張 揚,李 明,鄧 芳,陳少華,張家云(安徽省腫瘤醫(yī)院檢驗科,合肥 230031)

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·論 著·

非霍奇金淋巴瘤患者的乙型肝炎病毒感染率分析

張 揚,李 明,鄧 芳△,陳少華,張家云
(安徽省腫瘤醫(yī)院檢驗科,合肥 230031)

目的 探討非霍奇金淋巴瘤(NHL)患者中乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)的感染率。方法 統(tǒng)計2012年9月至2014年12月住院的201例NHL確診患者的乙肝5項標志物陽性率，并與388例同期住院的肺癌患者和325例體檢中心健康體檢者對比。 結果 201例NHL患者HBsAg陽性率和“小三陽”[HBsAg(+)、HBeAb(+)及HBcAb(+)]發(fā)生率分別為16.9%和14.9%，明顯高于肺癌患者(8.8%和8.2%)和健康體檢者(5.2%和4.6%)，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。NHL患者HBsAb陽性率為45.3%，明顯低于肺癌患者(57.2%)和健康體檢者(55.4%)，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。B細胞型NHL的HBsAg陽性率高于T細胞型NHL(P<0.05)，且HBsAb陽性率低于T細胞型NHL(P<0.05)，但性別、年齡的差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。59例NHL患者HBV DNA陽性率為27.1%，其中HBsAg陽性患者陽性率為47.1%，HBsAg(-)伴HBcAb(+)的25例患者中有1例(4.0%)HBV DNA陽性。 結論 NHL患者的HBV感染率高于肺癌患者和健康體檢人群，特別是B細胞型NHL患者。NHL與HBV感染存在一定相關性，不能忽視NHL患者HBV隱匿性感染的情況。

非霍奇金淋巴瘤； 乙型肝炎病毒； 隱匿性感染

乙型肝炎(簡稱乙肝)病毒(HBV)感染是原發(fā)性肝癌的主要病因之一，且與多種疾病的發(fā)生、發(fā)展有著重要的聯(lián)系。我國為HBV感染的高發(fā)地區(qū)，中國大陸人群流行病學調(diào)查顯示一般人群中HBsAg陽性率為7.2%[1]。近年來國外研究者發(fā)現(xiàn)惡性淋巴瘤患者中HBV感染率相對較高[2]，惡性淋巴瘤發(fā)病率呈逐年遞增趨勢，現(xiàn)已成為我國常見惡性腫瘤的第8位，非霍奇金淋巴瘤(NHL)占惡性淋巴瘤的85%～90%，其與HBV感染之間的關系逐漸成為研究熱點。有文獻報道淋巴瘤化療方案使HBV感染的NHL患者存在HBV再激活的風險，導致肝功能受損，嚴重者甚至會發(fā)生暴發(fā)性肝炎[3]。本研究分析了201例NHL患者乙肝血清學標志物結果，以探討HBV感染與NHL之間的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2012年9月至2014年12月在安徽省腫瘤醫(yī)院住院治療的NHL患者201例，均經(jīng)過病理確診為NHL。201例NHL患者中男115例，女86例；平均年齡為(52.1±17.0)歲，其中小于20歲12例、20～39歲34例、40～59歲77例、60～79歲73例、≥80歲5例；病理類型包括B細胞型134例、T細胞型67例。同時抽取同期住院的388例肺癌患者(從除原發(fā)性肝癌外的實體瘤中隨機選取)及325例健康體檢者的乙肝5項結果作為對照。肺癌患者組中男205例、女183例，平均年齡為(61.5±10.3)歲。健康體檢者中男177例、女148例，平均年齡為(46.4±10.3)歲。3組研究對象性別、年齡組成差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 儀器與試劑 乙肝5項采用Roche Cobas e601全自動免疫分析儀定量檢測，試劑由德國羅氏診斷產(chǎn)品有限公司提供。HBV DNA載量采用實時熒光定量PCR方法檢測，使用Roche Light Cycler 480擴增儀，試劑盒由艾康生物技術有限公司提供。嚴格按照試劑及儀器說明書操作。

1.3 研究方法 HBV標志物[乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗體(HBsAb)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝e抗體(HBeAb)、乙肝核心抗體(HBcAb)]采用Roche Cobas e601全自動免疫分析儀定量檢測。采集靜脈血3 mL用于HBV DNA載量檢測，4 000 r/min離心5 min，取50 μL血清加入50 μL核酸提取液，混勻后2 000 r/min離心10 s后100 ℃干浴10 min，12 000 r/min離心10 min，取上清液作為DNA模板供PCR擴增用。PCR反應體系：35.6 μL mix 反應混合液+0.4 μL Taq酶+4 μL DNA模板；PCR反應條件：95 ℃ 5 min →(94 ℃ 15 s → 60 ℃ 30 s，共40個循環(huán))，按照試劑說明書明確的Ct≤37、增長曲線呈S型曲線，≥1 000 copy/mL為陽性判斷標準。

1.4 統(tǒng)計學處理 利用SPSS16.0軟件進行統(tǒng)計學分析，計數(shù)資料以率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 NHL患者的HBV感染率分析 見表1。NHL患者HBsAg陽性率明顯高于肺癌患者和健康體檢者(P<0.05)，HBsAb陽性率明顯低于肺癌患者和健康體檢者(P<0.05)，NHL患者HBeAb和HBcAb陽性率明顯高于健康體檢者。

2.2 NHL患者HBV標志物共同表達情況 本研究中NHL患者、肺癌患者和健康體檢者的“小三陽”[HBsAg(+)、HBeAb(+)及HBcAb(+)]發(fā)生率、HBsAb(+)且HBcAb(+)發(fā)生率和HBsAg(-)伴HBcAb(+)發(fā)生率的差異有統(tǒng)計學意義，見表2。NHL患者“小三陽”發(fā)生率明顯高于肺癌患者和健康體檢者，HBsAb(+)且HBcAb(+)發(fā)生率和HBsAg(-)伴HBcAb(+)發(fā)生率明顯高于健康體檢者。

2.3 NHL患者合并HBV感染的臨床特征比較 見表3。(1)不同病理型：B細胞型NHL患者的HBsAg陽性率明顯高于T細胞型NHL患者，B細胞型NHL患者的HBsAb陽性率明顯低于T細胞型NHL患者。(2)不同性別：男性和女性NHL患者的HBsAg、HBsAb、HBeAb和HBcAb陽性率差異均無統(tǒng)計學意義。(3)不同年齡：將患者分為小于20歲、20～39歲、40～59歲、60～79歲、≥80歲共5個組。5個組患者的HBsAg、HBsAb、HBeAb和HBcAb陽性率差異均無統(tǒng)計學意義。

2.4 NHL患者HBV病毒載量分析 共檢測59例NHL患者的HBV DNA載量，HBV DNA陽性率為27.1%(16/59)，其中HBsAg陽性患者的陽性率為47.1%(16/34)，HBsAg(-)伴HBcAb(+)的患者HBV DNA陽性率為4.0%(1/25)。

表1 NHL患者、肺癌及體檢人群乙型肝炎標志物陽性率比較[n(%)]

注：與NHL患者相比，*P<0.05。

表2 NHL患者、肺癌及體檢人群乙型肝炎標志物共同表達情況比較[n(%)]

注：與NHL患者相比，*P<0.05。

表3 NHL患者乙型肝炎標志物陽性率臨床特征比較[n(%)]

3 討 論

許多惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與病毒的慢性感染存在非常重要的關系，如原發(fā)性肝癌與HBV、宮頸癌與人乳頭瘤病毒(HPV)、鼻咽癌與EB病毒(EBV)等。NHL與丙型肝炎病毒(HCV)的關系較為明確[4]，而與HBV之間的因果關系尚無統(tǒng)一定論[5-6]。HBV病毒具有嗜肝和嗜淋巴細胞的特性，NHL患者HBV感染率明顯高于原發(fā)性肝癌之外的實體瘤患者和普通人群[7]。

本研究中NHL患者的HBsAg陽性率和“小三陽”[HBsAg(+)、HBeAb(+)及HBcAb(+)]發(fā)生率分別為16.9%和14.9%,明顯高于肺癌患者和健康體檢者，其中B細胞型患者的HBsAg陽性率明顯高于T細胞型(22.4%vs.6.0%)，可以推測HBV感染可能在NHL患者中尤其是B細胞型患者的發(fā)病機制中起到一定作用。目前報道的關于HBV感染NHL患者的性別差異結果并不一致，有研究認為女性較高[8]，也有研究認為男性偏高[9]，本研究中NHL患者不同性別HBV感染的發(fā)生率差異并無統(tǒng)計學意義，可能與樣本量較少及不同地區(qū)的人群有關。

HBsAb是一種保護性抗體，曾感染過HBV而產(chǎn)生抗體或接種HBV疫苗后產(chǎn)生免疫力都可使HBsAb陽性。有研究發(fā)現(xiàn)HBsAb(+)的NHL患者無一例發(fā)生HBV再激活，可能與HBsAb通過體液免疫方式減少HBV感染機會從而減少NHL發(fā)生有關[10]。本研究中NHL患者的HBsAb陽性率為45.3%，明顯低于肺癌患者和健康體檢者，而其中T細胞型明顯高于B細胞型(58.2%vs.38.8%)，提示HBV陽性的患者可能因為缺乏HBsAb的保護而免疫力減弱，以致于更容易罹患NHL。

“大三陽”[HBsAg(+)、HBeAg(+)及HBcAb(+)]和“小三陽”[HBsAg(+)、HBeAb(+)及HBcAb(+)]通常提示HBV的慢性感染，而HBsAg(-)伴HBcAb(+)則提示了HBV的隱匿性感染。若患者病毒滴度較低或是急性感染窗口期時，HBsAg可能檢測不出，但可以檢測出HBcAb，其是HBV感染后血清中最早出現(xiàn)的標志性抗體，且持續(xù)時間較長。HBsAg(-)伴HBcAb(+)的HBV隱匿性感染在NHL患者中發(fā)生率較高[11]，本研究中隱匿性感染[HBsAg(-)HBcAb(+)]發(fā)生率約為12.4%，高于健康體檢者。HBV DNA載量主要反映了HBV復制的活躍程度，Chen等[12]發(fā)現(xiàn)隱匿性感染的NHL患者HBV DNA陽性率為6.0%，明顯高于其他腫瘤患者和健康人群(分別為0.0%和0.9%)。本研究25例隱匿性感染的NHL患者中HBV DNA陽性率為4.0%，因此NHL患者中HBV隱匿性感染的現(xiàn)狀應引起足夠重視。

NHL患者多存在細胞免疫功能抑制，以聯(lián)合化療或免疫化療為主的治療方案會進一步抑制免疫功能，因此NHL合并HBV的患者在化療后容易發(fā)生強烈的免疫功能抑制，引起HBV再燃從而造成肝功能的嚴重損害，甚至導致暴發(fā)性肝炎而死亡[13]。因此建議在免疫化療之前常規(guī)檢測HBV DNA，及時發(fā)現(xiàn)HBV感染者和攜帶者，早期應用抗HBV治療更有效果，治療期間應嚴密監(jiān)測病毒復制及肝功能變化情況，將更有利于降低NHL治療過程中HBV再燃的風險。

綜上所述，本研究反映了NHL與HBV存在一定相關性，但不能反映NHL和HBV之間的因果關系。HBV是NHL致病因素之一還是因為NHL患者免疫力低下易感染HBV，兩者之間的因果關系尚需要進一步研究。本研究因樣本量較少，可能存在資料偏倚、未能反映HBeAg差異等不足，后續(xù)研究將進一步探究HBV感染在NHL發(fā)生、發(fā)展過程中所起的作用。

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Analysis on hepatitis B virus infection rate in patients with non-Hodgkin lymphoma

ZHANGYang,LIMing,DENGFang△,CHENShao-hua,ZHANGJia-yun
(DepartmentofClinicalLaboratory,AnhuiProvincialTumorHospital,Hefei,Anhui230031,China)

Objective To investigate the hepatitis B virus(HBV) infection rate in the patients with non-Hodgkin lymphoma(NHL).Methods The positive rates of HBV 5 markers in 201 patients with NHL admitted to our hospital from September 2012 to December 2014 were performed the statistics and compared with those in 388 contemporaneous inpatients with lung cancer and 325 healthy persons undergoing the physical examination in the physical examination center.Results The HBsAg-positive rate and the simultaneously positive rate of HBsAg,HBeAb and HBcAb in 201 cases of NHL were 16.9% and 14.9% respectively,which were higher than those in the lung cancer patients(8.8% and 8.2%) and healthy persons undergoing the physical examination(5.2% and 4.6%),the differences were statistically significant(P<0.05).The positive rate of anti-HBsAb was 45.3% in the NHL patients,which was significantly lower than 57.2% in the lung cancer patients and 55.4% in healthy persons,the differences were statistically significant(P<0.05).Compared with the T-cell NHL,the B-cell NHL had significantly higher positive rate of HBsAg and lower positive rate of HBsAb,but there were no statistically significant differences in sex and age(P>0.05).The HBV DNA positive rate was 27.1% in 59 cases of NHL,and was 47.1% in 34 cases of HBsAg-positive NHL,while 1 case(4.0%) in 25 cases of HBsAg-negative and HBcAb-positive NHL.Conclusion The infection rate of HBV in NHL patients is significantly higher than that in the lung cancer patients and healthy persons,especially in the B-cell NHL.There is a certain correlation between NHL and HBV infection,and the occult HBV infection in NHL patients can not be ignored.

non-Hodgkin lymphoma; hepatitis B virus; occult infection

張揚,女,醫(yī)師,碩士,主要從事腫瘤分子診斷及個體化檢測?！?/p>

,E-mail:dengfanger@sina.com。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.22.021

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1672-9455(2015)22-3348-03

2015-04-16

2015-09-02)