鄧之榮++周世月++譚琳++王立++楊宏艷

摘 要：目的：研究五味子酚對(duì)血管性癡呆小鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響。方法：小鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組、模型組、五味子酚藥物組（30、100 mg/kg，ip）。采用雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎法建立血管性癡呆模型，給藥2周后用Morris水迷宮測(cè)試小鼠學(xué)習(xí)記憶能力。結(jié)果：五味子酚能明顯縮短癡呆小鼠找到平臺(tái)的潛伏期和游泳路程。結(jié)論：五味子酚可改善血管性癡呆小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。

關(guān)鍵詞：五味子酚 血管性癡呆 學(xué)習(xí)記憶

中圖分類號(hào)：R749.16 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1674-098X（2015）01（a）-0026-01

血管性癡呆（vascular dementia，VD）是腦部機(jī)能減退而導(dǎo)致的一種認(rèn)知功能缺損的綜合征，主要與缺血性腦血管疾病有關(guān)。迄今為止，人類還未找到治療血管性癡呆癥的有效方法，且防治手段十分有限。雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎能很好的模擬腦缺血過(guò)程，是制備血管性癡呆癥的常用模型。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)行為學(xué)實(shí)驗(yàn)觀察五味子酚對(duì)癡呆模型小鼠的學(xué)習(xí)記憶的改善作用，觀察五味子酚對(duì)血管性癡呆的療效。

1 材料與方法

1.1 血管性癡呆模型復(fù)制方法

按文獻(xiàn)方法，將小鼠用水合氯醛（350 mg/kg，ip）麻醉，消毒，頸正中切口，分離雙側(cè)頸總動(dòng)脈，各穿一絲線備用。用小鼠動(dòng)脈夾夾住頸總動(dòng)脈，阻斷血流15 min，并同時(shí)在距尾尖1 cm處剪斷放血約0.3 mL，熱凝止血。松開(kāi)動(dòng)脈夾灌注5 min后，再次阻斷血流，重復(fù)上述步驟2次，縫合皮膚，術(shù)后每日肌注青霉素0.2萬(wàn)單位，連續(xù)3 d。假手術(shù)組只分離頸總動(dòng)脈，穿絲線，但不阻斷血流，尾部不放血，觀察時(shí)間等與模型組相同。

1.2 動(dòng)物分組與給藥

健康昆明小鼠，體重20～30 g，由齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。隨機(jī)分為4組：假手術(shù)組、模型組、五味子酚藥物組（30、100 mg/kg），每組15只動(dòng)物。小鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)2天，小鼠連續(xù)腹腔注射五味子酚7天后，開(kāi)始造模。模型組（造模后腹腔注射生理鹽水，連續(xù)14 d）、五味子酚組（造模后五味子酚30 mg/（kg·d），100 mg/（kg·d），連續(xù)14 d）。造模2周后通過(guò)Morris水迷宮試驗(yàn)對(duì)小鼠進(jìn)行學(xué)習(xí)和記憶成績(jī)測(cè)試，觀察其行為學(xué)改變。

1.3 Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)

Morris水迷宮分兩部分，前五天進(jìn)行定位航行試驗(yàn)，第六天進(jìn)行空間探索實(shí)驗(yàn)。平臺(tái)放置于第二象限的中心，水面高出平臺(tái)1.0 cm。每只小鼠每天接受2次訓(xùn)練，分別從兩個(gè)不同的入水點(diǎn)開(kāi)始，兩次訓(xùn)練間隔1 min，記錄小鼠找到平臺(tái)的時(shí)間（逃避潛伏期）和找到平臺(tái)的所經(jīng)路程。如果小鼠在120 s內(nèi)未找到平臺(tái)，則潛伏期以120 s計(jì)算?？臻g探索實(shí)驗(yàn)中，移去平臺(tái)，將小鼠從平臺(tái)對(duì)角象限放入水中，自由游泳120 s，記錄小鼠在平臺(tái)所處象限停留的時(shí)間，用于測(cè)試小鼠對(duì)平臺(tái)空間位置的記憶能力。

2 結(jié)果

水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與假手術(shù)組相比，雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎的小鼠找到平臺(tái)的潛伏期和游泳路程明顯延長(zhǎng)，兩組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.001），表明小鼠學(xué)習(xí)記憶功能明顯損傷。而五味子酚在100 mg·kg-1劑量時(shí)，可顯著縮短小鼠找到平臺(tái)的潛伏期和游泳路程（P<0.01，P<0.05），表明五味子酚具有改善小鼠學(xué)習(xí)記憶的作用。見(jiàn)圖1，A圖是五味子酚對(duì)小鼠到達(dá)平臺(tái)時(shí)間（s）的影響；B圖是五味子酚對(duì)小鼠到達(dá)平臺(tái)游泳路程（cm）的影響。模型組與對(duì)照組相比，###P<0.001；五味子酚藥物組與模型組相比，*P<0.05，**P<0.01

3 討論

血管性癡呆是發(fā)展中國(guó)家的人得癡呆癥的首要原因，慢性腦缺血是研究血管性癡呆發(fā)病機(jī)理的重要組成部分，可導(dǎo)致持久性認(rèn)知損傷。學(xué)習(xí)記憶障礙是人類血管性癡呆早發(fā)癥狀之一，Morris水迷宮是檢測(cè)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶能力的重要指標(biāo)。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用雙側(cè)頸總動(dòng)脈結(jié)扎制備血管性癡呆的動(dòng)物模型，用Morris水迷宮觀察了五味子酚對(duì)癡呆模型小鼠學(xué)習(xí)記憶的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：與空白組相比，模型組動(dòng)物找到平臺(tái)的潛伏期和游泳路程明顯延長(zhǎng)，出現(xiàn)明顯的空間學(xué)習(xí)記憶障礙，提示模型制備成功。與模型組相比，五味子酚可明顯縮短小鼠找到平臺(tái)的潛伏期和游泳路程，顯著改善癡呆小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力。

五味子酚是從中藥五味子中提取的木脂素類成分之一。文獻(xiàn)報(bào)道五味子酚具有顯著的抗氧化活性，對(duì)氧化低密度脂蛋白（ox- LDL）引起的神經(jīng)細(xì)胞損傷具有明顯的保護(hù)作用[1]。其機(jī)制包括維持細(xì)胞內(nèi)抗氧化成分谷胱甘肽水平、清除氧自由基、抑制凋亡信號(hào)通路的重要信號(hào)分子細(xì)胞色素C的釋放。五味子酚對(duì)血管性癡呆的治療作用可能與其抗氧化、清除氧自由基、減輕神經(jīng)元的氧化應(yīng)激損傷和凋亡有關(guān)。

參考文獻(xiàn)

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