禹 梅，劉 婕，張慧君

（1.陜西中醫(yī)學院，陜西咸陽712046；2.安康市中心醫(yī)院，陜西725000）

茵陳蒿湯辨證治療母子ABO血型不合孕婦外周血T淋巴細胞亞群變化的研究

禹 梅1，2，劉 婕2，張慧君2

（1.陜西中醫(yī)學院，陜西咸陽712046；2.安康市中心醫(yī)院，陜西725000）

目的通過檢測辨證分型治療母子ABO血型不合前后孕婦外周血中抗A或抗B抗體效價及T淋巴細胞絕對數(shù)，了解采用茵陳蒿湯為主的辨證治療免疫機制。方法隨機將2012年6月至2014年5月在陜西省安康市中心醫(yī)院門診確診為母子ABO血型不合的106例孕婦分為對照組（36例）和治療組（70例），治療組采用中醫(yī)辨證治療分為濕熱組（SR，30例）、濕熱兼脾氣虛組（SR+PQX，13例）和濕熱兼腎氣虛組（SR+SQX，27例）。兩組孕婦分別服用茵陳蒿湯原方和加減對應方進行治療，療程30 d。治療前后分別測定外周血中抗A或抗B抗體效價及CD3+、CD4+、CD8+水平和CD4+/CD8+比值。結果治療后，對照組孕婦的抗A或抗B抗體效價，14例降為1∶64，4例降為1∶32；治療組中38例降為1∶64，24例降為1∶32。對照組和治療組治療前后T淋巴細胞CD3+計數(shù)分別為（1 430±396）、（1 445±401）、（1 488±402）、（1 637±401）μL-1，CD4+計數(shù)分別為（870±230）、（896±240）、（820±240）、（713±289）μL-1，CD8+計數(shù)分別為（540±190）、（560± 204）、（590±170）、（715±187）μL-1，CD4+/CD8+比值分別為1.51±0.4、1.56±0.36、1.41±0.28、1.19±0.22，兩組孕婦治療后CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+與治療前比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。而治療后，治療組3種證型之間比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。結論茵陳蒿湯對淋巴細胞有增殖作用，進而加強了母體的細胞免疫和體液免疫，使胎兒免疫耐受性增強，且茵陳嵩湯辨證方劑較原方更具有優(yōu)越性。

茵陳蒿湯/治療應用； ABO血型系統(tǒng)； 辨證分型； 辨證論治； 血型不合/中醫(yī)藥療法； T淋巴細胞

母子ABO血型不合是產科的高危妊娠之一，是由于母體和胎兒間血型不合造成的同種血型免疫性疾病，對母子均有一定程度的危害，可表現(xiàn)為流產、死胎、新生兒黃疸等。茵陳蒿湯對母子ABO血型不合孕母進行干預治療已被證實療效顯著[1]，并且一直被臨床沿用至今[2]，但其治療機制尚不清楚。本研究通過測定母子血型不合孕婦治療前后外周血中T淋巴細胞亞群水平的變化，了解茵陳蒿湯辨證治療母子血型不合的免疫機制，為臨床提供治療依據(jù)?，F(xiàn)具體報道如下。

1 資料與方法

1.1 資料

1.1.1 一般資料 選擇2012年6月至2014年5月在陜西省安康市中心醫(yī)院門診確診為母子ABO血型不合孕婦106例，血型均為O型，其配偶血型為A型53例，B型43例，AB型10例。孕周16～36周，年齡22～35歲。身體健康，均無肝、腎、血液等系統(tǒng)疾病，無輸血史等。按隨機數(shù)字表順序分為對照組（36例）和治療組（70例）。對照組平均年齡（27.62±4.30）歲；平均孕周（21.60±4.10）周；其中無流產史6例，1次流產史22例，2次流產史8例。治療組平均年齡（28.63±3.80）歲；平均孕周（22.60± 3.70）周；無流產史16例，1次流產史36例，2次流產史18例。兩組孕婦年齡、孕周、流產次數(shù)等方面比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。所有孕婦均行門診治療，必要時住院治療。

1.1.2 納入標準 抗A或抗B免疫球蛋白G（IgG）效價大于或等于1∶64，且臨床查體中醫(yī)辨證是母子ABO血型不合濕熱型患者。

1.1.3 排除標準 除出現(xiàn)嚴重感冒、腹瀉、嘔吐或嚴重呼吸道、泌尿生殖道感染者應停藥外，其他無明確服藥禁忌證，又非醫(yī)囑連續(xù)停藥15 d以上，應視為無效病例剔除。

1.2 方法

1.2.1 治療方法 參照張志蘭等[3]和張穎等[4]的治療方案，對照組36例孕婦服用茵陳蒿湯原方：茵陳15 g，黃芩10 g，酒大黃3 g，甘草3 g。治療組孕婦采用中醫(yī)辨證法分為濕熱并重（SR）組（30例），在服用茵陳蒿湯原方的基礎上加山梔6 g，白術9 g；濕熱兼脾氣虛（SR+ PQX）組（13例），在服用茵陳蒿湯原方中去酒大黃加黨參10 g，藿香5 g；濕熱兼腎氣虛（SR+SQX）組（27例），在服用茵陳蒿湯原方基礎上加石斛10 g，菟絲子10 g，五味子10 g。均水煎服，每天1劑，煎400mL，分2次服用，療程為30 d。服用1個月后復查血型抗A或抗B抗體評定療效。對其中抗體效價大于1∶512者，直接收住院治療。

1.2.2 檢測方法 采集患者空腹EDTA-K2抗凝外周血2mL，充分混勻后待測。同時抽取3mL全血，分離血清，進行抗A或抗B IgG效價檢測。

T淋巴細胞亞群CD3+、CD4+、CD8+絕對計數(shù)，儀器和試劑均購自上海匯中細胞生物科技有限公司，嚴格按照說明書進行操作。

抗A、抗B血型定型試劑，ABO標準試劑紅細胞（RBC），抗人球蛋白試劑，2-Me應用液均購自上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司，嚴格按照操作規(guī)程進行操作。

1.2.3 療效評定標準 顯效：服藥30 d后，抗體效價下降至原滴度的3或2個級差（如1∶512滴度降至1∶128或1∶64）；有效：服藥30 d后，抗體效價下降至原滴度的1個級差；無效：服藥30 d后，抗體效價為不降或反而升高。

1.3 統(tǒng)計學處理 應用SPSS17.0統(tǒng)計軟件及Microsoft Excel2007進行數(shù)據(jù)分析，計量資料以±s表示，多組間比較采用單因素方差分析，與組間及組內前后資料比較采用獨立樣本均數(shù)t檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 兩組孕婦治療前后血清抗體水平變化及療效比較 治療后，對照組有18例降為1∶64及以下，有效率為50.0%；治療組有62例降為1∶64及以下，有效率為88.6%。兩組有效率比較，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），見表1。

2.2 兩組孕婦治療前后T淋巴細胞亞群檢測結果比較 （1）治療前，對照組和治療組CD3+、CD4+、CD8+計數(shù)及CD4+/CD8+比值比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。（2）治療后，對照組和治療組內SR、SR+PQX、SR+SQX3種證型的CD3+、CD8+數(shù)量較治療前明顯升高，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），但經單因素方差分析，治療后3種證型之間比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；治療組3種證型治療后CD3+、CD8+數(shù)量明顯高于對照組治療后，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。（3）治療后，對照組和治療組SR、SR+PQX、SR+SQX 3種證型的CD4+的數(shù)量及CD4+/CD8+比值較治療前明顯下降，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），但經單因素方差分析，3種證型之間比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；治療組3種證型治療后CD4+數(shù)量及CD4+/CD8+比值明顯低于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。（4）CD4+/CD8+比值在治療組各型與對照組治療前比較及治療組和對照組治療后比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），見表2。

表1 兩組孕婦治療前后血清抗體水平變化及療效比較（n）

表2 兩組孕婦治療前后T淋巴細胞亞群檢測結果比較（±s）

表2 兩組孕婦治療前后T淋巴細胞亞群檢測結果比較（±s）

注：與同組（同證型）治療前比較，aP＜0.05；與對照組治療后比較，bP＜0.05。

組別n CD3+（μL-1）治療前 治療后對照組治療組SR SR+PQX SR+SQX 36 1 430±396 1 488±402 870±230 CD4+（μL-1）治療前 治療后820±240 540±190 CD8+（μL-1）治療前 治療后590±170 1.51±0.40 CD4+/CD8+治療前 治療后1.41±0.28 1.20±0.19 1.27±0.24 1.32±0.28 30 13 27 1 440±450 1 454±391 1 406±420 1 625±359ab1 649±362ab1 630±351ab890±210 878±202 868±188 693±291ab705±311ab711±309ab550±210 560±200 576±220 709±182ab723±189ab734±194ab1.48±0.32 1.47±0.28 1.49±0.40

3 討 論

母子ABO血型不合是母體與胎兒之間由于血型不合而引起胎兒或新生兒溶血癥的同種免疫性疾病，因為胎兒RBC遺傳了父親的血型A或B抗原，其血型表現(xiàn)于不同母體的血型抗原，當這種不同于母體的血型抗原進入母體的血液循環(huán)后，就會導致母體產生免疫反應，產生相應的免疫性抗體，這種抗體可通過母體胎盤進入胎兒的血液循環(huán)中，與胎兒的RBC抗原相結合，引起胎兒和新生兒溶血。如果有流產、死胎、死產及新生兒溶血等不良妊娠史的孕婦，或孕婦為O型血而丈夫為A、B或AB型的孕婦，妊娠前、中期需檢測血清抗體效價，對高效價（≥1∶64）的孕婦應進行中西結合藥物預防性干預治療，因為早期治療可以有效降低母體IgG抗體效價，減少新生兒溶血反應的程度或降低對胎兒的危害性[5]。

西醫(yī)治療母子ABO血型不合及新生兒黃疸主要是對癥治療、補充營養(yǎng)、增加胎盤氧的交換和葡萄糖的利用等，以減少溶血的發(fā)生。中醫(yī)治療主要是從濕熱蘊阻胞胎、氣血阻滯，以脾腎虛損為本、濕熱血瘀為標。目前大多采用辨證方加減相結合的方法[6]。將抗A或抗B IgG抗體效價顯著升高（≥1∶64）的孕婦納入觀察對象，采用茵陳蒿湯為主辨證加減治療的前瞻性研究表明，辨證方劑降低抗體效價的作用顯著優(yōu)于原來配方，而且見效更快。

母子ABO血型不合是同種免疫性疾病，有學者研究證實，RBC免疫參與了母子血型不合發(fā)生的過程[3]，作為機體免疫功能的T淋巴細胞在治療中發(fā)揮什么作用，其改變是否有意義，本研究結果發(fā)現(xiàn)，各型母子血型不合患者在治療后T淋巴細胞CD3+、CD8+水平升高，CD4+和CD4+/CD8+下降，與治療前比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；同時，治療組與對照組治療后比較，T淋巴細胞數(shù)比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），這種計數(shù)變化具有明顯的臨床意義。景蘇玉等[7]用保胎“沖劑”治療36例習慣性流產患者，CD3+、CD8+明顯升高，CD4+水平和CD4+/CD8+比值則下降；劉潤俠等[8]治療32例反復自然流產者，CD8+細胞活性明顯升高，CD4+則下降，CD4+/CD8+比值基本正常。說明T淋巴細胞參與并調節(jié)了機體免疫。由此可以推斷，當母子產生血型不合后，其血清抗A或抗B效價升高，這就破壞了母子的免疫平衡機制，即會出現(xiàn)胎兒或新生兒溶血反應，CD3+、CD8+水平會下降，CD4+水平、CD4+/CD8+比值會升高。然而，通過茵陳蒿湯為主辨證治療后，升高了CD3+、CD8+水平，同時降低了CD4+水平和CD4+/CD8+比值，使抗A或抗B效價降低，進而使溶血發(fā)生概率降低[9-11]。

本研究采用茵陳蒿湯治療30 d的相關數(shù)據(jù)顯示，茵陳蒿湯原方和辨證加減均具有降低母子血型不合孕婦抗A或抗BIgG效價的作用，均可升高CD3+、CD8+水平，降低CD4+水平和CD4+/CD8+比值。從個體療效看，辨證治療更切合實際，療效比原方更為優(yōu)越，特別是在抗A或抗B效價下降，以及CD3+、CD8+水平升高和CD4+降低程度方面差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

總之，本研究證實T淋巴細胞參與了母子血型不合發(fā)生的過程，茵陳蒿湯對T淋巴細胞有增殖作用，從而可加強母體的細胞免疫和體液免疫，使胎兒免疫耐受性增強，說明茵陳蒿湯通過調節(jié)機體免疫功能，達到保胎的目的。

[1]張志蘭，楊萬章.以茵陳蒿湯為主辨證治療母兒ABO血型不合對照研究[J].北京中醫(yī)藥大學學報，2006，29（7）：502-504.

[2]劉梅，唐惠英.茵陳蒿湯治療新生兒母嬰血型不合溶血病126例臨床觀察[J].右江醫(yī)學，2013，41（3）：370-371.

[3]張志蘭，徐丹，張新清，等.茵陳蒿湯等干預母兒ABO血型不合84例患者的紅細胞免疫研究[J].中華中醫(yī)藥雜志，2009，24（11）：1514-1516.

[4]張穎，張玉春，田梅.茵陳蒿湯加減治療17例ABO母嬰血型不合臨床觀察[J].內蒙古中醫(yī)藥，2014，33（24）：11.

[5]周曉曄，李世琴，趙建春，等.孕期高ABO血型抗體效價孕婦的藥物干預效果觀察[J].中外醫(yī)療，2013，32（21）：114-116.

[6]劉梅，唐惠英.茵陳蒿湯治療孕婦IgG抗體高效價98例臨床觀察[J].中國保健營養(yǎng)，2013（3）：1540.

[7]景蘇玉，歸綏琪.“保胎Ⅰ沖劑”提高反復自然流產患者免疫功能的臨床觀察[J].上海中醫(yī)藥雜志，2002，36（9）：23-24.

[8]劉潤俠，劉艷巧，李百文，等.中藥治療母兒血型不合引起反復自然流產32例[J].陜西中醫(yī)，2002，23（5）：393-394.

[9]周友華，余艷濤，張文，等.茵陳蒿湯對免疫小鼠ABO血型抗體產生的抑制作用研究[J].中國免疫學雜志，2011，27（7）：607-610.

[10]李慧，余明明，閆清雅，等.茵陳蒿湯對A血型抗原免疫小鼠TNF-α水平的影響[J].中國輸血雜志，2014，27（6）：572-575.

[11]康慶偉，閆姝.茵陳蒿湯的藥理作用及臨床應用進展[J].中國中西醫(yī)結合外科雜志，2013，19（4）：473-475.

Clinic effect of Yinchenhao decoction in treatment of peripheral blood T-cell subgroups of patientsw ith maternal-fetal ABO blood-group incom patibility

YuMei1，2，Liu Jie2，ZhangHuijun2
（1.ShaanxiTraditionalChineseMedicineCollege，Xianyang，Shaanxi712046，China；2.AnkangMunicipalCentralHospital，Shaanxi725000，China）

ObjectiveAbsolutenumbersof T-cellsand anti-A oranti-B antibody titer in peripheralblood of the pregnant women with maternal-fetal ABO blood-group incompatibility were detected by syndromes different from the treatments to reveal the immunologicalmechanism of Yinchengao decoction treatment.MethodsA totalof106 pregnantwomen clinically diagnosed withmaternal-fetal ABO blood-group incompatibility in the Ankang MunicipalCentralHospital from June 2012 toMay 2014were divided into the controlgroup（36 cases）and the treatmentgroup（70 cases）.The treatmentgroup was divided into SR group with 30 cases，SR+PQX group with 13 cases and SR+SQX with 27 cases according to sydromes differentiation.The two groupswere treated with original Yinchenghao decoction and adjusted Yinchenghao decoction separately，lasting 30 days.The anti-A oranti-B antibody titer in peripheralblood ofand the concentrations ofCD3+，CD4+，CD8+aswellas the value of CD4+/CD8+before and after the treatment.ResultsThe anti-A oranti-B antibody titerof14 pregnantwomen in the controlgroup after the treatmentwas declined to1∶64，4 cases to1∶32while38 casesin the treatmentgroupwasdecreased to1∶64，24 cases to1∶32.The CD3+，CD4+ and CD8+T lymphocytesnumbers per literwere[（1 430±396），（1 445±401），（1 488±402），（1 637±401）]μL-1，[（870±230），（896 ±240），（820±240），（713±289）]μL-1and[（540±190，560±204，590±170，715±187）]μL-1respectively in succession before and after the treatment.The value ofCD4+/CD8+was（1.51±0.4），（1.56±0.36），（1.41±0.28），（1.19±0.22）respectively.The above parametersafter the treatmentwere comparedwith thosebefore the treatmentand showed that therewasstatisticalsignificant in difference（P＜0.05）.The sydromes among the three sydrome groups after the treatmenthad no statistical significance in difference（P＞0.05）.ConclusionThe Yinchenghao decoction playsa positive role in proliferation response to lymphocyte and strengthen the cellular immunity and humoral immunity capability to improve the fetuses′s tolerance，especially，the altered Yinchenghao decoction prevailed in superiority.

Yinchenhao decoction/theraputic use； ABO blood-group system； Syndrome differ classification； Syndrome differ treatment； Blood group incompatibility/zhong yiyao liao fa； T-lymphocytes

10.3969/j.issn.1009-5519.2015.07.007

：A

：1009-5519（2015）07-0977-03

2015-01-07）

禹梅（1978-），女，陜西安康人，在讀研究生，副主任檢驗師，主要從事臨床輸血工作；E-mail：812486136@qq.com。