劉 欣，劉遠(yuǎn)程

(瀘州醫(yī)學(xué)院附屬中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川瀘州 646000)

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·臨床研究·

2013年常見革蘭陰性桿菌的臨床分布及耐藥性分析*

劉 欣，劉遠(yuǎn)程△

(瀘州醫(yī)學(xué)院附屬中醫(yī)醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川瀘州 646000)

目的 了解醫(yī)院感染常見革蘭陰性桿菌的臨床分布及耐藥性，為臨床合理使用抗菌藥物提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。方法 所有標(biāo)本嚴(yán)格按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》進(jìn)行，用西門子公司W(wǎng)alkAway-40型細(xì)菌鑒定儀鑒定細(xì)菌及進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，用WHONET5.5軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果 2013年分離出細(xì)菌2 316株，革蘭陰性菌1 601株，占69.1%；革蘭陽(yáng)性球菌611株，占26.4%；真菌104株，占4.5%。其中大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、肺炎克雷伯菌、陰溝腸桿菌占革蘭陰性菌的前5位，檢出率分別為27.0%、18.4%、18.1%、16.5%、7.2%。檢出產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)菌株156株，檢出率為9.7%。革蘭陰性桿菌對(duì)常用抗菌藥物大多數(shù)呈現(xiàn)耐藥趨勢(shì)，除肺炎克雷伯菌外，其余革蘭陰性桿菌對(duì)三代頭孢的耐藥率都在30%以上；對(duì)慶大霉素、妥布霉素的平均耐藥率在30%以上；除鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)阿米卡星耐藥率達(dá)53.9%外，其他革蘭陰性桿菌對(duì)阿米卡星耐藥率較低，在15.4%～26.4%；對(duì)喹諾酮類的耐藥率也在25%以上。其中銅綠假單胞菌和鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)碳青霉烯類藥物的耐藥率分別達(dá)14.2%、37.5%。結(jié)論 革蘭陰性桿菌是醫(yī)院內(nèi)感染的主要病原菌，特別是產(chǎn)ESBLs的菌株對(duì)頭孢菌素類耐藥顯著，多藥耐藥現(xiàn)象嚴(yán)重。臨床科室應(yīng)加強(qiáng)病原學(xué)標(biāo)本的送檢率，參考藥敏結(jié)果用藥或多種抗菌藥物聯(lián)合用藥，合理使用抗菌藥物。

革蘭陰性桿菌； 產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶： 抗菌藥物； 耐藥性

近年來，由于廣譜抗菌藥物的大量泛用、濫用，細(xì)菌耐藥性呈逐年上升趨勢(shì)，使醫(yī)院感染控制管理變得日益嚴(yán)峻。其中產(chǎn)ESBLs的革蘭陰性桿菌容易引起醫(yī)院感染的暴發(fā)流行，并且所涉菌株多藥耐藥現(xiàn)象嚴(yán)重，給臨床治療帶來很大困難。作者回顧性分析了本院2013年1～12月住院患者醫(yī)院感染革蘭陰性桿菌的臨床分布及耐藥狀況，探討其流行病學(xué)規(guī)律、耐藥機(jī)制、耐藥特征，旨在為臨床醫(yī)師合理使用抗菌藥物提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 2013年1～12月本院送檢的各種疑似感染標(biāo)本中分離革蘭陰性桿菌共計(jì)1 601株，剔除同一患者相同部位的同一菌株。

1.2 儀器與試劑 BACT/ALERT 3D血培養(yǎng)儀、MicroScan WalkAway-40微生物自動(dòng)檢測(cè)儀及儀器配套的鑒定和藥敏板條，哥倫比亞血平板、巧克力平板、麥康凱平板、M-H平板等由重慶龐通科貿(mào)有限公司提供。藥敏紙片由Oxoid公司提供。

1.3 細(xì)菌鑒定和藥敏 均按《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》進(jìn)行分離培養(yǎng)[1]。不同的標(biāo)本接種到不同培養(yǎng)基中。分離到的病原菌用MicroScan板條進(jìn)行鑒定和藥敏試驗(yàn)，抗菌藥物包括碳青霉烯類(亞胺培南、美羅培南)，氨基糖苷類(阿米卡星、慶大霉素、妥布霉素)，氟喹諾酮類(環(huán)丙沙星、左氧氟沙星)，β-內(nèi)酰胺類/β-內(nèi)酰胺酶抑制劑如替卡西林/克拉維酸以及三代頭孢(頭孢他啶、頭孢曲松)和四代頭孢(頭孢吡肟)。產(chǎn)ESBLs 細(xì)菌鑒定同時(shí)采用NCCLS1999年推薦的抑制劑增強(qiáng)紙片法(頭孢他啶/克拉維酸，頭孢噻肟/克拉維酸)確證。質(zhì)控菌株大腸埃希菌ATCC25922，銅綠假單胞菌ATCC27853均由衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心提供。

1．4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用WHONET5.5軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，分析方法包括描述性分析。

2 結(jié) 果

2.1 病原菌的構(gòu)成 從2013年1～12月共分離出病原菌2 316株，革蘭陰性菌1 601株，占69.1%；革蘭陽(yáng)性球菌611株，占26.4%；真菌104株，占4.5%。革蘭陰性菌是臨床的主要病原菌,其中大腸埃希菌(382株,27.0%)、銅綠假單胞菌(295株,18.4%)、鮑曼不動(dòng)桿菌(280株,18.1%)、肺炎克雷伯菌(264株,16.5%)、陰溝腸桿菌(103株,7.2%)占革蘭陰性菌的前5位。

表1 主要革蘭陰性菌對(duì)主要抗菌藥物的耐藥率[n(%)]

續(xù)表1 主要革蘭陰性菌對(duì)主要抗菌藥物的耐藥率(%)

注：…表示未檢測(cè)。

2.2 主要革蘭陰性菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率 1 601株革蘭陰性菌中檢出ESBLs 156株，檢出率為9.7%，其中大腸埃希菌99株，占63.5%，肺炎克雷伯菌57株，占36.5%。革蘭陰性桿菌對(duì)常用抗菌藥物大多數(shù)呈現(xiàn)耐藥趨勢(shì)，除肺炎克雷伯菌外，其余革蘭陰性桿菌對(duì)三代頭孢的耐藥率都在30%以上；對(duì)慶大霉素、妥布霉素的平均耐藥率在30%以上；除鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)阿米卡星耐藥率達(dá)53.9%外，其他革蘭陰性桿菌對(duì)阿米卡星耐藥率較低，在15.4%～26.4%；對(duì)喹諾酮類的耐藥率也在25%以上。其中銅綠假單胞菌和鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)碳青霉烯類藥物的耐藥率分別達(dá)14.2%、37.5%。革蘭陰性菌對(duì)主要抗菌藥物的耐藥率見表1。

3 討 論

革蘭陰性桿菌是本院院內(nèi)感染的主要病原菌，這和相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道相似[2]。隨著抗菌藥物在臨床上的廣泛使用，細(xì)菌的耐藥率不斷升高，革蘭陰性桿菌中產(chǎn)ESBLs菌株也在逐年上升，其對(duì)抗菌藥物廣譜耐藥可通過質(zhì)粒傳播，容易引起醫(yī)院感染的暴發(fā)流行，使感染難以控制。表1顯示5種革蘭陰性桿菌對(duì)亞胺培南和美羅培南耐藥率最低,頭孢吡肟次之，所以亞胺培南和美羅培南是對(duì)抗革蘭陰性桿菌的最有效的抗菌藥物。但本院2013年還是出現(xiàn)了5株大腸埃希菌、2株陰溝腸桿菌、42株銅綠假單胞菌對(duì)亞胺培南耐藥，105株鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)美羅培南耐藥，說明本院革蘭陰性桿菌對(duì)碳青霉烯類的耐藥性不容樂觀，應(yīng)引起相關(guān)部門的高度重視，加強(qiáng)對(duì)碳青霉烯類藥物的規(guī)范應(yīng)用。除肺炎克雷伯菌外，其余革蘭陰性桿菌對(duì)三代頭孢的耐藥率都在30%以上,有的甚至達(dá)到60%，主要是近年來是二、三代頭孢的大量使用，使細(xì)菌對(duì)新一代的β-內(nèi)酰胺類抗菌藥物廣泛耐藥，主要原因是細(xì)菌質(zhì)?；蛉旧w介導(dǎo)的ESBLs的產(chǎn)生。產(chǎn)ESBLs菌的嚴(yán)重危害性在于它的多重耐藥性、流行菌株的擴(kuò)散以及質(zhì)粒和耐藥基因的轉(zhuǎn)移。產(chǎn)ESBLs菌株對(duì)頭孢菌素類的耐藥率達(dá)到64.0%，對(duì)β-內(nèi)酰胺類/β-內(nèi)酰胺酶抑制劑如替卡西林/克拉維酸的耐藥性相對(duì)較低為38.0%。對(duì)氨曲南的耐藥率最高達(dá)到60.2%。另外大腸埃希菌和陰溝腸桿菌對(duì)氟喹諾酮的耐藥率在40%以上,高于周澄宇[3]的報(bào)道。鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)所有抗菌藥物的總體耐藥率較高，是陰性桿菌中耐藥現(xiàn)象最嚴(yán)重的，這與鮑曼不動(dòng)桿菌的多重耐藥機(jī)制有關(guān)[4]。銅綠假單胞菌除了對(duì)亞胺培南、阿米卡星、頭孢吡肟、左氧氟沙星的耐藥率較低，耐藥率在30%以下外，對(duì)其他抗菌藥物的耐藥性均較高。

近年來，由于臨床大量廣譜抗菌藥物、免疫抑制劑的應(yīng)用以及侵入性醫(yī)療操作的增多，使病原菌的感染率更高、耐藥現(xiàn)象更嚴(yán)重，加強(qiáng)耐藥菌的監(jiān)測(cè)顯得尤為重要。醫(yī)院感染的重要病原菌如產(chǎn)ESBLs腸桿菌科細(xì)菌、多藥耐藥銅綠假單胞菌和鮑曼不動(dòng)桿菌仍是監(jiān)測(cè)的重點(diǎn)[5-6]。同時(shí)，臨床科室需加強(qiáng)病原學(xué)標(biāo)本的送檢率，在經(jīng)驗(yàn)用藥的同時(shí)，參考藥敏結(jié)果用藥或多種抗菌藥物聯(lián)合用藥。在日常工作中應(yīng)減少不必要的侵入性操作,嚴(yán)格執(zhí)行醫(yī)療器械消毒和病房管理制度,特別是醫(yī)務(wù)人員的手可能是重要傳染源，應(yīng)規(guī)范手衛(wèi)生，嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作，做好嚴(yán)重感染患者的隔離，切斷傳播途徑[6]，避免交叉感染,嚴(yán)防醫(yī)院感染的暴發(fā)流行。同時(shí)加強(qiáng)碳青霉烯類抗菌藥物的規(guī)范應(yīng)用，以減少產(chǎn)ESBLs的菌株和多藥耐藥菌株的產(chǎn)生，提高治愈率[7]。

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[5]糜祖煌,秦玲,金輝,等.泛耐藥銅綠假單胞菌β-內(nèi)酰胺酶基因分析及菌株親緣性分析[J].中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2009,19(13):1621-1623.

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四川省科技廳、重慶市科委共建科技平臺(tái)項(xiàng)目資助項(xiàng)目(csts2012pt-sy0001)。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.02.028

A

1672-9455(2015)02-0207-02

2014-05-26

2014-11-13)

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