闞建全，夏雪娟，李冠楠，吳金松，鄭 炯，陳宗道

（1.西南大學食品科學學院，農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品貯藏保鮮質(zhì)量安全風險評估實驗室（重慶），重慶 400715；2.西南大學生物技術學院，重慶 400715）

?

加工處理對甘薯糖蛋白免疫調(diào)節(jié)和降膽固醇功能的影響

闞建全1，夏雪娟1，李冠楠2，吳金松1，鄭 炯1，陳宗道1

（1.西南大學食品科學學院，農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品貯藏保鮮質(zhì)量安全風險評估實驗室（重慶），重慶 400715；2.西南大學生物技術學院，重慶 400715）

摘 要：目的：以實驗室提取的甘薯糖蛋白-1（sweet potato glycoprotein-1，SPG-1）為原料，研究不同加工處理對其蛋白免疫調(diào)節(jié)和降膽固醇功能的影響。方法：研究熱處理、酸堿處理、紫外光照射、微波處理對甘薯糖蛋白SPG-1的免疫調(diào)節(jié)作用（包括巨噬細胞吞噬功能、細胞吞噬功能和血清溶血素含量）和降血清總膽固醇作用的影響。結(jié)果：熱處理溫度和pH值對甘薯糖蛋白SPG-1的免疫調(diào)節(jié)和降膽固醇作用的影響較大，熱處理溫度超過100 ℃、pH＜3.5或＞7.5時，糖蛋白處理組的吞噬指數(shù)（k）、酸性α-醋酸萘酯酶陽性率、半數(shù)溶血值（HC50）和血清膽固醇下降率（ΔTC）均顯著性降低（P＜0.05或P＜0.01）；糖蛋白處理組的吞噬指數(shù)（k）和血清膽固醇下降率（ΔTC）在紫外光照射條件下與對照組相比差異不顯著（P＞0.05），而微波處理60 s以上時，與對照組相比有顯著性或極顯著性差異（P＜0.05或P＜0.01）。結(jié)論：甘薯糖蛋白SPG-1加工處理過程中應避免70 ℃以上的高溫，選擇合適的pH值范圍（3.5～7.5），避免較長時間（＞60 s）的微波處理。

關鍵詞：甘薯糖蛋白；加工處理；免疫調(diào)節(jié)；膽固醇

甘薯（Ipomoea batatas L.）屬根莖類旋花科一年蔓生草本植物，產(chǎn)量高，適應性廣、抗逆性和再生能力強、營養(yǎng)價值豐富、具有多種保健功效、利用價值高[1]。糖蛋白是一類由糖類與蛋白中氨基酸以共價鍵結(jié)合而成的結(jié)合蛋白[2]。甘薯糖蛋白廣泛存在于甘薯塊根中[3]，具有抑制膽固醇在體內(nèi)沉積、增強機體免疫力、減少高血壓發(fā)生率、減慢人體器官老化速度等特殊生理功能[4]。

由于其低廉的價格和突出的保健功效，以甘薯為原料提取糖蛋白作為保健食品功能成分進行市場開發(fā)具有長遠的戰(zhàn)略意義。但保健食品在加工過程中必然要經(jīng)過特定的處理，其功能性成分在處理后還能否保持其活性是保健食品研究中一個值得關注的問題。目前，國內(nèi)外有關甘薯糖蛋白的研究多集中在提取、分離、純化、結(jié)構(gòu)和生理功能等的研究。如趙梅[5]、李亞娜[6]、師超[7]等對甘薯糖蛋白的提取、分離和純化條件進行了優(yōu)化；闞建全[8]、孟憲軍[9]等對甘薯糖蛋白的結(jié)構(gòu)進行了研究；Kusano[10]、梁婧婧[11]、闞建全[8]、Tsai Shunjen[12]等分別研究了甘薯糖蛋白的抗糖尿病、降血脂、免疫調(diào)節(jié)和抗突變作用。而有關加工處理對甘薯糖蛋白的活性影響研究相對較少。本研究選取食品加工中較常見的影響因素：熱處理、酸堿處理、紫外光照射和微波處理，研究其對甘薯糖蛋白的免疫調(diào)節(jié)和降膽固醇作用的影響，以期為甘薯糖蛋白保健品的加工提供一定的理論依據(jù)。

1　材料與方法

1.1材料

1.1.1 樣品

甘薯購自西南大學實驗農(nóng)場，西南大學甘薯研究中心鑒定為北京2號甘薯（Beijing No.2 Ipomoea batatas L.）。1.1.2 實驗動物

昆明種小白鼠：BALB/c純系小鼠，雌雄各半，體質(zhì)量18～20 g，8～10 周齡（醫(yī)動字第24301035號）；Wistar大鼠，雌雄各半，體質(zhì)量150～210 g（醫(yī)動字第24301035號），由重慶市中藥研究院實驗動物中心提供。1.1.3 飼料

基礎飼料由重慶市中藥研究院實驗動物中心提供，配方為：小麥粉35%、玉米粉31%、生豆餅粉15%、魚粉10%、奶粉5%、骨粉3%、食鹽1%。每100 kg飼料中含魚肝油125 g，混合維生素10 g及微量元素50 g。

脂肪乳劑由重慶市中藥研究院藥理病理研究室提供：豬油20%、膽固醇10%、豬膽鹽2%、甲基硫氧嘧啶1%。每100 mL脂肪乳劑中含5 mL吐溫-80，10 mL丙二醇。

1.1.4 試劑與儀器

印度墨汁 北京索萊寶科技有限公司；α-醋酸萘酯上海紀寧實業(yè)有限公司；肝素 蘇州東吳醫(yī)用生化制品廠；豚鼠血清、綿羊紅細胞 華美生物工程公司；聚蔗糖-泛影葡胺分層液、膽固醇、豬膽鹽 上海廣銳生物科技有限公司；總膽固醇（total cholesterol，TC）測定試劑盒（批號1213051） 四川邁克生物科技股份有限公司；副品紅、酚紅、孔雀綠、甲基綠、乙二醇單甲醚、戊二醛、碳酸鈉、碳酸氫鈉、檸檬酸鈉、亞硝酸鈉、氰化鉀、高鐵氰化鉀均為分析純。

BX41電子顯微鏡 日本奧林巴斯公司；752型分光光度計 上海精密科學儀器有限公司分析儀器總廠；TGL-16B型離心機 上海安亭科學儀器廠；日立7020型全自動生化分析儀 日本日立公司。

1.2方法

本實驗用甘薯糖蛋白純品SPG-1是從甘薯中分離提取，經(jīng)DEAE-52纖維素柱層析和Sephadex G-100柱層析純化，高效液相色譜法測定其分子質(zhì)量為50.83×104D，苯酚硫酸法測定總糖含量為97.32%，F(xiàn)olin-酚法測定蛋白質(zhì)含量為2.15%。

1.2.1加工處理方法[13]

1.2.1.1 熱處理

將2.0 g/100 mL的甘薯糖蛋白溶液分別在60、70、100、121 ℃分別加熱處理0、5、10、15、20、25、30 min，冷卻后待用。

1.2.1.2 酸堿處理

將2.0 g/100 mL的甘薯糖蛋白溶液用0.5 mol/L鹽酸或氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至1.5、2.5、3.5、4.5、5.8、6.5、7.5、8.5、9.5，室溫下放置30 min，待中和后放在超純水中透析24 h進行脫鹽處理，真空濃縮后待用。

1.2.1.3 紫外光照射處理

取50 mL 2.0 g/100 mL的甘薯糖蛋白溶液放置于小燒杯中，置于距30 W紫外燈下0.5 m處分別照射6、12、24、48、96 h后待用。

1.2.1.4 微波處理

取50 mL 2.0 g/100 mL的甘薯糖蛋白溶液放置于小燒杯中，在900 W美的微波爐中分別微波（100%火力）處理10、20、40、60、80、100 s后待用。

1.2.2 加工處理對甘薯糖蛋白免疫調(diào)節(jié)作用的影響

免疫是指機體免疫系統(tǒng)對抗原物質(zhì)的生理學應答過程，具有“識別”和“排除”抗原性異物、維持機體生理平衡的功能。免疫調(diào)節(jié)功能包括非特異性免疫、細胞免疫和體液免疫[14-15]，本實驗分別對其相應指標[16]：巨噬細胞吞噬功能、細胞吞噬功能和血清溶血素含量的變化進行研究。

1.2.2.1 小鼠碳粒廓清實驗檢測巨噬細胞吞噬功能

取20 只雌雄各半18～20 g的健康小白鼠，隨機分成實驗組和對照組，每組10 只。實驗組每天灌胃80 mg/kg（以體質(zhì)量計）處理后的甘薯糖蛋白樣品，對照組給予等體積的生理鹽水，持續(xù)10 d。末次灌胃30 min后，向各小鼠尾靜脈注射0.05 mL/10 g體質(zhì)量印度墨汁，分別在2 min（t1）和7 min（t2）時在小鼠眼眶后靜脈叢取血0.25 mL。將血溶于2 mL 0.1 g/100 mL Na2CO3溶液中，搖勻后在680 nm波長處測定吸光度（A），以空白Na2CO3溶液作對照。將小鼠頸椎脫臼處死，稱取肝臟、脾臟質(zhì)量，計算吞噬指數(shù)（k）[17-18]。

式中：A1、A2分別為在時間t1、t2時所取血樣的吸光度。

1.2.2.2 酸性α-醋酸萘酯酶（acid α-naphthy acetate esterase，ANAE）染色法測定細胞吞噬功能

取20 只雌雄各半18～20 g的健康小白鼠，隨機分成實驗組和對照組，每組10 只。實驗組每天灌胃80 mg/kg（以體質(zhì)量計，下同）處理后的甘薯糖蛋白樣品，對照組給予等體積的生理鹽水，持續(xù)10 d。第10天灌胃后，心臟取血，并用Hank’s溶液稀釋2 倍備用。向試管中加入4 mL聚蔗糖-泛影葡胺分層液，并用毛細管吸取稀釋后的血液緩慢加到分層液上，使血液與分層液體積比約為2∶1。2 000 r/min離心30 min后，用毛細管輕輕插到單個核細胞層，吸出界面層細胞，并移入試管中，與5 倍體積的Hank’s溶液混勻，1 500 r/min離心15 min，棄上清液。將沉淀細胞同法重復洗滌2 次后，加入少量的Hank’s溶液，吸取一滴于載玻片上。向標本片上滴加體積分數(shù)2.5%戊二醛溶液，混勻后4 ℃固定10 min。取出，自然干燥后流水沖洗3 次。吹干后浸入反應液中，37 ℃孵育1 h，取出，流水沖洗，吹干后用復合對比染液復染10 min，流水沖洗，吹干后油鏡下觀察計數(shù)，計算ANAE陽性率[19-20]。

實驗用試劑配制：pH 7.2～7.6 Hank’s溶液：A液：分別稱取160 g NaCl、2 g MgSO4?7H2O、8 g KCl、2 g MgCl2?7H2O，溶于800 mL超純水中；另稱取2.8 g CaCl2溶于100 mL超純水中?；旌蟽扇芤?，并用超純水定容至1 000 mL。

B液：分別稱取3.04 g Na2HPO4?12H2O、20.0 g葡萄糖、1.2 g KH2PO4，溶于800 mL超純水中；另稱取酚紅0.4 g，逐滴加入約10 mL 0.1 mol/L NaOH使其完全溶解，用超純水定容至100 mL，得0.4 g/100 mL酚紅溶液?；旌蟽扇芤?，并用超純水定容至1 000 mL。

將A液、B液、超純水按體積比1∶1∶18混合，121 ℃高壓蒸汽滅菌15 min，臨用前用無菌5.6 g/100 mL NaHCO3調(diào)pH值至7.2～7.6。

2.5%戊二醛溶液：取1 mL體積分數(shù)25%戊二醛溶液與9 mL 0.1 mol/L pH 7.4磷酸鹽緩沖液混合即為固定液，置4 ℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/p>

副品紅溶液：取副品紅4 g溶于100 mL 2 mol/L鹽酸中，置37 ℃水浴中溶解，過濾后置4 ℃冰箱避光保存?zhèn)溆谩?/p>

六偶氮副品紅溶液：取3 mL 4 g/100 mL亞硝酸鈉，緩慢滴入3 mL副品紅溶液，邊滴邊充分振蕩1 min后備用，現(xiàn)用現(xiàn)配。

反應液：先后向89 mL 0.067 mol/L pH 7.6磷酸鹽緩沖液中滴加6 mL六偶氮副品紅液和2.5 mL α-醋酸萘酯乙二醇單甲醚，混勻。

復合對比染色：取3 mL 1 g/100 mL孔雀綠水溶液，6 mL 2 g/100 mL甲基綠水溶液，150 mL 0.2 mol/L醋酸鹽緩沖液（pH 4.8），與150 mL純水混勻后備用。

1.2.2.3 綿羊紅細胞（sheep red blood cells，SRBC）免疫法測定血清溶血素含量

取20 只雌雄各半18～20 g的健康小白鼠，隨機分成實驗組和對照組，每組10 只。實驗組每天腹腔注射80 mg/kg（以體質(zhì)量計，下同）處理后的甘薯糖蛋白樣品，對照組給予等體積的生理鹽水。SRBC用生理鹽水洗滌3 次，每次洗滌后2 000 r/min離心5 min棄上清液。洗滌后加入體積比為3∶5的生理鹽水，使細胞濃度約為2×108個/mL。每只小鼠腹腔注射0.2 mL稀釋后的SRBC懸浮進行免疫，4 d后眼眶取血。用生理鹽水將血清稀釋至500 倍，吸取1 mL于反應管中，加入0.5 mL SRBC，冰浴，加入1 mL稀釋后的豚鼠血清，立即37 ℃水浴10 min。之后放入冰浴中終止反應，2 000 r/min離心10 min，取1 mL上清液，加入3 mL都氏試劑（每1 000 mL純水中含有1.0 g NaHCO3、0.05 g KCN、0.2 g高鐵氰化鉀），充分混勻后放置10 min，在540 nm波長處測定吸光度，對照組不加血清，按下式計算半數(shù)溶血值（HC50）[21]。

式中：SRBC半數(shù)溶血時的吸光度測定：取0.25 mL稀釋后的SRBC，加入4 mL都氏試劑，搖勻后放置10 min，離心取上清液，在540 nm波長處測定吸光度。

1.2.3 甘薯糖蛋白對大鼠膽固醇的影響

取雌雄各半的健康Wistar大鼠，飼喂基礎飼料7 d后，隨機分為高脂對照組和實驗組，各組13 只。每組每天下午灌胃脂肪乳劑10 mL/kg（以體質(zhì)量計，下同）。實驗組每天上午腹腔注射15 mg/kg處理后的甘薯糖蛋白樣品，高脂對照組注射無菌純水，連續(xù)30 d。實驗結(jié)束時所有動物禁食12 h后，腹腔注射50 mg/kg戊巴比妥鈉，麻醉后從頸總動脈取血，將全血于3 000 r/min離心5 min，然后取上層血清。酶聯(lián)試劑盒測定血清總膽固醇（TC）含量，計算膽固醇下降率（ΔTC）[22]。

式中：ΔTC為膽固醇下降率/%；TCHL、TCSPG分別為高脂對照組和實驗組大鼠血清膽固醇值。

1.3數(shù)據(jù)處理

采用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件進行t檢驗和方差分析，檢驗的顯著性水平設定為P＜0.05（顯著水平）和P＜0.01（極顯著水平）。

2　結(jié)果與分析

2.1加工處理對甘薯糖蛋白免疫調(diào)節(jié)作用的影響

2.1.1 熱處理對甘薯糖蛋白免疫調(diào)節(jié)作用的影響

加工對溫度的要求一般為100、121 ℃或巴氏滅菌（60～70 ℃），故對處理溫度為60、70、100、121 ℃時甘薯糖蛋白的免疫調(diào)節(jié)作用影響進行研究，結(jié)果見表1。

表1　熱處理對甘薯糖蛋白SPG-1免疫調(diào)節(jié)作用的影響Table 1 Effect of heat treatment on immunoregulation of SPG-1

由表1可知，與60 ℃相比，70 ℃處理條件下吞噬指數(shù)（k）略有上升，差異不顯著（P＞0.05）；當溫度達到100 ℃時，k值迅速從60 ℃的0.130 4下降為0.101 1，差異顯著（P＜0.05）；在121 ℃條件下，吞噬指數(shù)達到最低值（0.051 5），與60 ℃相比下降幅度為63%，差異極顯著（P＜0.01）。熱處理對甘薯糖蛋白的HC50和ANAE陽性率的影響趨勢是一致的，隨著溫度的不斷升高，HC50和ANAE陽性率均呈下降趨勢。121 ℃時HC50和ANAE陽性率均達到最低，與對照組差異極顯著（P＜0.01）。這說明熱處理溫度對甘薯糖蛋白SPG-1的免疫調(diào)節(jié)作用影響較大，當溫度超過70 ℃時，其免疫作用明顯下降，其原因可能是高溫破壞了糖蛋白的結(jié)構(gòu)[23]。因此在甘薯糖蛋白加工中，應盡量避免70 ℃以上的高溫。

2.1.2 酸堿處理對甘薯糖蛋白SPG-1免疫調(diào)節(jié)作用的影響

表2　酸堿處理對甘薯糖蛋白SPG-1免疫調(diào)節(jié)作用的影響Table 2 Effect of acid and alkali treatment on immunoregulation of SPG-1

由表2可知，酸堿處理對甘薯糖蛋白的吞噬指數(shù)（k）、HC50和ANAE陽性率的影響基本一致。在pH 3.5～7.5范圍內(nèi)，3 種指標均基本穩(wěn)定，但當p H＜3.5或＞7.5時，3 種指標隨著pH值的增加或減少迅速下降，與對照組差異顯著或極顯著（P＜0.05或P＜0.01）。這說明甘薯糖蛋白SPG-1的免疫調(diào)節(jié)活性在pH 3.5～7.5范圍內(nèi)較高，超過這個范圍其免疫調(diào)節(jié)活性都有不同程度的降低，甚至失活。這是因為甘薯糖蛋白的糖鏈和肽鏈在較強的酸性和堿性條件下都會發(fā)生不同程度的水解，破壞其鏈間結(jié)構(gòu)，從而使其免疫活性降低[24]。因此在加工過程中，應當考慮適宜的pH值范圍，以確保其免疫活性。

2.1.3 紫外光照射和微波處理對甘薯糖蛋白SPG-1免疫調(diào)節(jié)作用的影響

表3　紫外光照射和微波處理對甘薯糖蛋白SPG-1免疫調(diào)節(jié)作用的影響Table 3 Effect of ultraviolet light and microwave treatment on immunoregulation of SPG-1

由表3可知，紫外光照射對甘薯糖蛋白SPG-1的吞噬指數(shù)（k）影響較小，各組差異不顯著；微波處理對其影響較大。隨著微波處理時間的延長，k值不斷下降，照射60 s時已顯著低于對照組（P＜0.05），照射80 s時差異即達到極顯著性水平（P＜0.01）。這些結(jié)果說明紫外光照射對甘薯糖蛋白的免疫調(diào)節(jié)作用影響較小，而微波處理影響較大。

2.2加工處理對甘薯糖蛋白降膽固醇作用的影響

2.2.1 熱處理對甘薯糖蛋白降膽固醇作用的影響

表4　熱處理對甘薯糖蛋白降膽固醇作用（ΔTC）的影響Table 4 Effect of heat treatment on cholesterol-lowering activity (ΔTC) of SPGG--11

由表4可知，隨著熱處理溫度的提高，甘薯糖蛋白SPG-1降血清膽固醇作用明顯下降。在60 ℃條件下，甘薯糖蛋白降血清膽固醇作用最強，且不同處理時間下差異不顯著（P＞0.05）；70 ℃時，血清膽固醇下降率（ΔTC）略有減少，但與對照組相比差異不明顯（P＞0.05）；當溫度達到100 ℃時，ΔTC迅速減少，如當處理5 min時，與對照組相比差異極顯著（P＜0.01），且隨處理時間的延長ΔTC不斷減少；在121 ℃時，ΔTC達到最低值，此時幾乎完全喪失降膽固醇功能。因此溫度對甘薯糖蛋白的降血清膽固醇活性影響較大，在70 ℃以內(nèi)，活性較大且較為穩(wěn)定；當溫度超過70 ℃時，活性迅速降低。

2.2.2 酸堿處理對甘薯糖蛋白SPG-1降膽固醇作用的影響

圖1　酸堿處理對甘薯糖蛋白SPG-1降膽固醇作用（ΔTC）的影響Fig.1 Effect of acid and alkali treatment on cholesterol lowering activity (ΔTC) of SPG-1

由圖1可知，甘薯糖蛋白SPG-1在其水溶液自然pH值（5.8）時，降膽固醇功能最好。在pH 3.5～7.5范圍內(nèi)，甘薯糖蛋白SPG-1的降膽固醇功能較好，且各組與自然pH值組相比差異不顯著（P＞0.05）。當pH＜3.5時，其降膽固醇活性顯著性（P＜0.05）降低。而pH＞7.5時，甘薯糖蛋白的降膽固醇活性與對照組相比極顯著性（P＜0.01）降低，這可能是甘薯糖蛋白在堿性溶液中容易發(fā)生異構(gòu)化、烯醇化和分解等反應[25]，破壞了甘薯糖蛋白分子的完整性，從而使其降膽固醇活性降低。因此對甘薯糖蛋白進行加工時，應考慮在適宜的pH值范圍內(nèi)進行，以保持其活性。

2.2.3 紫外光照射和微波處理對甘薯糖蛋白SPG-1降膽固醇作用的影響

表5　紫外光照射和微波處理對甘薯糖蛋白SPG-1降膽固醇作用（ΔTC）的影響Table 5 Effect of ultraviolet light and microwave treatment on cholesterol lowering activity (ΔTC) of SPG-1

由表5可知，紫外光照射對甘薯糖蛋白SPG-1的血清膽固醇下降率（ΔTC）影響較小，不同照射時間下ΔTC變化不顯著（P＞0.05）。但微波處理對ΔTC影響較大，隨著處理時間的延長，ΔTC明顯降低，照射60 s以上時，與對照組比較即有顯著性或極顯著性差異（P＜0.05或P＜0.01）。這說明與免疫調(diào)節(jié)作用相似，紫外光照射對甘薯糖蛋白SPG-1的降膽固醇作用影響較小，而微波處理影響較大。

3　結(jié) 論

當熱處理溫度超過70 ℃，pH＜3.5和＞7.5的酸堿處理以及微波處理，對甘薯糖蛋白的免疫調(diào)節(jié)作用影響較大，而在熱處理溫度低于70 ℃，酸堿范圍pH 3.5～7.5和紫外光照射條件下甘薯糖蛋白的免疫調(diào)節(jié)作用較穩(wěn)定。熱處理、酸堿處理、紫外光照射和微波處理對甘薯糖蛋白SPG-1的降膽固醇作用的影響與其對免疫調(diào)節(jié)作用的影響結(jié)果一致。在甘薯糖蛋白SPG-1加工處理過程中應盡量避免70 ℃以上的高溫，選擇合適的酸堿度范圍（pH 3.5～7.5），避免較長時間的微波處理。

參考文獻：

[1]BARNES S L, SANDERS S A. Advances in functional use of sweet potato, [Ipomoea batatas (L.) Lam][J]. Recent Patents on Food, Nutrition & Agriculture, 2012, 4(2): 148-154.

[2]GEYER H, GEYER R. Strategies for analysis of glycoprotein glycosylation[J]. Biochimica et Biophysica Acta: Proteins and Proteomics, 2006, 1764(12): 1853-1869.

[3]龔魁杰. 甘薯糖蛋白研究進展[J]. 食品科學, 2007, 28(6): 359-362.

[4]怡谷章夫, 上野川修一. 食品由采の免疫賦活物質(zhì)[J]. バイォサにケストリ, 1993, 51(9): 30-33.

[5]趙梅, 唐文婷, 于春娣. 甘薯糖蛋白的分離純化及其性質(zhì)研究[J]. 食品研究與開發(fā), 2008, 29(7): 49-51.

[6]李亞娜. 甘薯糖蛋白降血脂功能的研究[D]. 重慶: 西南大學, 2001: 14-21.

[7]師超, 何雅薔, 卞科. 黃肉甘薯糖蛋白提取工藝的研究[J]. 安徽農(nóng)學通報, 2013, 19(19): 119-121.

[8]闞建全. 甘薯糖蛋白的糖鏈結(jié)構(gòu)與保健功能研究[D]. 重慶: 西南大學, 2003: 87-174.

[9]孟憲軍, 包紅娜, 梁婧婧. 甘薯糖蛋白的氨基酸組成分析[J]. 食品工業(yè)科技, 2009, 30(8): 303-305.

[10]KUSANO S, ABE H, TAMURA H. Isolation of antidiabetic components from white-skinned sweet potato (Ipomoea batatas L.)[J]. Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry, 2001, 65(1): 109-114.

[11]梁婧婧, 蘇錫輝, 史鐵嘉, 等. 甘薯糖蛋白對高血脂大鼠體重及臟器指數(shù)的影響[J]. 食品研究與開發(fā), 2013, 34(3): 9-11.

[12]TSAI Shunjen, LIN Jinyuan. Purification and characterization of desmutagenic components extracted from sweet potato leaves[J]. Food Science and Agricultural Chemistry, 2001, l3(4): 132-138.

[13]MA Chunhui, YANG Lei, YANG Fengjian, et al. Content and color stability of anthocyanins isolated from Schisandra chinensis fruit[J]. International Journal of Molecular Sciences, 2012, 13(11): 14294-14310.

[14]PROVENZA F D, VILLALBA J J. The role of natural plant products in modulating the immune system: an adaptable approach for combating disease in grazing animals[J]. Small Ruminant Research, 2010, 89(2/3): 131-139.

[15]ZIEMSSEN T, ZIEMSSEN F. The role of the humoral immune system in multiple sclerosis (MS) and its animal model experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE)[J]. Autoimmunity Reviews, 2005, 4(7): 460-467.

[16]BOUME N, BRAVO F J, BEMSTEIN D I. Cyclic HPMPC is safe and effective against systemic guinea pig cytomegalovirus infection in immune compromised animals[J]. Antiviral Research, 2000, 47(2): 103-109.

[17]GUPTA A, GAUTAM M K, SINGH R K, et al. Immunomodulatory effect of Moringa oleifera Lam extract on cyclophosphamide induced toxicity in mice[J]. Indian Journal of Experimental Biology, 2010, 48(11): 1157-1160.

[18]姚肖華. 桑葚多糖對妊娠小鼠免疫功能的影響[J]. 營養(yǎng)學報, 2013, 35(5): 492-495.

[19]姜世勃. 改進的T淋巴細胞ANAE染色的復合對比染色法[J]. 中華醫(yī)學檢驗雜志, 1983, 6(4): 234-237.

[20]VARKI A. Biological roles of oligosaccharides: all theories are correct[J]. Glycobiology, 1993, 3(2): 97-130.

[21]徐學瑛, 李元. 一個改進的體液免疫測定方法: 溶血素測定法[J].藥學學報, 1979, 14(7): 443-445.

[22]LIU Xiong, OGAWA H, KISHIDA T, et al. The effect of highamylose cornstarch on lipid metabolism in OVX rats is affected by fructose feeding[J]. Journal of Nutritional Biochemistry, 2010, 21(2): 89-97.

[23]FARACH-CARSON M C, CARSON D D. Extraction and isolation of glycoproteins and proteoglycans[J]. Biotechniques, 1989, 7(5): 482-493.

[24]MAKINO Y, KURAYA N, OMICHI K, et al. Classification of sugar chains of glycoproteins by analyzing reducing end oligosaccharides obtained by partial acid hydrolysis[J]. Analytical Biochemistry, 1996, 238(1): 54-59.

[25]吳東儒. 糖類的生物化學[M]. 上海: 高等教育出版社, 1987: 307.

Effect of Processing on Immunoregulation and Cholesterol-Lowering Activity of Sweet Potato Glycoprotein

KAN Jianquan1, XIA Xuejuan1, LI Guannan2, WU Jinsong1, ZHENG Jiong1, CHEN Zongdao1
(1. Laboratory of Quality and Safety Risk Assessment for Agro-products on Storage and Preservation (Chongqing), Ministry of Agriculture, College of Food Science, Southwest University, Chongqing 400715, China; 2. College of Biotechnology, Southwest University, Chongqing 400715, China)

Abstract:Objective: To investigate the effect of different processing methods on immunoregulation and ch olesterollowering activity of sweet potato glycoprotein SPG-1. Methods: The influence of heat, acid-alkali, ultraviolet and microwave treatment on immunoregulatory activities, including macrophage phagocytic function, phagocytic function and serum hemolysin content, and cholesterol-lowering activity of SPG-1. Results: Heat and acid-alkali treatments were obviously affect the immunoregulation and cholesterol-lowering activity of SPG-1. The phagocytic index (k), acid α-naphthy acetate esterase (ANAE) positive rate, serum 50% hemolytic value (HC50) and serum cholesterol reduction rate (ΔTC) of SPG-1 were significantly decreased (P < 0.05 or P < 0.01) by heat (higher than 100 ℃), acid (pH smaller than 3.5) and alkali (pH above 7.5) treatments when compared with the control group. Ultraviolet treatment did not affect k value or ΔTC (P > 0.05), although resulting in a significant difference in both parameters compared with the control when conducted for more than 60 s (P < 0.05 or P < 0.01). Conclusion: SPG-1 should avoid heat treatment at high temperature (> 70 ℃) and long-time microwave treatment (> 60 s), and the appropriate pH range should be 3.5–7.5.Key words: sweet potato glycoprotein; processing; immunoregulation; cholesterol

中圖分類號：TS215

文獻標志碼：A

文章編號：1002-6630（2015）07-0194-06

doi:10.7506/spkx1002-6630-201507036

作者簡介：闞建全（1965—），男，教授，博士，研究方向為食品化學與營養(yǎng)學、食品生物技術。E-mail：ganjq1965@163.com

收稿日期：2014-06-15