陳 瑤，龍恩武，袁浩宇

（1.四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院藥學(xué)部，四川 成都 610072； 2.核工業(yè)四一六醫(yī)院，四川 成都 610051）

反相高效液相色譜法測(cè)定鹽酸頭孢他美酯片含量

陳 瑤1，龍恩武1，袁浩宇2

（1.四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院藥學(xué)部，四川 成都 610072； 2.核工業(yè)四一六醫(yī)院，四川 成都 610051）

目的 建立測(cè)定鹽酸頭孢他美酯片中鹽酸頭孢他美酯含量的高效液相色譜法。方法 采用反相高效液相色譜（RP－HPLC）法，色譜柱為Hypersil C18柱（200 mm×4.6 mm，10 μm），以乙腈－2 mmol／L高氯酸（20∶80）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為265 nm，流速為1.0 mL／min。結(jié)果 鹽酸頭孢他美酯質(zhì)量濃度在10.0～80.0 μg／mL范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好，高、中、低質(zhì)量濃度的平均加樣回收率為99.35%，RSD為1.23%（n＝6）。結(jié)論 該方法準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便，適用于鹽酸頭孢他美酯片的質(zhì)量控制。

鹽酸頭孢他美酯；高效液相色譜法；含量測(cè)定

鹽酸頭孢他美酯化學(xué)名為（6R，7R）－3－甲基－7－［（Z）－2－（2－氨基－4－噻唑基）－2－（甲氧亞氨基）－乙酰氨基］－8－氧代－5－硫雜－1－氮雜雙環(huán)［4，2，0］辛－2－烯－2－甲酸新戊酰氧甲酯鹽酸鹽，是第3代頭孢類廣譜抗菌藥物，對(duì)鏈球菌屬（糞鏈球菌除外）、肺炎鏈球菌等革蘭陽性菌及大腸埃希菌、流感嗜血桿菌、克雷伯菌屬、沙門菌屬、志賀菌屬、淋病奈瑟氏球菌等革蘭氏陰性菌均有很強(qiáng)的抗菌活性［1－2］。筆者建立了測(cè)定鹽酸頭孢他美酯片含量的反相－高效液色譜（RP－HPLC）法，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

LC－2010C型高效液相色譜儀（日本島津）；N2000色譜工作站（浙江大學(xué)智能信息工程研究所）；Hypersil C18色譜柱（250 mm× 4.6 mm，10 μm，大連依利特科學(xué)儀器有限公司）。頭孢他美酯對(duì)照品（上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司，批號(hào)為130512－200201）；鹽酸頭孢他美酯片（浙江永寧制藥廠，批號(hào)為070501，070503，070601，規(guī)格為每片250 mg）；乙腈為色譜純（美國(guó)Fisher公司），水為重蒸餾水，其余試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件及系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

色譜柱：Hypersil C18柱（250 mm×4.6 mm，10 μm）；流動(dòng)相：2 mmol／L高氯酸溶液－乙腈（80∶20）；檢測(cè)波長(zhǎng)：265 nm；流速：1.0 mL／min；柱溫：室溫；進(jìn)樣量：20 μL。理論板數(shù)按鹽酸頭孢他美酯峰計(jì)算應(yīng)不低于3 000。

2.2 溶液制備

取本品20片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于鹽酸頭孢他美酯25 mg），置50 mL容量瓶中，加流動(dòng)相20 mL，密塞，超聲處理30 min，放冷，加流動(dòng)相溶液定容，搖勻，濾過，取續(xù)濾液5 mL，置50 mL容量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，作為供試品溶液。精密稱取鹽酸頭孢他美酯對(duì)照品適量，加流動(dòng)相溶解，制成每1 mL含鹽酸頭孢他美酯50 μg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

2.3 方法學(xué)考察

專屬性試驗(yàn)：照擬訂方法操作，色譜圖見圖1。流動(dòng)相、輔料在鹽酸頭孢他美酯峰處無干擾，鹽酸頭孢他美酯與相鄰雜質(zhì)峰的分離度符合要求。

圖1 高效液相色譜圖

線性關(guān)系考察：取鹽酸頭孢他美酯對(duì)照品適量，精密稱定，用流動(dòng)相溶解制成10.0，25.0，50.0，60.0，80.0 μg／mL系列質(zhì)量濃度的溶液，照擬訂方法操作，記錄色譜圖。以峰面積（Y）為縱坐標(biāo)、溶液質(zhì)量濃度（X）為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程為Y＝9 189 X＋285.6（r＝0.999 9）。結(jié)果表明，鹽酸頭孢他美酯質(zhì)量濃度在10.0～80.0 μg／L范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。

精密度試驗(yàn)：取鹽酸頭孢他美酯對(duì)照品適量，精密稱定，用流動(dòng)相制成含鹽酸頭孢他美酯40.0，50.0，60.0 μg／mL的溶液，分別精密吸取20 μL注入液相色譜儀，重復(fù)進(jìn)樣5次。結(jié)果峰面積的RSD分別為0.87%，1.04%，1.69%（n＝5），表明儀器精密度良好。

重復(fù)性試驗(yàn)：取同一批（批號(hào)為070501）樣品，制成每1 mL中含頭孢他美酯50 μg的溶液6份，照擬訂方法操作，按外標(biāo)法測(cè)得鹽酸頭孢他美酯的標(biāo)示百分含量分別為99.2%，99.5%，98.9%，99.7%，100.3%，98.7%，RSD為0.58%（n＝6），表明方法重復(fù)性良好。

穩(wěn)定性試驗(yàn)：照擬訂方法，對(duì)同一（批號(hào)為070501）樣品制備的供試品溶液（50.0 μg／mL），在室溫下于0，1，2，4，6，8 h時(shí)分別進(jìn)樣20μL。結(jié)果的 RSD＝1.08%（n＝6），表明供試品溶液在8h內(nèi)穩(wěn)定。

回收率試驗(yàn)：取已知含量的樣品粉末6份，分別加入鹽酸頭孢

他美酯對(duì)照品適量，照擬訂方法，按外標(biāo)法計(jì)算回收率。結(jié)果見表1。

表1 鹽酸頭孢他美酯加樣回收試驗(yàn)結(jié)果（n＝6）

2.4 樣品含量測(cè)定

取3批樣品，照擬訂方法測(cè)定。結(jié)果，3批樣品中含鹽酸頭孢他美酯標(biāo)示百分含量分別為99.41%，99.82%和100.04%。

3 討論

王建［3］和房玉蘭等［4］采用HPLC法對(duì)鹽酸頭孢他美酯原料藥或片劑進(jìn)行了含量測(cè)定及有關(guān)物質(zhì)檢查，所用流動(dòng)相分別為乙腈－甲醇－水－磷酸鹽緩沖液（360∶95∶500∶45）或?yàn)殇寤母啡芤海ㄤ寤母?.2 g加入乙腈360 mL，使溶解）－甲醇－水－磷酸鹽緩沖溶液（取無水磷酸氫二鈉5.8 g與磷酸二氫鉀3.52 g，加水溶解并稀釋成1 000 mL）－枸櫞酸鹽緩沖液（取枸櫞酸20.26 g與氫氧化鈉7.84 g，加水溶解并稀釋成1 000 mL（360∶92∶500∶44∶4），流動(dòng)相組成復(fù)雜，本試驗(yàn)中采用2 mmol／L高氯酸溶液－乙腈（80∶10）為流動(dòng)相，峰形和分離度均較好。

本試驗(yàn)中采用RP－HPLC法對(duì)鹽酸頭孢他美酯片的含量進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明，3批樣品含鹽酸頭孢他美酯均在標(biāo)示量的99.41%～100.04%范圍內(nèi)，供試品溶液主峰的保留時(shí)間與對(duì)照品溶液主峰的保留時(shí)間一致，而按處方量輔料的空白液無此吸收峰，說明該方法簡(jiǎn)便，結(jié)果準(zhǔn)確，專屬性強(qiáng)。

［1］徐麗娜，李莉婭.鹽酸頭孢他美酯的性質(zhì)及其在臨床上的應(yīng)用［J］.內(nèi)蒙古中醫(yī)藥，2009，28（10）：44.

［2］張淑華.國(guó)產(chǎn)頭孢他美酯頭孢他美體內(nèi)外抗菌作用研究［J］.中國(guó)抗生素雜志，2001，26（2）：144－150.

［3］王 建.鹽酸頭孢他美酯及片劑的HPLC測(cè)定［J］.藥物分析雜志，1999，19（4）：264－266.

［4］房玉蘭，侯旭彬，趙鳳欣.高效液相色譜法測(cè)定鹽酸頭孢他美酯片含量［J］.黑龍江醫(yī)藥，2002，15（1）：1－2.

Content Determination of Cefetamet Pivoxil Hydrochloride in Cefetamet Pivoxil Hydrochloride Tablets by RP－HPLC

Chen Yao1，Long Enwu1，Yuan Haoyu2
（1.Department of Pharmacy，Sichuan Provinicial Academy of Medical Sciences Sichuan Provincial People′s Hospital，Chengdu，Sichuan，China 610072；
2.Nuclear Industry 416 Hospital，Chengdu，Sichuan，China 610051）

ObjectiveTo establish a reversed phase high－performance liquid chromatography（RP－HPLC）method for determining the cefetamet pivoxil hydrochloride content in Cefetamet Pivoxil Hydrochloride Tablets.MethodsThe RP－HPLC method was adopted with the Hypersil C18column（200 mm×4.6 mm，10 μm）and the mobile phase of acetonitrile－2 mmol／L perchloric acid solution（20∶80）. The UV detection wavelength was 265 nm and the flow rate was 1.0 mL／min.ResultsThe concentration of cefetamet pivoxil hydrochloride within the range of 10.0－80.0 μg／mL showed a good linear with the peak area（r＝0.999 9），the average recovery rates of high，middle and low concentrations was 99.35%，RSD was 1.23%（n＝6）.ConclusionThis method is simple，accurate，effective and suitable for the quality control for Cefetamet Pivoxil Hydrochloride Tablets.

cefetamet pivoxil hydrochloride；HPLC；content determination

R927.2；R978.1＋1

A

1006－4931（2015）02－0048－02

陳瑤，女，副主任藥師，研究方向?yàn)獒t(yī)院藥學(xué)，（電話）028－87394442（電子信箱）xuyong19711028＠163.com；龍恩武，男，副主任藥師，研究方向?yàn)榕R床藥學(xué)，本文通訊作者，（電話）028－87393403（電子信箱）dragon984169＠126.com。

2014－06－21）