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        2種輔料對(duì)蘋果蠹蛾性信息素含量測(cè)定的影響

        2015-03-29 09:10:23陳傳秀
        安徽農(nóng)業(yè)科學(xué) 2015年35期
        關(guān)鍵詞:蘋果蠹蛾烯醇顆粒劑

        陳傳秀,金 青

        (青島科技大學(xué)化工學(xué)院,山東青島 266042)

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        2種輔料對(duì)蘋果蠹蛾性信息素含量測(cè)定的影響

        陳傳秀,金 青*

        (青島科技大學(xué)化工學(xué)院,山東青島 266042)

        [目的]研究淀粉、β-環(huán)糊精(β-CD)2種輔料對(duì)蘋果蠹蛾性信息素含量測(cè)定的影響。[方法]采用氣相色譜法,檢測(cè)淀粉、β-CD以及分別采用淀粉、β-CD制成的粉劑和顆粒劑中蘋果蠹蛾性信息素的含量。[結(jié)果]混合物中蘋果蠹蛾性信息素的提取回收率為99.64%~100.02%;粉劑和顆粒劑中蘋果蠹蛾性信息素的平均回收率為99.95%~100.00%。[結(jié)論] β-CD和淀粉均不影響蘋果蠹蛾性信息素的含量測(cè)定,相容性較好,可進(jìn)一步進(jìn)行劑型研究。

        淀粉;β-CD;蘋果蠹蛾性信息素;含量測(cè)定;氣相色譜法

        Starch;β-CD;Cydiapomonella(L.) sex pheromone;Content determination;Gas chromatography

        蘋果蠹蛾[Cydiapomonella(L. )]是仁果類主要的害蟲之一,自19世紀(jì)50年代侵入新疆地區(qū)以來,給我國(guó)造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[1]。蘋果蠹蛾對(duì)環(huán)境的適應(yīng)能力強(qiáng),以幼蟲蛀果危害,防治難度高[2];同時(shí)化學(xué)農(nóng)藥長(zhǎng)期大量的使用也造成了蘋果蠹蛾抗藥性的增加,給防治工作帶來了困難[3]。

        昆蟲性信息素[4]被國(guó)外稱為“第3代農(nóng)藥”,具有高效、無毒、無污染、不傷害益蟲等優(yōu)點(diǎn),利用性信息素誘捕害蟲成為一種切實(shí)可行并且應(yīng)用廣泛的害蟲管理技術(shù)。1971年,Roelofs等[5]首次鑒定出蘋果蠹蛾性信息素的主要成分為E8,E10-十二碳二烯醇,現(xiàn)在主要利用誘芯來監(jiān)測(cè)和誘殺害蟲。由于目前蘋果蠹蛾性信息素的使用方式較為單一,筆者研究了淀粉和β-CD 2種常用緩釋材料對(duì)蘋果蠹蛾性信息素含量測(cè)定的影響,以期為利用該2種輔料制備緩釋制劑的研究奠定基礎(chǔ)。

        1 材料與方法

        1.1 材料

        1.1.1 主要儀器。電子分析天平(上海精密科學(xué)儀器有限公司,F(xiàn)A1004N型)、氣相色譜儀(Agilent 6890N GC)、標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)篩(24、100目,浙江省上虞市滬江儀器紗篩廠)、西林瓶(10 ml,安徽華欣藥用玻璃有限公司)、有機(jī)濾膜(0.25 μm,上海市新亞凈化器件廠)、溫濕度計(jì)(上海晨光文具股份有限公司)。

        1.1.2 試劑。淀粉(藥用,天津市廣成化學(xué)試劑有限公司)、β-環(huán)糊精(藥用,天津博迪化工股份有限公司)、蘋果蠹蛾性信息素(原料藥,純度97%,E8,E10-十二碳二烯醇,上海遐瑞醫(yī)藥科技有限公司)、正己烷(色譜純,天津市津東天正化學(xué)試劑廠)、無水乙醇(分析純,山東萊陽經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)精細(xì)化工廠)。

        1.2 方法

        1.2.1 蘋果蠹蛾性信息素分析方法的建立。

        1.2.1.1 色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)。色譜條件:毛細(xì)色譜柱(30.0 m×250.00 μm×0.25 μm),普通氮?dú)鉃檩d氣,以氫氣為燃?xì)猓諝鉃橹細(xì)猓魉贋? ml/min,初溫120 ℃,保留1 min,升溫速率為20 ℃/min,終溫300 ℃,保留 6 min,檢測(cè)器300 ℃,氣化室250 ℃,進(jìn)樣量1 μl。

        1.2.1.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。稱取E8,E10-十二碳二烯醇,用正己烷稀釋成濃度為80.5、161.0、241.5、323.0、402.5、563.5 μg/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液,置于10 ml容量瓶中,用Agilent 6890N氣相色譜儀測(cè)定不同濃度對(duì)應(yīng)的峰面積。

        1.2.2 輔料對(duì)蘋果蠹蛾性信息素含量測(cè)定影響的研究。配制低、中、高(243.0、304.0、365.0 μg/ml)3個(gè)濃度的性信息素溶液,各取10 ml,分別與1.0 g輔料充分混勻,密閉。5 min后過濾,進(jìn)樣1 μl測(cè)其峰面積,計(jì)算回收率,考察2種輔料對(duì)不同濃度蘋果蠹蛾性信息素含量測(cè)定的影響程度。

        1.2.3 方法學(xué)考察。

        1.2.3.1 精密度試驗(yàn)。量取濃度為304.0 μg/ml的E8,E10-十二碳二烯醇對(duì)照品溶液1 μl進(jìn)樣,測(cè)其峰面積值,重復(fù)6次,計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)。

        1.2.3.2 穩(wěn)定性試驗(yàn)。于0、1、4、8、12、24 h量取304.0 μg/ml E8,E10-十二碳二烯醇對(duì)照品溶液1 μl進(jìn)樣,對(duì)其峰面積進(jìn)行積分,計(jì)算RSD。

        1.2.4 樣品的測(cè)定。

        1.2.4.1 粉劑中信息素含量的測(cè)定。稱取適量蘋果蠹蛾性信息素溶解在1 ml正己烷中,與輔料混合均勻,按每份1 g(約含信息素10 mg)分裝在西林瓶中密封。制備3批。每次取3份樣品,分別倒入25 ml容量瓶中,用正己烷定容,超聲10 min后,0.25 μm濾膜過濾,進(jìn)樣1 μl測(cè)其峰面積。

        1.2.4.2 顆粒劑中信息素含量的測(cè)定。輔料過100目篩,稱取處方量蘋果蠹蛾性信息素溶解在適量無水乙醇中,緩慢加入處方量的淀粉中,邊加邊攪拌,攪拌均勻后加適量無水乙醇制軟材,過14目篩制濕顆粒。按每份1 g(約含信息素10 mg)分裝在西林瓶中密封。制備3批。每次取3份樣品,分別倒入25 ml容量瓶中,用正己烷定容,超聲10 min后,0.25 μm濾膜過濾,進(jìn)樣1 μl測(cè)其峰面積。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 蘋果蠹蛾性信息素含量測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)線性關(guān)系

        以E8,E10-十二碳二烯醇的濃度(C)對(duì)峰面積平均值(A)回歸,得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程:A=0.794C-14.194,R2=0.999 7,即蘋果蠹蛾性信息素在濃度為80.5~563.5 μg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

        2.2 輔料對(duì)蘋果蠹蛾性信息素含量測(cè)定的影響

        由表1可知,2種緩釋材料中蘋果蠹蛾性信息素的回收率在99.64%~100.02%,因此,淀粉和β-CD對(duì)蘋果蠹蛾性信息素含量的測(cè)定幾乎無影響。

        表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果 %

        2.3 方法學(xué)考察

        2.3.1 精密度。試驗(yàn)結(jié)果測(cè)得的含量分別為理論值的100.13%、99.66%、98.79%、99.99%、99.97%、100.04%,RSD為0.50%,表明該方法精密度良好。

        2.3.2 穩(wěn)定性。測(cè)得含量分別為理論值的98.92%、99.91%、101.00%、99.67%、99.88%、99.14%,RSD為0.74%,表明E8,E10-十二碳二烯醇供試液在24 h內(nèi)無顯著變化,穩(wěn)定性良好。

        2.4 樣品的測(cè)定

        2.4.1 粉劑中蘋果蠹蛾性信息素含量。3批淀粉粉劑中蘋果蠹蛾性信息素的回收率分別為100.10%、99.93%、99.83%,平均回收率為99.95%,RSD為0.140%;3批β-CD粉劑中蘋果蠹蛾性信息素的回收率分別為99.97%、99.92%、100.06%,平均回收率為99.98%,RSD為0.071%。

        2.4.2 顆粒劑中蘋果蠹蛾性信息素含量。3批淀粉顆粒劑中蘋果蠹蛾性信息素的回收率分別為100.06%、100.03%、99.92%,平均回收率為100.00%,RSD為0.074%;3批β-CD顆粒劑中蘋果蠹蛾性信息素的回收率分別為99.89%、99.99%、100.01%,平均回收率為99.96%,RSD為0.064%。

        3 結(jié)論與討論

        該研究采用氣相色譜法分析測(cè)定淀粉、β-CD 2種輔料制成的粉劑、顆粒劑中蘋果蠹蛾性信息素含量。結(jié)果表明,

        β-CD和淀粉均不影響蘋果蠹蛾性信息素的含量測(cè)定,相容性較好,可進(jìn)一步研究開發(fā)其劑型。

        氣相色譜法是藥物含量測(cè)定和質(zhì)量檢查、中藥揮發(fā)油分析、體內(nèi)藥物分析、溶劑殘留分析中不可或缺的手段。徐妍等[6]以十二醇為內(nèi)標(biāo)物,采用氣相色譜程序升溫法,對(duì)不同粒徑的梨小食心蟲性信息素微囊粒劑的釋放特性進(jìn)行了定期測(cè)定;柳丹俠等[7]利用微量氣相色譜建立了一種簡(jiǎn)單的提取分離及制備性信息素的方法,該方法適用于毫微克水平的微量分析。張力等[8]借助于氣相色譜法,用殘留測(cè)定法、靜態(tài)測(cè)定法和蒸汽捕集法3種方法測(cè)得了棉紅鈴蟲性信息素夾層塑囊劑中性信息素的釋放率。

        淀粉[9]是天然的高分子多糖,性質(zhì)穩(wěn)定,價(jià)廉易得。β-CD[10]為環(huán)狀低聚糖化合物,可與具有適當(dāng)大小和形狀及疏水性的分子通過非共價(jià)鍵的相互作用形成穩(wěn)定的包合物。二者作為緩釋材料可生物降解,避免了二次污染,有利于推廣綠色農(nóng)業(yè)。

        性信息素緩釋劑型的研究在國(guó)內(nèi)外得到了廣泛關(guān)注,并取得了一定的進(jìn)展[11-12],但工業(yè)化生產(chǎn)是國(guó)內(nèi)蘋果蠹蛾性信息素緩釋劑型未得到廣泛應(yīng)用的重要限制因素之一。根據(jù)該試驗(yàn)結(jié)果,可進(jìn)行下一步的緩釋制劑研究,為田間應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。

        [1] 翟小偉,劉萬學(xué),張桂芬,等.蘋果蠹蛾性信息素的研究和應(yīng)用進(jìn)展[J].昆蟲學(xué)報(bào),2009,52(8):907-916.

        [2] 段辛樂,喬憲鳳,陳茂華.蘋果蠹蛾抗藥性進(jìn)展[J].生物安全學(xué)報(bào),2015,24(1):1-8.

        [3] 王薛婷,樸美花.我國(guó)檢疫性害蟲——蘋果蠹蛾研究進(jìn)展[J].農(nóng)林科研,2012(27):42-43.

        [4] 李慶燕,劉金龍,趙龍龍,等.緩釋技術(shù)在性信息素防治害蟲中的應(yīng)用[J].中國(guó)生物防治學(xué)報(bào),2012,28(4):589-593.

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        [6] 徐妍,吳國(guó)林,胡奕俊,等. 氣相色譜法測(cè)定梨小食心蟲性信息素微囊粒劑的釋放特性[J].農(nóng)藥,2010,49(2):111-113.

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        陳傳秀(1990- ),女,山東棗莊人,碩士研究生,研究方向:藥物新劑型及新技術(shù)。*通訊作者,副教授,碩士生導(dǎo)師,從事藥物新劑型及新技術(shù)研究。

        2015-11-13

        S 482.3+8;TQ 453.8

        A

        0517-6611(2015)35-203-02

        Effects of Two Kinds of Excipients on Determination ofCydiapomonella(L.) Sex PheromoneCHEN Chuan-xiu, JIN Qing*(College of Chemical Engineering, Qingdao University of Science and Technology, Qingdao, Shandong 266042)Abstract [Objective] The aim was to investigate effects of two kinds of excipients on the determination ofCydiapomonella(L.) sex pheromone. [Method] We used gas chromatography to analyze the content ofCydiapomonella(L.) sex pheromone in mixture, powders and granules. [Result] The contents ofCydiapomonella(L.) sex pheromone in mixture ranged from 99.64% to 100.02%, and ranged from 99.95% to 100.00% in powders and granules. [Conclusion] Starch and β-CD have no effect on the determination ofCydiapomonella(L.) sex pheromone, and have good compatibility withCydiapomonella(L.) sex pheromone, so their formulation can be carried out.

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