王書峰 郭 玲 張志仁 吳玉章 (第三軍醫(yī)大學(xué)全軍免疫學(xué)研究所，重慶 400038)

醫(yī)學(xué)免疫學(xué)是一門重要的基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)課程，作為生命科學(xué)的前沿學(xué)科，與基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)以及臨床醫(yī)學(xué)的各個(gè)學(xué)科相互交叉和滲透，是溝通基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)的重要橋梁。同時(shí)，免疫學(xué)作為一門實(shí)驗(yàn)學(xué)科，其知識(shí)更新迅速，且理論知識(shí)密切聯(lián)系實(shí)際應(yīng)用。因此，醫(yī)學(xué)免疫學(xué)教學(xué)不僅要培養(yǎng)學(xué)生對免疫學(xué)理論的認(rèn)知能力，更重要的是培養(yǎng)學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)?shù)倪壿嬎季S能力及獨(dú)立的實(shí)踐操作能力。這就要求我們教學(xué)過程中不僅要重視理論教學(xué)，同時(shí)要加強(qiáng)實(shí)踐教學(xué)［1］，即免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)。醫(yī)學(xué)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)通過實(shí)驗(yàn)教學(xué)環(huán)節(jié)，鞏固學(xué)生對免疫學(xué)知識(shí)的理解和掌握程度，同時(shí)培養(yǎng)學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)態(tài)度以及分析問題和解決問題的能力。實(shí)驗(yàn)教學(xué)的質(zhì)量直接影響學(xué)生對免疫學(xué)基本理論的認(rèn)知能力和實(shí)踐應(yīng)用能力。

當(dāng)前國內(nèi)許多院校對醫(yī)學(xué)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革的目的多傾向于培養(yǎng)學(xué)生的臨床實(shí)踐能力［2-4］。然而，在教學(xué)醫(yī)院以及醫(yī)科院校向研究型轉(zhuǎn)化的發(fā)展趨勢下，筆者認(rèn)為深化醫(yī)學(xué)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革需要在培養(yǎng)本科生臨床實(shí)踐能力的同時(shí)兼顧科研創(chuàng)新能力的培養(yǎng)?；诖?，我們對醫(yī)學(xué)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的教學(xué)內(nèi)容、教學(xué)實(shí)施以及考核等環(huán)節(jié)進(jìn)行大幅度改革，將醫(yī)學(xué)免疫學(xué)課程作為一門真正意義上的實(shí)驗(yàn)科學(xué)對待，以期在教學(xué)過程中逐漸提高學(xué)生的臨床實(shí)踐能力和科研創(chuàng)新能力。

1 醫(yī)學(xué)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容的改革:

常規(guī)醫(yī)學(xué)免疫學(xué)理論與實(shí)驗(yàn)的學(xué)時(shí)分配比重大約在2∶1左右［5］，深化醫(yī)學(xué)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革首先從其教學(xué)內(nèi)容入手。結(jié)合免疫學(xué)主要理論以及臨床實(shí)踐和科研工作中主要涉及的免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)操作，我們對醫(yī)學(xué)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容進(jìn)行了系統(tǒng)化完善，完善后的教學(xué)內(nèi)容主要包括三個(gè)模塊:經(jīng)典實(shí)驗(yàn)、綜合性實(shí)驗(yàn)以及應(yīng)用性實(shí)驗(yàn)(圖1)。

1.1 經(jīng)典實(shí)驗(yàn) 經(jīng)典實(shí)驗(yàn)是免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中是必不可少的內(nèi)容。通過經(jīng)典驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)的學(xué)習(xí)不僅有助于學(xué)生加深對免疫學(xué)基本概念、基本理論的理解和掌握，而且有助于培養(yǎng)學(xué)生的嚴(yán)謹(jǐn)科學(xué)思維方式——理論來自于實(shí)踐。結(jié)合免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)教材以及醫(yī)學(xué)免疫學(xué)理論教材，納入實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容的經(jīng)典免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)分為兩部分:一部分針對免疫器官組織及細(xì)胞，另一部分針對基于抗原抗體相互作用的免疫學(xué)技術(shù)。

對免疫器官及組織的認(rèn)知是免疫學(xué)最基本的要求，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物免疫器官的解剖定位是免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)的入手點(diǎn)。免疫細(xì)胞分離和純化是體外檢測免疫細(xì)胞數(shù)量和功能變化的基礎(chǔ)，教學(xué)實(shí)驗(yàn)為小鼠脾淋巴細(xì)胞的分離純化和小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的制備。其中小鼠脾淋巴細(xì)胞的分離純化重點(diǎn)介紹密度梯度離心法的原理，此方法在外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)的分離中同樣適用。

圖1 圖1 醫(yī)學(xué)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容框架Fig.1 Content and framework of experimental teaching of medical immunology

將免疫學(xué)理論應(yīng)用于實(shí)踐而建立的免疫學(xué)技術(shù)中，很多方法是基于抗原抗體相互作用的。經(jīng)典的凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)可以定性或定量的檢測抗原抗體相互作用，免疫標(biāo)記技術(shù)的發(fā)展使得基于抗原抗體相互作用的檢測技術(shù)不僅大大提高了檢測的靈敏度同時(shí)實(shí)現(xiàn)準(zhǔn)確的定量和定位能力。結(jié)合抗原抗體相互作用的基本理論以及常用的臨床檢測技術(shù)開設(shè)以下教學(xué)實(shí)驗(yàn):試管凝集反應(yīng)、雙向瓊脂擴(kuò)散(沉淀反應(yīng))以及酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測HBsAg實(shí)驗(yàn)(免疫標(biāo)記技術(shù))，即包括經(jīng)典的理論驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，又兼顧了免疫學(xué)技術(shù)臨床實(shí)踐中的應(yīng)用。

1.2 綜合性實(shí)驗(yàn) 在學(xué)生具備基本實(shí)驗(yàn)技能的條件下，增加綜合性實(shí)驗(yàn)。綜合性實(shí)驗(yàn)與經(jīng)典基礎(chǔ)性實(shí)驗(yàn)緊密銜接，從免疫細(xì)胞的分離純化到淋巴細(xì)胞表型分析，再到免疫細(xì)胞的功能檢測。結(jié)合免疫學(xué)基礎(chǔ)理論內(nèi)容，綜合實(shí)驗(yàn)涵蓋參與適應(yīng)性免疫應(yīng)答的細(xì)胞(T、B 細(xì)胞)以及參與固有免疫的細(xì)胞(巨噬細(xì)胞、NK 細(xì)胞)的分離純化以及功能和活性的檢測。綜合性實(shí)驗(yàn)的主要內(nèi)容見圖1:淋巴細(xì)胞表型分析主要介紹流式細(xì)胞儀的原理和操作;免疫細(xì)胞功能檢測實(shí)驗(yàn)內(nèi)容包括淋巴細(xì)胞體外增殖實(shí)驗(yàn)、ELISPOT 檢測細(xì)胞分泌活性實(shí)驗(yàn)、巨噬細(xì)胞吞噬功能分析以及NK 細(xì)胞殺傷實(shí)驗(yàn)。此外，根據(jù)學(xué)生興趣可以開展病毒表位鑒定的實(shí)驗(yàn)。此部分各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)均涉及了免疫細(xì)胞的分離和純化，進(jìn)一步提高了學(xué)生基本技能的熟練程度，功能試驗(yàn)的開展逐漸培養(yǎng)學(xué)生參與免疫科研工作的興趣和能力。

1.3 應(yīng)用性實(shí)驗(yàn) 結(jié)合筆者所在科室的科研特色，我們開設(shè)了免疫預(yù)防及疫苗設(shè)計(jì)的應(yīng)用性實(shí)驗(yàn)。采用實(shí)驗(yàn)手段介紹疫苗設(shè)計(jì)的一般規(guī)律，介紹佐劑的概念和應(yīng)用、疫苗接種的途徑及效果影響，讓學(xué)生初步體驗(yàn)免疫學(xué)理論知識(shí)在實(shí)踐中的應(yīng)用。

改革后的醫(yī)學(xué)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容，在經(jīng)典免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上增加了大量的綜合性實(shí)驗(yàn)。這些教學(xué)實(shí)驗(yàn)的選擇是根據(jù)整個(gè)免疫學(xué)基礎(chǔ)理論體系以及科研工作中的常規(guī)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)，集本教研室多數(shù)工作者的意見而設(shè)定。從免疫細(xì)胞分離和純化逐漸深入到免疫細(xì)胞功能檢測，即涵蓋了適應(yīng)性免疫應(yīng)答又包括了固有免疫應(yīng)答的誘導(dǎo)以及檢測，與醫(yī)學(xué)免疫學(xué)理論教學(xué)內(nèi)容緊密相接。內(nèi)容上不僅包括基礎(chǔ)理論實(shí)驗(yàn)同時(shí)增加了應(yīng)用性實(shí)驗(yàn)的開設(shè)。通過這些實(shí)驗(yàn)的教學(xué)不僅有助于培養(yǎng)醫(yī)科院校本科生臨床實(shí)踐技能，同時(shí)培養(yǎng)了學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)態(tài)度及創(chuàng)新思維，為學(xué)生今后無論參與臨床工作還是基礎(chǔ)科學(xué)研究均奠定了可靠的基礎(chǔ)。

2 教學(xué)實(shí)施安排的改革

通常免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)多是在理論課結(jié)束后才逐漸展開的，筆者以為這是一種極其不妥的教學(xué)實(shí)施安排，免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的首要目的是培養(yǎng)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣，并通過實(shí)驗(yàn)提高學(xué)生對免疫學(xué)理論的理解和掌握程度。理論教學(xué)結(jié)束后，學(xué)生的重點(diǎn)可能更多地放在如何通過理論考核上面，對實(shí)驗(yàn)教學(xué)的重視程度下降，甚至免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)逐漸變成一種形式教學(xué)。故實(shí)驗(yàn)教學(xué)實(shí)施時(shí)間應(yīng)當(dāng)緊隨理論教學(xué)進(jìn)度安排。

影響實(shí)驗(yàn)教學(xué)實(shí)施的因素還包括教學(xué)實(shí)施地點(diǎn)的影響，通常本科生的實(shí)驗(yàn)教學(xué)多數(shù)集中于公共教學(xué)實(shí)驗(yàn)室開展，這不可避免地制約了免疫學(xué)特色實(shí)驗(yàn)的開展，例如流式細(xì)胞儀的操作、ELISPOT 讀板儀等，因此筆者建議采用公共實(shí)驗(yàn)室資源與科室資源結(jié)合的方式開展免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)，這不僅在一定程度上降低了教學(xué)實(shí)施的成本，保障實(shí)驗(yàn)教學(xué)的順利開展，而且還可以讓學(xué)生逐步接觸免疫學(xué)的科研工作，激發(fā)其參與科研創(chuàng)新的興趣。

綜合性實(shí)驗(yàn)的開設(shè)要求合理安排各個(gè)教學(xué)實(shí)驗(yàn)的實(shí)施時(shí)間，例如淋巴細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)，抗原體外刺激淋巴細(xì)胞增殖要孵育72 h，要順利完成此實(shí)驗(yàn)的教學(xué)需要將其分為2 次實(shí)驗(yàn)，首先做淋巴細(xì)胞分離純化以及抗原刺激操作，72 h 后再安排染色或者WTS法檢測增殖實(shí)驗(yàn)。為了確保教學(xué)實(shí)驗(yàn)的順利開展，教學(xué)組不僅需要安排實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)豐富的工作人員專門負(fù)責(zé)本專業(yè)的實(shí)驗(yàn)課教學(xué)，還應(yīng)當(dāng)為每個(gè)實(shí)驗(yàn)安排專門的工作人員進(jìn)行材料準(zhǔn)備以及前期預(yù)實(shí)驗(yàn)的操作準(zhǔn)備。

3 實(shí)驗(yàn)教學(xué)考核方式改革

醫(yī)學(xué)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)的成績通常作為醫(yī)學(xué)免疫學(xué)課程的一部分形成性考核成績而存在，多是基于實(shí)驗(yàn)操作的平時(shí)成績以及實(shí)驗(yàn)報(bào)告的撰寫成績。隨著免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容的改革，筆者認(rèn)為應(yīng)當(dāng)同時(shí)完善醫(yī)學(xué)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)考核程序。為提高學(xué)生的動(dòng)手能力、獨(dú)立思考、分析問題和解決問題的能力，除考查學(xué)生平時(shí)在實(shí)驗(yàn)過程中的操作以及實(shí)驗(yàn)報(bào)告的撰寫等環(huán)節(jié)外，增加免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)考試制度。以經(jīng)典免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)為主，例如小鼠脾淋巴細(xì)胞的分離純化或者ELISA 實(shí)驗(yàn)的基本操作，主要考核學(xué)生對免疫學(xué)基本實(shí)驗(yàn)中關(guān)鍵步驟的掌握程度。通過免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)課的學(xué)習(xí)讓學(xué)生真正意義上掌握免疫學(xué)技術(shù)的基本操作技能，確保在今后參與臨床實(shí)踐或者科研工作時(shí)能夠順利開展。

4 改革后醫(yī)學(xué)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的優(yōu)點(diǎn)及靈活性

改革后的醫(yī)學(xué)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的優(yōu)點(diǎn)主要體現(xiàn)在其內(nèi)容的系統(tǒng)性和完整性上，從經(jīng)典實(shí)驗(yàn)到綜合實(shí)驗(yàn)，從簡單的細(xì)胞分離到其功能或活性的檢測，從固有免疫到適應(yīng)性免疫應(yīng)答，從免疫學(xué)基礎(chǔ)理論的驗(yàn)證到其在實(shí)踐中的應(yīng)用，與醫(yī)學(xué)免疫學(xué)理論相輔相成。其內(nèi)容由淺入深，在提高學(xué)生學(xué)習(xí)興趣的同時(shí)，鞏固了學(xué)生對免疫學(xué)基本概念基本理論的理解和掌握;在培養(yǎng)醫(yī)科院校本科生的臨床實(shí)踐能力的同時(shí)，培養(yǎng)了學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)態(tài)度和創(chuàng)新思維。

這里免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)課的內(nèi)容主要由經(jīng)典實(shí)驗(yàn)、綜合實(shí)驗(yàn)、應(yīng)用性實(shí)驗(yàn)三大模塊組成，各模塊的內(nèi)容不是固定不變的，其他學(xué)?？梢源藶槟０?，根據(jù)自己的特色進(jìn)行增減和改變。例如，小鼠脾淋巴細(xì)胞分離純化實(shí)驗(yàn)可以改為或再增加人外周血單個(gè)核細(xì)胞的分離純化實(shí)驗(yàn)，而應(yīng)用性實(shí)驗(yàn)部分可以改為設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)等。改革后的醫(yī)學(xué)免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的靈活性還體現(xiàn)在它不僅可以作為醫(yī)學(xué)免疫學(xué)課程的實(shí)驗(yàn)部分進(jìn)行實(shí)施，同時(shí)可以作為單獨(dú)的一門課程開展。目前在我校生物技術(shù)專業(yè)已開設(shè)了以此實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容為基礎(chǔ)的免疫學(xué)技術(shù)課程，對上述免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)進(jìn)行初步嘗試，以期進(jìn)一步完善和深入探討醫(yī)學(xué)免疫實(shí)驗(yàn)教學(xué)的改革。

5 結(jié)語

深化醫(yī)學(xué)免疫學(xué)教學(xué)實(shí)驗(yàn)改革就要注重系統(tǒng)性、完整性和協(xié)同性。這不僅要求我們完善實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容，協(xié)調(diào)教學(xué)實(shí)施的各個(gè)環(huán)節(jié)，同時(shí)要求教學(xué)實(shí)施人員(授課教師)逐漸轉(zhuǎn)變觀念，提升教學(xué)技能，以適應(yīng)教學(xué)改革要求。此外，醫(yī)學(xué)免疫學(xué)與基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)以及臨床醫(yī)學(xué)中的各個(gè)學(xué)科相互交叉滲透，進(jìn)一步深化免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革需要多個(gè)學(xué)科的協(xié)同創(chuàng)新，開展多學(xué)科、多專業(yè)相互交叉的綜合實(shí)驗(yàn)將成為基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)以及臨床醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的發(fā)展方向。

［1］孫慶偉，侯 奕.醫(yī)學(xué)院校基礎(chǔ)課的理論教學(xué)與實(shí)驗(yàn)教學(xué)是一個(gè)不可分割的整體［J］.山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)教育版)，2000，2(2):127-128.

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