段。徐妍等[6]以十二醇為內(nèi)標(biāo)物，采用氣相色譜程序升溫法，對不同粒徑的梨小食心蟲性信息素微囊粒劑的釋放特性進(jìn)行了定期測定；柳丹俠等[7]利用微量氣相色譜建立了一種簡單的提取分離及制備性信息素的方法，該方法適用于毫微克水平的微量分析。張力等[8]借助于氣相色譜法，用殘留測定法、靜態(tài)測定法和蒸汽捕集法3種方法測得了棉紅鈴蟲性信息素夾層塑囊劑中性信息素的釋放率。

淀粉[9]是天然的高分子多糖，性質(zhì)穩(wěn)定，價(jià)廉易得。β-CD[10]為環(huán)狀低聚糖化合物，可與具有適當(dāng)大小和形狀及疏水性的分子通過非共價(jià)鍵的相互作用形成穩(wěn)定的包合物。二者作為緩釋材料可生物降解，避免了二次污染，有利于推廣綠色農(nóng)業(yè)。

性信息素緩釋劑型的研究在國內(nèi)外得到了廣泛關(guān)注，并取得了一定的進(jìn)展[11-12]，但工業(yè)化生產(chǎn)是國內(nèi)蘋果蠹蛾性信息素緩釋劑型未得到廣泛應(yīng)用的重要限制因素之一。根據(jù)該試驗(yàn)結(jié)果，可進(jìn)行下一步的緩釋制劑研究，為田間應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

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陳傳秀(1990- )，女，山東棗莊人，碩士研究生，研究方向：藥物新劑型及新技術(shù)。*通訊作者，副教授，碩士生導(dǎo)師，從事藥物新劑型及新技術(shù)研究。

2015-11-13

S 482.3+8；TQ 453.8

A

0517-6611(2015)35-203-02

Effects of Two Kinds of Excipients on Determination ofCydiapomonella(L.) Sex PheromoneCHEN Chuan-xiu, JIN Qing*(College of Chemical Engineering, Qingdao University of Science and Technology, Qingdao, Shandong 266042)Abstract [Objective] The aim was to investigate effects of two kinds of excipients on the determination ofCydiapomonella(L.) sex pheromone. [Method] We used gas chromatography to analyze the content ofCydiapomonella(L.) sex pheromone in mixture, powders and granules. [Result] The contents ofCydiapomonella(L.) sex pheromone in mixture ranged from 99.64% to 100.02%, and ranged from 99.95% to 100.00% in powders and granules. [Conclusion] Starch and β-CD have no effect on the determination ofCydiapomonella(L.) sex pheromone, and have good compatibility withCydiapomonella(L.) sex pheromone, so their formulation can be carried out.