葉桂樣,黃瑞勛,卓雪芽,陳玉禎,黃 艷(廣東省佛山市中醫(yī)院 528000)

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·論 著·

干片式生化儀校準(zhǔn)品基質(zhì)效應(yīng)研究*

葉桂樣,黃瑞勛,卓雪芽,陳玉禎,黃 艷
(廣東省佛山市中醫(yī)院 528000)

目的 評(píng)估強(qiáng)生VITROS FUSION 5.1全自動(dòng)干片式生化儀校準(zhǔn)品(KIT1：LOT0112；KIT3:LOT0322)兩個(gè)校準(zhǔn)包的基質(zhì)效應(yīng)。方法 以O(shè)lympus AU 5400全自動(dòng)生化分析儀為參比系統(tǒng)，VITROS FUSION 5.1干化學(xué)分析儀為待評(píng)估系統(tǒng)，參照CLSI EP14-A2文件對(duì)KIT1及KIT3校準(zhǔn)包每個(gè)校準(zhǔn)包3個(gè)水平隨機(jī)排列在20份新鮮的患者標(biāo)本之中，用待評(píng)估系統(tǒng)和參比系統(tǒng)分別對(duì)患者標(biāo)本、KIT1進(jìn)行血糖(GLU)、尿素(UREA)、肌酐(CR)、尿酸(UA)測(cè)定，對(duì)KIT3校準(zhǔn)包進(jìn)行天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶(CK)測(cè)定。結(jié)果 KIT1校準(zhǔn)包中GLU、CR相對(duì)于參比系統(tǒng)不存在基質(zhì)效應(yīng)，其他項(xiàng)目至少有一個(gè)水平存在基質(zhì)效應(yīng)，KIT3校準(zhǔn)包中所有項(xiàng)目至少有一個(gè)水平存在基質(zhì)效應(yīng)。結(jié)論 在日常檢測(cè)中由儀器校準(zhǔn)品基質(zhì)效應(yīng)造成不同系統(tǒng)間結(jié)果的差異是不能忽視的，應(yīng)盡量減少基質(zhì)效應(yīng)帶來的影響。通過定期開展不同儀器間比對(duì)是減少其影響的手段之一，也是實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化過程中不可或缺的一部分。

基質(zhì)效應(yīng)； 校準(zhǔn)品； 干片式生化分析儀

干化學(xué)分析是相對(duì)傳統(tǒng)濕化學(xué)分析而言的，即將所需分析試劑全部固化在多層復(fù)合膜上，分析時(shí)只需將少量待檢樣品加在膜上即可進(jìn)行定性或定量分析，由于其具有優(yōu)異的抗干擾能力，操作簡(jiǎn)便,可滿足急診標(biāo)本檢測(cè)，因此干片式全自動(dòng)生化分析儀普遍存在于各大醫(yī)院檢驗(yàn)科，而本科室所用的強(qiáng)生VITROS FUSION 5.1全自動(dòng)干片式生化儀便是其中的代表機(jī)型。但由于方法學(xué)差異導(dǎo)致所測(cè)急診項(xiàng)目結(jié)果與傳統(tǒng)水化學(xué)測(cè)定的結(jié)果產(chǎn)生差異，究其原因，校準(zhǔn)品的基質(zhì)效應(yīng)是不可忽視的一環(huán)，盡管強(qiáng)生VITROS FUSION 5.1是一個(gè)全封閉系統(tǒng)，具有良好的溯源性，但其校準(zhǔn)品為粉劑非新鮮血清，校準(zhǔn)前需用配套溶劑溶解，因此基質(zhì)效應(yīng)是不可避免的。本課題以O(shè)lympus AU5400全自動(dòng)生化分析儀為參比系統(tǒng)，參照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)文件EP14-A2[1]對(duì)強(qiáng)生VITROS FUSION 5.1全自動(dòng)干片式生化儀急診項(xiàng)目血糖(GLU)、尿素(UREA)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶(CK) 校準(zhǔn)品的基質(zhì)效應(yīng)進(jìn)行了研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 取40份新鮮標(biāo)本血清，來自測(cè)試當(dāng)天在本院住院的患者，標(biāo)本選擇應(yīng)標(biāo)本選擇應(yīng)涵蓋高、中、低水平，在空腹情況下用真空采血管抽取靜脈血5 mL，2 h內(nèi)分離出血清，4 h內(nèi)進(jìn)行測(cè)定。

1.2 方法

1.2.1 儀器與試劑 以O(shè)lympus AU5400全自動(dòng)生化儀參比系統(tǒng)，AST、LDH、CK、GLU、UREA、Cr、UA試劑及配套校準(zhǔn)品均購(gòu)自上海華臣生物科技有限公司。

1.2.2 待評(píng)系統(tǒng) 以強(qiáng)生VITROS FUSION 5.1全自動(dòng)干片式生化儀待評(píng)系統(tǒng)，AST、LDH、CK、GLU、UREA、Cr、UA試劑包和校準(zhǔn)包購(gòu)自美國(guó)強(qiáng)生公司，其中GLU、UREA、Cr、UA校準(zhǔn)包為KIT1批號(hào)為0112；AST、LDH、CK校準(zhǔn)包為KIT3，批號(hào)為0322，各定標(biāo)包分高、中、低3個(gè)水平。

1.3 方法

1.3.1 對(duì)Olympus AU5400全自動(dòng)生化儀和強(qiáng)生VITROS FUSION 5.1全自動(dòng)干片式生化儀按照操作規(guī)程進(jìn)行操作、常規(guī)的檢查及維護(hù)，使兩者處于最佳的工作狀態(tài)，根據(jù)CLSI EP9-A2[2]文件或EP15-A2[3]確保在這兩臺(tái)儀器上測(cè)得的結(jié)果具可比性。

1.3.2 按照CLSI EP14-A2文件，將KIT1校準(zhǔn)包高、中、低3個(gè)水平的校準(zhǔn)品各1份隨機(jī)排列在20份新鮮的患者標(biāo)本中，用VITRO FUSION5.1 全自動(dòng)干生化分析儀對(duì)此23份標(biāo)本作GLU、UREA、Cr、UA重復(fù)3次測(cè)定，每個(gè)標(biāo)本共得到3個(gè)結(jié)果。然后再用Olympus AU5400全自動(dòng)生化分析儀對(duì)此23份標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，步驟同上。同理，將KIT3校準(zhǔn)包高、中、低3個(gè)水平的校準(zhǔn)品各1份隨機(jī)排列在20份新鮮的患者標(biāo)本中，用VITRO FUSION5.1 全自動(dòng)干生化分析儀對(duì)此23份標(biāo)本作AST、LDH、CK重復(fù)3次測(cè)定，每個(gè)標(biāo)本共得到3個(gè)結(jié)果，然后再用Olympus AU5400全自動(dòng)生化分析儀對(duì)此23份標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)，步驟同上。

2 結(jié) 果

GLU、UREA、Cr、UA95%預(yù)期區(qū)間見表1，各項(xiàng)目雙側(cè)95%預(yù)測(cè)范圍曲線見圖1～4；AST、LDH、CK95%預(yù)期范圍見表2，各項(xiàng)目雙側(cè)95%預(yù)測(cè)范圍曲線見圖5～7。

表1 KIT1校準(zhǔn)包各項(xiàng)目95%預(yù)期區(qū)間

圖1 GLU基質(zhì)效應(yīng)評(píng)價(jià)圖

圖2 Cr基質(zhì)效應(yīng)評(píng)價(jià)圖

圖3 UA基質(zhì)效應(yīng)評(píng)價(jià)圖

圖4 UREA基質(zhì)效應(yīng)評(píng)價(jià)圖

圖5 AST基質(zhì)效應(yīng)評(píng)價(jià)圖

續(xù)表2 KIT3校準(zhǔn)包各項(xiàng)目95%預(yù)期范圍(U/L)

圖6 CK基質(zhì)效應(yīng)評(píng)價(jià)圖

圖7 LDH基質(zhì)效應(yīng)評(píng)價(jià)圖

3 討 論

基質(zhì)效應(yīng)早期是在酶活力測(cè)定中用人工制備的參考物質(zhì)時(shí)發(fā)現(xiàn)的，是指檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)樣品中的分析物時(shí)，處于分析物周圍的所有非分析物質(zhì)對(duì)分析物參與反應(yīng)的影響。按照CLSI文件EP14-A2定義的基質(zhì)效應(yīng)，是指：(1)標(biāo)本中除分析物以外的其他成分對(duì)分析物測(cè)定值的影響；(2)基質(zhì)對(duì)分析方法準(zhǔn)確測(cè)定分析物的能力的干擾。產(chǎn)生基質(zhì)效應(yīng)的原因與以下4個(gè)主要因素的相互作用密切相關(guān)：儀器的設(shè)計(jì)、試劑的組成成分、測(cè)試方法的原理、質(zhì)控材料的組成及處理技術(shù)等，可見基質(zhì)效應(yīng)在酶法分析及免疫化學(xué)分析中普遍存在，其對(duì)測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確性的影響是不能忽視的，而且越來越受到人們的重視[4-9]。一般認(rèn)為新鮮患者標(biāo)本不存在基質(zhì)效應(yīng)，但校準(zhǔn)品、室內(nèi)質(zhì)控品和室間質(zhì)評(píng)品在制造過程中其理化性質(zhì)發(fā)生改變，其基體與人源性的血清不同，在檢測(cè)中產(chǎn)生的基質(zhì)效應(yīng)是客觀存在的。有人曾對(duì)室內(nèi)質(zhì)控品在VITROFUSION5.1 全自動(dòng)干生化分析儀上的基質(zhì)效應(yīng)作過報(bào)道[10]，但是由于干化學(xué)系統(tǒng)使用配套試劑、校準(zhǔn)物、質(zhì)控物均形成一個(gè)完整的檢測(cè)系統(tǒng)，具有較好的量值溯源性能，其校準(zhǔn)品產(chǎn)生的基質(zhì)效應(yīng)鮮有報(bào)道，而本研究恰好填補(bǔ)這方面的空白。本研究顯示，KIT1校準(zhǔn)包中GLU、CR這兩個(gè)項(xiàng)目相對(duì)于參比系統(tǒng)AU5400不存在基質(zhì)效應(yīng)影響，并不是說沒有基質(zhì)效應(yīng)，而是基質(zhì)效應(yīng)給GLU、CR這兩個(gè)項(xiàng)目帶來的差異剛好落在95%預(yù)測(cè)區(qū)間曲線內(nèi)，根據(jù)EP14-A2的要求，可以認(rèn)為基質(zhì)效應(yīng)給GLU、CR這兩個(gè)項(xiàng)目在干化學(xué)與水化學(xué)兩個(gè)系統(tǒng)間造成的結(jié)果差異可以忽略，但是KIT1校準(zhǔn)包中的其余項(xiàng)目UREA、UA和KIT3校準(zhǔn)包中的項(xiàng)目AST、CK、LDH都存在著一個(gè)或兩個(gè)水平的基質(zhì)效應(yīng)影響，提示對(duì)應(yīng)某個(gè)水平上的基質(zhì)效應(yīng)影響是不能忽略的，檢驗(yàn)人員在日常檢測(cè)工作中就要引起注意，當(dāng)然除了校準(zhǔn)品的基質(zhì)效應(yīng)外，還有質(zhì)控品、試劑、操作人員等因素造成這兩個(gè)系統(tǒng)間的結(jié)果差異。然而由校準(zhǔn)品基質(zhì)效應(yīng)帶來的差異卻是方法間差異的根本原因，要減少校準(zhǔn)品基質(zhì)效應(yīng)帶來的影響，通過定期開展不同儀器間比對(duì)是減少其影響的手段之一，也是實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化過程中不可或缺的一部分。

[1]CLSI.EP14-A2.Evaluationofmatrixeffects;approvedguideline[S].Wayne,PA,USA:CLSI，2008.

[2]CLSI.EP9-A2.Methodcomparisonandbiasestimationusingpatientsamples;approvedguideline[S].2nd,ed.Wayne,PA,USA:CLSI,2008.

[3]CLSI.EP15-A2.Userdemonstrationofperformanceforprecisionandaccuracy;approvedguideline[S].Wayne,PA,USA:CLSI,2008.

[4]張傳寶,陳忠余,馬嶸,等.血清肌酐測(cè)定基質(zhì)效應(yīng)的研究[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2009,32(5):515-520.

[5]周偉燕,趙海艦,張江濤,等.血清總甘油測(cè)定基質(zhì)效應(yīng)的研究[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2008,31(5):568-573.

[6]鄒榮良.基質(zhì)效應(yīng)在臨床化學(xué)檢測(cè)中的影響研究[J].中國(guó)誤診學(xué)雜志,2009,9(34):8391-8392.

[7]鄭松柏,王建兵,黃憲章,等.血清ALT與AST測(cè)定的基質(zhì)效應(yīng)評(píng)價(jià)[J].臨床檢驗(yàn)雜志,2011,29(5):391-393.

[8]張興宗,林云,張清文,等.臨床化學(xué)室間質(zhì)評(píng)不滿意結(jié)果項(xiàng)目分析處理的重要性[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2012,9(8):943-945.

[9]蘇武錦,張翙,黃廣.肝素和EDTA-K2抗凝劑引入基質(zhì)效應(yīng)的評(píng)價(jià)及分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2013,10(16):2124-2126.

[10]葉桂樣,黃瑞勛,黃艷.日常室內(nèi)質(zhì)控品在干片式生化分析儀上的基質(zhì)效應(yīng)分析[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2013,34(15):2012-2013.

Study on matrix effect of calibrator of dry type biochemical analyzer*

YEGui-yang,HUANGRui-xun,ZHUOXue-ya,CHENYu-zhen,HUANGYan
(FoshanMunicipalHospitalofChineseTraditionalMedicine,Foshan,Guangdong528000,China)

Objective To evaluate the matrix effect of the calibration packages of calibrator KIT1:LOT 0112 and KIT3:LOT 0322 for the Johnson VITROS FUSION 5.1 automatic dry chip analyzer.Methods Using the Olympus AU5400 automatic biochemistry analyzer as the reference system,and the VITROS FUSION 5.1 dry type chemical analyzer as the undetermined evaluation system,referring to the NCCLS EP14-A2 files,three levels for each package in the calibration packages of KIT1 and KIT3 were randomly arranged in 20 fresh patient samples,GLU,UREA,Cr and UA were detected for the calibrator KIT1 and AST,LDH and CK were detected for the calibrator KIT3 by the reference system and undetermined evaluation system.Results Compared with the reference system,GLU and CR in the KIT1 calibration package had no matrix effects and other items had at least a level with the presence of matrix effects and among all items in KIT3 calibration package at least a level had the presence of matrix effect.Conclusion In daily detection,the difference between the results of different systems caused by the matrix effect of the instrument calibrator can not be ignored.Therefore the effect of matrix effect should be reduced as far as possible.Launching the comparison among different instruments at regular intervals is one of reducing its influence,and also an indispensable part of laboratory standardization.

matrix effects; calibration material; dry type chemical analyzer

廣東省佛山市衛(wèi)生局醫(yī)學(xué)科研立項(xiàng)課題(2013149)。

葉桂樣，男，主管檢驗(yàn)技師，本科，主要從事臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)工作。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.22.014

A

1672-9455(2015)22-3329-03

2015-06-05

2015-09-11)