王石梅　藺莉莉

摘要：目的 比較耐甲氧西林金黃色葡萄球菌MRSA和甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌MSSA的構(gòu)成比及耐藥率，為臨床葡萄球菌感染合理用藥提供理論依據(jù)。方法 采用VITEK2全自動(dòng)微生物分析儀以及配套GP藥敏板，檢測(cè)金黃色葡萄球菌MRSA143株和MSSA110株，對(duì)17種抗菌藥物的敏感性。結(jié)果 除青霉素、氨芐、萬(wàn)古霉素、利奈唑烷外，MRSA和MSSA對(duì)同種抗生素耐藥性的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），且未發(fā)現(xiàn)VRS株。結(jié)論 臨床分離的MRSA對(duì)多種抗菌藥物的耐藥率較高，且呈多重耐藥性；MSSA對(duì)大多數(shù)藥物敏感性較好，臨床用藥控制較好；因此，臨床微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)加強(qiáng)對(duì)MRSA的監(jiān)測(cè)，以防止MRSA耐藥率的提高以及VRS株的出現(xiàn)。

關(guān)鍵詞：葡萄球菌；金黃色；甲氧西林；耐藥性

金黃色葡萄球菌（SA）是臨床上最常見的致病菌之一，其產(chǎn)生的毒素和酶最多，毒力在葡萄球菌中最強(qiáng)，尤其耐甲氧西林金黃色葡萄球菌MRSA是醫(yī)院內(nèi)感染的主要病原菌具有多重耐藥特征，幾乎對(duì)所有β‐內(nèi)酰胺類抗菌劑耐藥，甚至累及到大環(huán)內(nèi)酯類、喹諾酮類和氨基糖苷類等抗菌劑已成為臨床抗感染治療的難題之一。相關(guān)研究結(jié)果顯示，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌MRSA克林霉素耐藥率是95%，MSSA克林霉素也達(dá)到68%，氨芐西林頭孢呋辛耐藥率分別是95%和77%，而MRSA這兩種抗生素耐藥是100%。耐甲氧西林金黃色葡萄球菌目前已經(jīng)成為院內(nèi)感染的主要病原菌，并逐漸擴(kuò)展到社區(qū)。及時(shí)準(zhǔn)確的檢測(cè)MRSA并合理應(yīng)用抗菌素，采取嚴(yán)格的隔離和消毒措施，對(duì)于控制MRSA院內(nèi)暴發(fā)流行，限制向社區(qū)蔓延是十分必要的。

1 資料與方法

1.1一般資料

1.1.1菌株來(lái)源 菌株來(lái)源于我院就診的患者的各種細(xì)菌標(biāo)本。MRSA醫(yī)院感染的診斷按《臨床醫(yī)院感染學(xué)》質(zhì)控菌株金黃色葡萄球菌ATCC25923購(gòu)自衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心。

1.1.2儀器設(shè)備：細(xì)菌鑒定和藥敏試驗(yàn)使用VITEKII全自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏系統(tǒng)，選用購(gòu)自英國(guó)Oxoid公司抗菌劑紙片及梅里埃生產(chǎn)的MH瓊脂板。

1.2方法

1.2.1菌株分離及鑒定 所有SA菌株均以常規(guī)方法分離自臨床標(biāo)本，以革蘭染色、觸酶實(shí)驗(yàn)及API Staph或VITEKⅡ型分析儀進(jìn)行鑒定，采用CLSI推薦的頭孢西丁紙片擴(kuò)散法進(jìn)行MRSA檢測(cè)凡SA對(duì)頭孢西丁的抑菌圈直徑小于或等于21mm，判斷為MRSA；如果抑菌圈直徑大于或等于22mm，判斷為甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌MSSA。

1.2.2藥敏判斷標(biāo)準(zhǔn)：藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果按CLSI對(duì)葡萄球菌屬判斷標(biāo)準(zhǔn)判讀結(jié)果為耐藥R敏感S，結(jié)果以CLSI的質(zhì)控范圍為標(biāo)準(zhǔn)，各抗菌劑紙片均在質(zhì)控范圍內(nèi)。

1.3數(shù)據(jù)處理：采用WHONET5.4分析軟件及SPSS11.5統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，P<0.05差異顯著，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果與分析

MRSA的檢出率及分布：共分離金黃色葡萄球菌菌株253株，檢測(cè)出MRSA 143株，檢出率為56%。主要來(lái)源于下列標(biāo)本：傷口38株、痰56株、分泌物24株、尿液7株，血液3株，膿6株其他9株。MRSA在臨床各科室中的分布以ICU、骨科、普通外科為主。

3 討論

對(duì)MRSA的檢測(cè)，用快速的紙片擴(kuò)散法有缺陷對(duì)MRSA危害性更嚴(yán)重的表現(xiàn)在對(duì)多種藥物的多重耐藥性，特別是β-內(nèi)酰胺酶陽(yáng)性的菌株，其耐藥頻率更高。從表1中可以看出，MRSA對(duì)許多抗生素包括青霉素G、頭孢類、大環(huán)內(nèi)酯類、四環(huán)素類、單一抗生素類的慶大霉素、克林霉素等均表現(xiàn)為大于90%耐藥，對(duì)于常用抗生素利福平也有不同程度的耐藥，即使體外藥敏敏感，但治療效果不理想而且利福平在臨床上不單獨(dú)使用，利奈唑胺萬(wàn)古霉素敏感率100%、替考拉寧對(duì)其88%敏感。MSSA對(duì)青霉素也有90%以上耐藥，對(duì)紅霉素和克林霉素的敏感10%不到，對(duì)奎諾酮類抗菌藥物的敏感率已經(jīng)低于90%，對(duì)頭孢類抗菌藥物也一樣。可見，如果長(zhǎng)期大量的濫用抗菌藥物，即使是MSSA，耐藥譜也會(huì)逐漸擴(kuò)大。所有金黃色葡萄球菌對(duì)萬(wàn)古霉素和利奈唑胺敏感率100%、替考拉寧88%仍表現(xiàn)為敏感。目前，萬(wàn)古霉素是治療MRSA感染的首選藥物。但一旦大量使用萬(wàn)古霉素，又有潛在的耐萬(wàn)古霉素菌株出現(xiàn)的可能。自2002年美國(guó)報(bào)道了第1株耐萬(wàn)古霉素的金黃色葡萄球菌以來(lái)，先后出現(xiàn)3株VRSA。如萬(wàn)古霉素對(duì)MRSA治療無(wú)效，那么后果不堪設(shè)想。MRSA的耐藥性分析及治療的結(jié)果顯示，MRSA菌株對(duì)多種抗菌藥物耐藥，MRSA對(duì)青霉素G、苯唑西林及頭孢呋辛的耐藥率最高均為100%。頭孢他啶、慶大霉素、左氧氟沙星、紅霉素、克林霉素等也具有很高的耐藥率，而復(fù)方新諾明較為敏感，耐藥率25為，143株MRSA對(duì)萬(wàn)古霉素完全敏感?？梢钥闯?，當(dāng)前MRSA對(duì)臨床常用抗生素具有嚴(yán)重的耐藥性，并呈多重高度耐藥的特征，這與臨床長(zhǎng)期大劑量使用這些抗生素對(duì)耐藥性的誘導(dǎo)有很大關(guān)系。吳超認(rèn)為，抗菌藥物的廣泛使用，特別是具有強(qiáng)大抗陰性桿菌廣譜抗生素的廣泛應(yīng)用造成的選擇性壓力，使部分革蘭陽(yáng)性菌得以大量繁殖，是造成其耐藥的重要原因。由于MRSA的多重高度耐藥，臨床上抗生素的應(yīng)用譜已較為狹窄，所以應(yīng)合理使用抗生素，延緩或減少耐藥菌株的產(chǎn)生，控制耐藥菌株的擴(kuò)散和流行，以利于疾病的治療。本組未發(fā)現(xiàn)耐萬(wàn)古霉素的菌株，表明萬(wàn)古霉素對(duì)MRSA仍保持很高的抗菌活性，考慮是由于萬(wàn)古霉素的毒性反應(yīng)大、臨床使用嚴(yán)格控制，因此保持了很高的敏感性。但正是由于MRSA感染的增加，使萬(wàn)古霉素在臨床上的應(yīng)用日益增多，有資料顯示國(guó)外已經(jīng)有報(bào)道出現(xiàn)對(duì)萬(wàn)古霉素耐藥的MRSA菌株，為此，必須加強(qiáng)對(duì)抗菌藥物的合理應(yīng)用和管理，制定合理的抗感染計(jì)劃，對(duì)MRSA的治療應(yīng)當(dāng)采取防治結(jié)合的綜合策略。

MRSA感染的臨床很難控制，因此預(yù)防MRSA感染顯得更加重要。MRSA的主要傳播方式是定植或感染患者所帶細(xì)菌經(jīng)醫(yī)護(hù)人員的手傳播至其他患者，為接觸性傳播。經(jīng)空氣傳播被認(rèn)為是肺炎的可能途徑，在燒傷病房可能是重要的傳播途徑，因此，應(yīng)定期對(duì)空氣、物體表面、醫(yī)療儀器及醫(yī)務(wù)人員的手進(jìn)行細(xì)菌學(xué)監(jiān)測(cè)，做到早發(fā)現(xiàn)病原菌，及時(shí)采取預(yù)防控制措施[1-4]。

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編輯/王敏