李明梅,裘蘭蘭,王梅娟(.鹽城衛(wèi)生職業(yè)技術學院，江蘇鹽城 4005；.江蘇省鹽城市藥品檢驗所 400)

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·論 著·

近紅外光譜法快速檢測腎上腺色腙片品質的應用研究*

李明梅1,裘蘭蘭1,王梅娟2
(1.鹽城衛(wèi)生職業(yè)技術學院，江蘇鹽城 224005；2.江蘇省鹽城市藥品檢驗所 224002)

目的 建立腎上腺色腙片近紅外光譜技術的品牌判別模型，以打擊假冒偽劣品。方法 在Opus Setup Conformity Test模塊中，建模參數(shù)：波段：9 000～7 500、6 900～5 600、5 000～4 250/cm，一致性指數(shù)(CI)值為7，平滑點為13，預處理方法為二階導數(shù)+矢量歸一 。通過以上參數(shù)，數(shù)據(jù)前處理后建立近紅外一致性模型。結果 江蘇亞邦愛普森藥業(yè)有限公司的調入12張驗證腎上腺色腙片光譜均在CI值為7的限度范圍內,而2批假冒的藥品光譜均不在模型設定的 CI值范圍內。結論 該方法建立的品牌模型，能快速鑒別該品牌藥品的真?zhèn)?，并可應用于日常監(jiān)督中的藥品初篩，以提高抽樣命中率。

近紅外光譜法； 定性模型； 腎上腺色腙片

腎上腺色腙片是一種良好的止血藥物，該藥能夠有效提高毛細血管對病理損傷的免疫抵抗能力，適合應用于毛細血管損傷所引起的出血、血小板減少性紫癜等疾病。腎上腺色腙可作用于因為血管通透性增加、毛細血管受損所引起的出血癥狀，具有良好的療效，以其在出血方面的治療好且毒性低而得以廣泛應用。因此對其質量控制顯得尤為重要。在《衛(wèi)生部藥品標準》中指出化學藥品、制劑的檢驗標準，通過分光光度法對腎上腺色腙的濃度進行檢測，因為腎上腺色腙片的片型比較小，去糖衣的操作較為繁瑣，容易造成不可避免的損失，而且浪費時間。傳統(tǒng)的檢測方法操作周期長，過程復雜，不能作為快速檢測的方法。近紅外光譜指的是波長長度介于可見區(qū)與中紅外區(qū)之間的一種電磁波，波長范圍為780～2 525 nm。近紅外光譜獲得的信息通常是分子內部具有按集團震動的合頻、倍頻吸收，具有非常豐富的化學信息量。因為絕大部分有機物本身含有該類基團，所以近紅外光譜分析技術具有更加廣泛的應用前景。相比以往傳統(tǒng)的方法，近紅外光譜分析法具有快速、樣品預處理簡單、可多組分同時測定、環(huán)保、易于實現(xiàn)在線檢測等優(yōu)點[1-3]，已經(jīng)被廣泛應用于食品、農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥等多個領域中[4-8]。 本法能快速有效地控制腎上腺色腙片的質量。

1 材料與方法

1.1 儀器 儀器型號：Matrix-F型傅立葉變換近紅外光譜儀，儀器號分別為BRUKER Matrix-SFDA 10059563(鹽城)、BRUKER Matrix-SFDA 10059561(南通)、BRUKER Matrix-SFDA 10029302(泰州)。INGAAS檢測器、手拿光纖探頭(德國BRUKER 公司)。Agilent 高效液相色譜儀 (Opus 5.0光譜工作站,美國Agilent公司)。

1.2 樣品 江蘇亞邦愛普森藥業(yè)有限公司腎上腺色腙片一共12批，編號為1～12，批號分別為130101、130201、130215、130318、130319、130317、130311、130412、130413、130515、131213、131216。假冒的產(chǎn)品共有2個批次，編號13及14，批號為130321、120917。

1.3 方法

1.3.1 樣品的準備與制作工作 取本品6片(每批取6片)，用細砂紙打磨去糖衣至表面平滑，即得。

1.3.2 近紅外光譜的采集與處理 取上述1.3.1樣品制備的研究樣品進行光譜測定，測試條件：分辨率：8/cm；樣品累積掃描次數(shù)：32 Scans；背景累積掃描次數(shù)：32 Scans；光譜范圍：12 000～4 000/cm。光譜測定：每批次測定6張光譜，分別在3臺儀器上測定，共18張原始光譜。測試方式為：直接接觸測，環(huán)境條件為：溫度25 ℃，濕度45%。三波段(9 000～7 500、6 900～5 600、5 000～4 250/cm)一階導數(shù)化點平滑[3]。

1.3.3 樣品的鑒別 以11、13、14三個批號編號的樣品，根據(jù)國際標準的腎上腺色腙片鑒別項的方法[9]。(1)取本品5 mg，加醋酸2 mL溶解后，溶液應顯橙紅色，加鋅粉少許，顏色即消失。(2)取本品約1 mg，加水10 mL與三氯化鐵試劑數(shù)滴，溶液顯血紅色。(3)取本品約10 mg，加苯胺1 mL，小心加熱，煮沸時發(fā)生的氣體能使?jié)駶櫟募t色石蕊試紙變?yōu)樗{色。按上述3種鑒別方法檢查，其中編號為11的樣品鑒別呈正反，編號為13、14的樣品的鑒別均不呈正反。

1.3.4 建立一致性檢驗模型進行篩查 取江蘇亞邦愛普森藥業(yè)有限公司的12批腎上腺色腙片(編號1～12)的近紅外光譜圖作參考圖譜[3]，在Opus的一致性檢驗模型設置模塊，Opus Setup Conformity Test模塊中，建模參數(shù)為波段：9 000～7 500、6 900～5 600、5 000～4 250/cm，一致性指數(shù)(CI)值為7，平滑點為13，預處理方法為二階導數(shù)+矢量歸一 ，構建近紅外一致性檢驗的模型。同時，取江蘇亞邦愛譜森藥業(yè)有限公司的樣品正品，11、12兩種編號，假冒的編號13、14樣品，對模型進行驗證。

1.3.5 模型耐用性驗證 取在不同型號的3臺近紅外儀器上，在條件不同的情況下，驗證光譜為泰州近紅外光譜。在不同溫度、不同濕度、不同操作人員等條件下，對光譜進行測定，在CI限值之下進行計算。

2 結 果

2.1 正品、假冒品的近紅外光掃描譜圖的區(qū)別 樣品1～12的近紅外光譜波數(shù)范圍12 000～4 000/cm，運用OPUS軟件，對正品及假冒品進行對比分析，兩者間的曲線區(qū)別非常大，假冒品在8 010～6 050/cm。正品波數(shù)范圍在9 000～4 200/cm。把兩者的近紅外原始圖譜進行一階求導+矢量歸一。

2.2 一致性檢驗模型的篩查結果 從圖1上可看出，正品標樣的值在CI值為7的限值內，假冒樣品則不在CI值的限值范圍內。

圖1 一致性檢驗模型的檢驗結果

2.3 模型耐用性驗證 模型耐用性驗證結果，說明所建的近紅外一致性模型的耐用性很好，人為因素對于模型不會產(chǎn)生過大的影響。見圖2。

圖2 耐用性試驗CI示意圖

3 討 論

近紅外光譜技術是現(xiàn)代科技的一種高效、快速的分析技術，是綜合運用了化學計量學、光譜技術及計算機技術等多種學科的一項最新研究成果。由20世紀80年代開始，隨著化學計量學、計算機技術的不斷進步，近紅外光譜已經(jīng)在不同領域中廣泛應用。同時，該項技術已經(jīng)逐漸獲得了社會的普遍肯定、官方的認可。近紅外光譜分析技術最近幾年在藥品的快速鑒別上得以廣泛應用，例如石油化工、高分子、食品工業(yè)、制藥工業(yè)等領域，其具有操作方便、不需要預處理、無污染、分析成本較低、非破壞性、分析效率較高及分析速度快等多種優(yōu)點，具體內容如下：(1)分析速度快，光譜的測量過程通?？稍?～2 min內完成，利用建立的定標模型能夠快速檢測獲得樣品的化學成分、性質。(2)分辨率較高，利用1張光譜的測量與已經(jīng)建立的多個不同定標模型，能夠對樣品的各種成分、性質進行具體測定。(3)非破壞性分析技術，近紅外光譜檢測期間不會對樣品造成損傷，從外觀至內部均不會對樣品造成任何影響，鑒于這一特點此項技術在活體分析與藥物臨床應用領域均得到了廣泛的應用。(4)在樣品分析期間，不會對樣品本身產(chǎn)生消耗，不需要應用任何化學試劑，明顯減少了分析的成本費用，同時對環(huán)境不會產(chǎn)生任何污染，是一種非常綠色環(huán)保的分析技術。(5)樣品通常不需要預處理，操作非常簡便，因為近紅外光具有很強的穿透能力、散射效應，結合樣品的物態(tài)、透光能力的強弱，可適當選擇漫反射及透射測譜方式，利用相應的載樣器件能夠直接檢測膠狀類、半固體、固體及液體等不同物態(tài)的樣品。(6)測試重現(xiàn)性良好，因為近紅外光譜檢測的穩(wěn)定性較好，檢測結果幾乎不會受到人為因素的影響，相比參考或標準的方法，近紅外光譜通常可以體現(xiàn)更好的重現(xiàn)性。(7)有利于在線分析的實現(xiàn)，因為近紅外光譜在光纖中具有非常良好的傳輸特性，利用光纖能夠讓儀器遠離采樣現(xiàn)場，更適合應用于生產(chǎn)過程、危險、惡劣環(huán)境條件下的樣品分析，實現(xiàn)遠程監(jiān)控、在線分析[9]。本研究結果證明，此藥品構建的近紅外一致性模型可靠、具有專一性， 本研究建立的定性模型只適合江蘇亞邦愛普森藥業(yè)有限公司生產(chǎn)的腎上腺色腙片。此法易收集樣品的正品，可快速構建一致性近紅外模型，可對市場上出現(xiàn)的假冒藥品進行監(jiān)控。同時對生產(chǎn)企業(yè)的處方工藝具有監(jiān)督作用。假若讓此模型覆蓋其他廠家的產(chǎn)品，需要定期、定量收集各地廠家的樣品進行規(guī)模式的建模。

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Study on application of rapid detection for quality of Carbazochrome Tablets by near infrared spectroscopy*

LIMing-mei1,QIULan-lan1,WANGMei-juan2
(1.YanchengHealthVocationalandTechnicalCollege,Yancheng,Jiangsu224005,China;2.YanchengMunicipalInstituteforDrugControl,Yancheng,Jiangsu224002,China)

Objective To establish the brand discrimination model of near infrared technology for Carbazochrome Tablets in order to attack the counterfeit products.Methods In the module of Opus Setup Conformity Test,the model-building parameters: the waveband was at the 9 000-7 500,6 900-5 600 and 5 000-4 250/cm,the CI value was 7,the smooth point was 13,the pre-processing method was second derivative plus vector normalization.The near infrared consistency model was established after the data pretreatment through the above parameters.Results 12 pieces of spectrum for verifying Carbazochrome Tablets from Jiangsu Yabang Apusen Pharmaceutical Co.,Ltd.were all within the limitation range of CI value 7,while the spectrum of 2 batches of counterfeit product exceeded the CI limit.Conclusion The brand model established by this method can rapidly identify the authenticity of this brand of drug,and can be used for the preliminary screening of drugs in the daily surveillance work in order to increase the sampling hit rate.

near infrared spectroscopy; qualitative model; Carbazochrome Tablets

江蘇省鹽城市醫(yī)學科技發(fā)展計劃項目(YK2014059)。

李明梅，女，副教授，本科，主要從事化學分析和藥物分析的教學及研究工作。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.21.014

A

1672-9455(2015)21-3167-02

2015-01-25

2015-05-15)