廉奇鑫，蘇俊強，周 昱

(佳木斯大學附屬第一醫(yī)院腫瘤外科，黑龍江 佳木斯 154003)

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FBXW7和SRC-3在乳腺癌中的表達及臨床意義①

廉奇鑫，蘇俊強，周 昱

(佳木斯大學附屬第一醫(yī)院腫瘤外科，黑龍江 佳木斯 154003)

目的：探索F-BOX家族F框/WD-40域蛋白7(FBXW7)、類固醇受體輔助活化因子3(SRC-3)在乳腺癌中是否表達及期在臨床中意義。方法 用免疫組織化學法檢測FBXW7、SRC-3在乳腺癌及正常乳腺組織中是否有表達。結(jié)果：FBXW7在乳腺癌的表達率是64.00%、FBXW7在正常乳腺組織中的表達率是86.00%，乳腺癌與癌旁乳腺有差異且有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，而且與乳腺癌臨床分期，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)；SRC-3在乳腺癌中的表達為70.00%、SRC-3在正常乳腺組織中的表達為52.00%，乳腺癌與癌旁乳腺有差異且有統(tǒng)計學意義差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)同時與乳腺癌臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)；FBXW7與SRC-3之間存在負相關(guān)關(guān)系(r=-0.5856，P<0.01)。結(jié)論：FBXW7表達水平的下降和SRC表達水平的增高在乳腺癌的發(fā)展進程中都發(fā)揮了重要作用。聯(lián)合檢測FBXW7、SRC-3兩因子將有助于提前預(yù)測乳腺癌進展和轉(zhuǎn)移情況,它們還可能為乳腺癌的三級預(yù)防及找尋癌癥分子靶向治療的新靶點提供重要的參考價值。

乳腺癌；F-BOX家族-7(FBXW7)；類固醇受體輔助活化因子3(SRC-3)；免疫組織化學

現(xiàn)如今，在全球范圍內(nèi)，乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一[1]，我國以及西方國家的女性在全球范圍內(nèi)患上乳腺惡性腫瘤的數(shù)量位居榜首。中國大量的數(shù)據(jù)研究指出，近些年來，中國女性的乳腺癌的發(fā)病率和死亡數(shù)量開始增多，而患者的年齡甚至有逐漸趨小的勢頭，乳腺癌的產(chǎn)生以及變化與各個方面因素有關(guān)，結(jié)構(gòu)尚不明確。癌基因的激活、抑癌基因。失活在乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展中起著重要的作用。F框/WD-40域蛋白(F-box/WDrepeat-containingprotein7，F(xiàn)BXW7)是F-box蛋白家族成員，其又稱為(CDC4、FBW7、hCDC、AGO、SEL10，是泛素SCF連接酶的靶蛋白識別組分[2]。最近幾年研究表明，F(xiàn)BXW7是一種抑癌因子，在宮頸癌，胃癌，直腸癌中都發(fā)現(xiàn)了FBXW7的缺失和突變。細胞核激素受體共激活劑P160包含類固醇受體輔助活化因子3(steroidreceptor-coaetivator-3，SRC-3)，是p160類固醇受體輔助活化因子SRC基因家族成員，在確定20q12[3]為Anzick的方向以及研究基因擴增情況的結(jié)果表明，又名AIB-1、ACTR、TRAM1、NCoA3、RAC-3，以及P/CIP[4]。SRC-3為新定義的原癌基因，其蛋白在多種腫瘤中高表達，在多種腫瘤中發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。本課題研究通過免疫組化方法測驗50例乳腺癌、50例癌旁正常組織中FBXW7、SRC-3兩因子的表達情況，并探索其臨床意義和FBXW7與SRC-3在乳腺中是否有關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 標本來源

在佳木斯大學附屬第一醫(yī)院病理科提取2013-07～2014-11 50例乳腺癌組織及癌旁正常乳腺組織。術(shù)前均未行放、化療及生物靶向治療等手段，術(shù)后病理診斷明確，上述標本均常規(guī)制作石蠟包埋切片，切片厚4um。根據(jù)國際抗癌聯(lián)盟(UICC)TNM[5]分期 Ⅰ-Ⅱ期23例、Ⅲ-Ⅳ期27例。癌旁正常組織標本50例，取腫瘤周圍大小5cm的正常組織。

1.2 主要試劑

FBXW7兔抗單克隆抗體SRC-3兔抗單克隆抗體都由北京博奧森生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品生產(chǎn)，通用Elivision法試劑盒以及DAB顯色試劑都是從北京中衫金橋生物技術(shù)有限公司買入。

1.3 免疫組化

通過免疫組化方法(Elivision法)探索FBXW7、SRC-3在乳腺癌及正常癌旁組織中的表達情況。

1.4 統(tǒng)計學方法

采用SPSS19.0軟件包。兩組織中FBXW7與SRC-3表達比較情況，用卡方檢驗，乳腺癌組織中FBXW7、SRC-3表達情況，兩因子與各因素相關(guān)性采用秩相關(guān)；均以α=0.05作為檢驗水準，P<0.05差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1FBXW7、SRC-3在乳腺中的表達

見表1。FBXW7與SRC-3在乳腺癌、乳腺正常組織中有表達、乳腺癌組織和癌旁組織中，前者的表現(xiàn)比較差異有統(tǒng)計學意義(χ2=6.8815，P<0.05)，乳腺癌組織的FBXW7表達結(jié)果為64%而癌旁組織為86%，明顯后者居上，為低表達。

表1 乳腺癌組織和癌旁組織中FBXW7和SRC-3表達

指 標-+陽性率(%)FBXW7乳腺癌組織181211964.00癌旁組織710191486.00SRC-3乳腺癌組織157111770.00癌旁組織241211352.00

P<0.01

癌旁組織區(qū)域和癌旁組織里SRC-3比較差異有統(tǒng)計學意義(χ2=9.9868，P<0.05)，通過對表1的觀察得出，乳腺癌組織里的SRC-3表現(xiàn)結(jié)果為百分之七十，癌旁組織表現(xiàn)結(jié)果為百分之五十二，明前者高于后者，為高表達。

2.2 乳腺癌組織中FBWX7、SRC-3的表達的臨床病理特征的關(guān)系

如表2所示，F(xiàn)BWX7與乳腺癌的分化程度(χ2=0.3968、P<0.01)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況(χ2=-0.3051、P<0.05)和臨床分期(χ2=-0.3638、P<0.01)相關(guān)，而與年齡、絕經(jīng)情況、病理類型無關(guān)(P>0.05)。SRC-3與乳腺癌分化程度(χ2=-0.7435、P<0.01)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況(χ2=0.6955、P<0.01)、和臨床分期(χ2=0.7305、P<0.01)相關(guān)，而與年齡、絕經(jīng)情況、病理類型無關(guān)(P>0.05)。

表2 FBWX7、SRC-3在乳腺癌不同臨床病理特征中的表達

2.3 乳腺癌組織和癌旁組織中FBXW7和SRC-3表達相關(guān)性

乳腺癌組織中FBXW7低表達、SRC-3高表達，兩者呈負相關(guān)(P<0.05)，其相關(guān)系數(shù)rs=-0.5856；癌旁正常組織中FBXW7高表達、SRC-3低表達，兩者呈負相關(guān)(P<0.05)，其相關(guān)系數(shù)rs=-0.4840，見表3。

表3 乳腺癌組織和癌旁組織中FBXW7和SRC-3表達相關(guān)性

3 討論

有研究證明FBXW7(F框/WD-40域蛋白7)是一種腫瘤抑癌基因，在乳癌、子宮內(nèi)膜癌、卵巢癌、胰腺癌、直腸癌中都發(fā)現(xiàn)FBXW7的突變。通過介導泛素蛋白酶體途徑降解cyclinE蛋白、c-myc、c-jun、Notch、MCL1、KLF5和c-myb等多種癌蛋白[5～9]，在癌細胞的發(fā)展、擴散以及規(guī)律性變化的過程中能夠起到一定的控制作用。而在不少的腫瘤里表達結(jié)果都在上升，這是癌細胞以及潛在的癌細胞的共同結(jié)果。FBWX7、SKP1/CUL1和RBX1形成SCF復合物后能夠形成泛素連接酶，并且發(fā)揮生物學功能。FBWX7、SKP1/CUL1和RBX1形成SCF復合物后能夠形成泛素連接酶，并且發(fā)揮生物學功能。MutsukoIbusuki等[10]等人在研究FBXW7基因及其蛋白在187例乳腺癌患者中的表達水平時發(fā)現(xiàn)，在組織學分化高、ER(-)、PgP(-)的患者中，F(xiàn)BXW7mRNA的表達明顯受到抑制，這也支持FBXW7mRNA影響腫瘤細胞的細胞周期的觀點，按形態(tài)學對腫瘤細胞胞質(zhì)進行評價時，組織學分級可以反映DNA的合成和有絲分裂[11]。在激素受體陰性的亞組中,FBXW7mRNA低表達。另外,FBXW7mRNA低表達還與Ki-67有這密切的關(guān)系。在臨床研究中，SRC-3為高表達。本研究結(jié)果顯示，SRC-3在乳腺癌組織中高表達，正常乳腺低表達，并且與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期有關(guān)，這與國內(nèi)外文獻報道一致。證實了過度表達的SRC-3對乳腺癌的轉(zhuǎn)移過程起了重要作用，被認為是乳腺癌患者預(yù)后不良的標志。無論國內(nèi)國外出現(xiàn)相同的結(jié)果。在SRC-3對癌旁組織轉(zhuǎn)移以及表達方式上都能對其造成一定的影響，人們將其視為病人預(yù)后不良的結(jié)果。而從SRC-3、FBXW7在癌旁組織以及正常組織的分析結(jié)果中得出，SRC-3、FBXW7在腫瘤的形成過程中起到一定的作用。本研究結(jié)果顯示，F(xiàn)BXW7、SRC-3在乳腺癌之間呈負相關(guān)關(guān)系(rs=-0.5856、P<0.05)。FBXW7、SRC-3在乳腺正常組織之間仍呈負相關(guān)(rs=-0.4840、P<0.01)。綜上所述，F(xiàn)BWX7、SRC-3在乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，F(xiàn)BXW7的低表達和SRC-3的過度表達可以預(yù)測乳腺癌的轉(zhuǎn)移情況。FBWX7、SRC-3很可能成為早起乳腺癌早期診斷、判斷預(yù)后的新指標及新的靶點。

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廉奇鑫(1988～)男，黑龍江雙鴨山人，在讀碩士研究生。

周昱(1969～)男，黑龍江雙鴨山人，學士，副主任醫(yī)師，碩士研究生導師。E-mail1502136777@qq.com。

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1008-0104(2015)03-0072-03

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