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        五味子酚對(duì)血管性癡呆小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響

        2015-03-26 07:05:24鄧之榮周世月譚琳王立楊宏

        鄧之榮++周世月++譚琳++王立++楊宏艷

        摘 要:目的:研究五味子酚對(duì)血管性癡呆小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響。方法:小鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、五味子酚藥物組(30、100 mg/kg,ip)。采用雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎法建立血管性癡呆模型,給藥2周后用Morris水迷宮測(cè)試小鼠學(xué)習(xí)記憶能力。結(jié)果:五味子酚能明顯縮短癡呆小鼠找到平臺(tái)的潛伏期和游泳路程。結(jié)論:五味子酚可改善血管性癡呆小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。

        關(guān)鍵詞:五味子酚 血管性癡呆 學(xué)習(xí)記憶

        中圖分類號(hào):R749.16 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1674-098X(2015)01(a)-0026-01

        血管性癡呆(vascular dementia,VD)是腦部機(jī)能減退而導(dǎo)致的一種認(rèn)知功能缺損的綜合征,主要與缺血性腦血管疾病有關(guān)。迄今為止,人類還未找到治療血管性癡呆癥的有效方法,且防治手段十分有限。雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎能很好的模擬腦缺血過(guò)程,是制備血管性癡呆癥的常用模型。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)行為學(xué)實(shí)驗(yàn)觀察五味子酚對(duì)癡呆模型小鼠的學(xué)習(xí)記憶的改善作用,觀察五味子酚對(duì)血管性癡呆的療效。

        1 材料與方法

        1.1 血管性癡呆模型復(fù)制方法

        按文獻(xiàn)方法,將小鼠用水合氯醛(350 mg/kg,ip)麻醉,消毒,頸正中切口,分離雙側(cè)頸總動(dòng)脈,各穿一絲線備用。用小鼠動(dòng)脈夾夾住頸總動(dòng)脈,阻斷血流15 min,并同時(shí)在距尾尖1 cm處剪斷放血約0.3 mL,熱凝止血。松開(kāi)動(dòng)脈夾灌注5 min后,再次阻斷血流,重復(fù)上述步驟2次,縫合皮膚,術(shù)后每日肌注青霉素0.2萬(wàn)單位,連續(xù)3 d。假手術(shù)組只分離頸總動(dòng)脈,穿絲線,但不阻斷血流,尾部不放血,觀察時(shí)間等與模型組相同。

        1.2 動(dòng)物分組與給藥

        健康昆明小鼠,體重20~30 g,由齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。隨機(jī)分為4組:假手術(shù)組、模型組、五味子酚藥物組(30、100 mg/kg),每組15只動(dòng)物。小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)2天,小鼠連續(xù)腹腔注射五味子酚7天后,開(kāi)始造模。模型組(造模后腹腔注射生理鹽水,連續(xù)14 d)、五味子酚組(造模后五味子酚30 mg/(kg·d),100 mg/(kg·d),連續(xù)14 d)。造模2周后通過(guò)Morris水迷宮試驗(yàn)對(duì)小鼠進(jìn)行學(xué)習(xí)和記憶成績(jī)測(cè)試,觀察其行為學(xué)改變。

        1.3 Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)

        Morris水迷宮分兩部分,前五天進(jìn)行定位航行試驗(yàn),第六天進(jìn)行空間探索實(shí)驗(yàn)。平臺(tái)放置于第二象限的中心,水面高出平臺(tái)1.0 cm。每只小鼠每天接受2次訓(xùn)練,分別從兩個(gè)不同的入水點(diǎn)開(kāi)始,兩次訓(xùn)練間隔1 min,記錄小鼠找到平臺(tái)的時(shí)間(逃避潛伏期)和找到平臺(tái)的所經(jīng)路程。如果小鼠在120 s內(nèi)未找到平臺(tái),則潛伏期以120 s計(jì)算??臻g探索實(shí)驗(yàn)中,移去平臺(tái),將小鼠從平臺(tái)對(duì)角象限放入水中,自由游泳120 s,記錄小鼠在平臺(tái)所處象限停留的時(shí)間,用于測(cè)試小鼠對(duì)平臺(tái)空間位置的記憶能力。

        2 結(jié)果

        水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與假手術(shù)組相比,雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎的小鼠找到平臺(tái)的潛伏期和游泳路程明顯延長(zhǎng),兩組相比,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.001),表明小鼠學(xué)習(xí)記憶功能明顯損傷。而五味子酚在100 mg·kg-1劑量時(shí),可顯著縮短小鼠找到平臺(tái)的潛伏期和游泳路程(P<0.01,P<0.05),表明五味子酚具有改善小鼠學(xué)習(xí)記憶的作用。見(jiàn)圖1,A圖是五味子酚對(duì)小鼠到達(dá)平臺(tái)時(shí)間(s)的影響;B圖是五味子酚對(duì)小鼠到達(dá)平臺(tái)游泳路程(cm)的影響。模型組與對(duì)照組相比,###P<0.001;五味子酚藥物組與模型組相比,*P<0.05,**P<0.01

        3 討論

        血管性癡呆是發(fā)展中國(guó)家的人得癡呆癥的首要原因,慢性腦缺血是研究血管性癡呆發(fā)病機(jī)理的重要組成部分,可導(dǎo)致持久性認(rèn)知損傷。學(xué)習(xí)記憶障礙是人類血管性癡呆早發(fā)癥狀之一,Morris水迷宮是檢測(cè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶能力的重要指標(biāo)。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎制備血管性癡呆的動(dòng)物模型,用Morris水迷宮觀察了五味子酚對(duì)癡呆模型小鼠學(xué)習(xí)記憶的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:與空白組相比,模型組動(dòng)物找到平臺(tái)的潛伏期和游泳路程明顯延長(zhǎng),出現(xiàn)明顯的空間學(xué)習(xí)記憶障礙,提示模型制備成功。與模型組相比,五味子酚可明顯縮短小鼠找到平臺(tái)的潛伏期和游泳路程,顯著改善癡呆小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。

        五味子酚是從中藥五味子中提取的木脂素類成分之一。文獻(xiàn)報(bào)道五味子酚具有顯著的抗氧化活性,對(duì)氧化低密度脂蛋白(ox- LDL)引起的神經(jīng)細(xì)胞損傷具有明顯的保護(hù)作用[1]。其機(jī)制包括維持細(xì)胞內(nèi)抗氧化成分谷胱甘肽水平、清除氧自由基、抑制凋亡信號(hào)通路的重要信號(hào)分子細(xì)胞色素C的釋放。五味子酚對(duì)血管性癡呆的治療作用可能與其抗氧化、清除氧自由基、減輕神經(jīng)元的氧化應(yīng)激損傷和凋亡有關(guān)。

        參考文獻(xiàn)

        [1] YU L H,LIU G T.Schisanhenol attenuated ox-LDL-induced apoptosis and reactive oxygen species generation in bovine aorta endothelial cells in vitro[J].J Asian Nat Prod Res, 2008,10(7-8):799-806.

        [2] YU L H, LIU G T,SUN Y M, et al.Antioxidative effect of schisanhenol on human low density lipoprotein and its quantum chemical calculation[J].Acta Pharmacol Sin,2004,25(8):1038-1044.

        [3] Rincon F,Wright CB.Vascular cognitive impairment[J].Curr Opin Neurol,2013,26(1):29-36.

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