張曉華，曾繁華，張銳夫

（1.牡丹江市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督檢驗(yàn)檢測(cè)中心，黑龍江牡丹江157021；2.大連出入境檢驗(yàn)檢疫局，遼寧大連116611；3.牡丹江出入境檢驗(yàn)檢疫局，黑龍江牡丹江157005）

乙二胺四乙酸二鈉（EDTA）是GB2760 允許使用的一種食品添加劑[1]，可與鐵、銅、鈣、鎂等多價(jià)離子螯合成穩(wěn)定的水溶性絡(luò)合物，利用其絡(luò)合作用來(lái)防止由金屬引起的變色、變質(zhì)、變濁及維生素C 的氧化損失，起到護(hù)色、抗氧化作用[2]。由于其良好的添加效果，常被作為抗氧化劑、防腐劑、穩(wěn)定劑和凝固劑而廣泛的應(yīng)用于加工食品中[3]，但過(guò)多的乙二胺四乙酸二鈉被人食入后，會(huì)對(duì)人身造成傷害，其每日允許攝入量（ADI）值為0～205mg·kg-1。國(guó)外對(duì)EDTA 在食品中的殘留量有嚴(yán)格的限量規(guī)定。日本規(guī)定罐頭食品中EDTA 的殘留（以乙二胺四乙酸二鈉鈣計(jì)）不得超過(guò)250mg·kg-1,飲料中不得超過(guò)35mg·kg-1[4]。我國(guó)在八寶粥等罐頭食品中規(guī)定不得超過(guò)250mg·kg-1[1]。

目前，有關(guān)于食品中乙二胺四乙酸二鈉殘留量國(guó)內(nèi)報(bào)道很多[5-8]，但針對(duì)魚(yú)罐頭食品中乙二胺四乙酸二鈉殘留量檢測(cè)無(wú)文獻(xiàn)報(bào)道，大多采用液相色譜法進(jìn)行檢測(cè)，樣品經(jīng)水提取，經(jīng)CuCl2或三氯化鐵衍生后，采用離子對(duì)試劑和C18柱進(jìn)行液相色譜分析檢測(cè)，測(cè)定低限達(dá)50～100mg·kg-1。國(guó)外有關(guān)食品中乙二胺四乙酸二鈉的含量檢測(cè)的文獻(xiàn)報(bào)道不多，Takashi Hamano 等人采用分光光度法測(cè)定食品中乙二胺四乙酸二鈉的含量[9]，利用三氯化鐵衍生后進(jìn)行分析檢測(cè)，線性范圍在0.5～40.0μg·cm-3；Brilliantes,S 等人采用液相色譜法測(cè)定罐裝海產(chǎn)品中乙二胺四乙酸二鈉的含量[10]，用弱乙酸提取，經(jīng)CuCl2衍生后，采用C8柱進(jìn)行液相色譜分析檢測(cè)，線性范圍為25.1～301.7mg·kg-1；Carolina E. Cagnasso 等人采用液相色譜法測(cè)定非酒精飲料中乙二胺四乙酸二鈉的含量[11]，定量限為2.0mg·L-1；Ralph Fingerhut等人在新生兒篩查中采用液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法測(cè)定干血漿樣品中乙二胺四乙酸二鈉的含量[12]，樣品經(jīng)四丁醇酯化后，采用液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法進(jìn)行測(cè)定，方法的定量限為84μmol·L-1；Congmin Z.Xie 等人采用反相離子對(duì)液相色譜法測(cè)定生活廢水中乙二胺四乙酸二鈉的含量[13]，定量限為0.005mg·L-1；Jos'e Benito Quintana 等人采用反相離子對(duì)液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法測(cè)定水中乙二胺四乙酸二鈉的含量[14]，定量限為0.001mg·kg-1。本研究的關(guān)鍵是采用三氯化鐵衍生化、三氯甲烷和MAX 陰離子交換柱凈化，用超高效液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀檢測(cè)和確證，外標(biāo)法定量,取得了滿意的結(jié)果。該方法具有快速、靈敏、準(zhǔn)確等特點(diǎn)，能滿足國(guó)內(nèi)外檢測(cè)限量要求。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 材料與試劑

甲醇、三氯甲烷、三正丁胺（均為色譜純）美國(guó)Fisher 公司；甲酸（88%，A.R.國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；HAc（A.R.天津市光復(fù)科技發(fā)展有限公司）；HCl（優(yōu)級(jí)純天津市耀華化學(xué)試劑有限責(zé)任公司）；FeCl3（A.R.天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司）；乙二胺四乙酸二鈉標(biāo)準(zhǔn)品（CAS:6381-92-6，純度大于等于99%購(gòu)自Sigma-Aldrich 公司）；實(shí)驗(yàn)用水均為去離子水；MAX 陰離子交換柱（150mg，6mL 美國(guó)Waters 公司）；水相濾膜（0.22μm奧特賽恩斯公司）；

0.02mol·L-1FeCl3溶液：稱取0.5406g FeCl3，溶于90mL 水中，轉(zhuǎn)移到100mL 容量瓶中，加入HCl 0.03mL，用水定容至刻度，混勻；

10%甲醇水溶液（含5mmol 三正丁胺,pH 值為3.5）：移取100mL 甲醇，溶于880mL 水中，加入1.17 mL 三正丁胺，用HAc 調(diào)節(jié)pH 值至3.5，轉(zhuǎn)移到1000mL 容量瓶中，用水定容至刻度，混勻；

95%甲醇水溶液（含5mmol 三正丁胺,pH 值為3.5）：移取950mL 甲醇,溶于30mL 水中，加入1.17mL三正丁胺，用HAc 調(diào)節(jié)pH 值3.5，轉(zhuǎn)移到1000mL容量瓶中，用水定容至刻度，混勻；

10%甲酸甲醇水溶液：移取10mL 甲酸，溶于40mL 水中，轉(zhuǎn)移到100mL 容量瓶中，用甲醇定容至刻度，混勻。

標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：分別準(zhǔn)確稱取適量的乙二胺四乙酸二鈉標(biāo)準(zhǔn)品，用水溶解并定容至100mL 棕色容量瓶中，分別得濃度為10mg·mL-1的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，此溶液轉(zhuǎn)移至儲(chǔ)液瓶中4℃下儲(chǔ)存一個(gè)月。

標(biāo)準(zhǔn)中間溶液：準(zhǔn)確吸取乙二胺四乙酸二鈉儲(chǔ)備溶液10mL 于50mL 棕色容量瓶中，用水稀釋成濃度為2mg·mL-1的標(biāo)準(zhǔn)中間溶液，此溶液轉(zhuǎn)移至儲(chǔ)液瓶中4℃下儲(chǔ)存一個(gè)月。

標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：根據(jù)需要使用前用空白樣品基質(zhì)配制適當(dāng)混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。

MAX 陰離子交換柱：使用前依次用5mL 甲醇、5mL 水活化。

1.2 儀器與設(shè)備

Waters Quattro Premier 超高效液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜聯(lián)用儀（配ESI-電離源）（美國(guó)Waters 公司）；電子天平（感量0.01mg，0.01g 梅特勒-托利多國(guó)際貿(mào)易（上海）有限公司）；組織搗碎機(jī)（上海精科實(shí)業(yè)有限公司）；離心機(jī)（5 000r·min-1湘儀離心機(jī)儀器有限公司）；旋渦混合器（德國(guó)IKA 公司）；均質(zhì)器（德國(guó)IKA 公司）；超聲波清洗機(jī)（昆山市超聲儀器有限公司）；氮吹儀（美國(guó)Organomation 公司）；50mL 螺旋蓋聚丙烯離心管；25、50mL 玻璃具塞離心管。

1.3 分析條件

1.3.1 色譜條件 色譜柱：Phenyl 柱，50mm×2.1mm（內(nèi)徑），粒度1.7μm，或相當(dāng)者；流動(dòng)相:見(jiàn)梯度洗脫程序表1；流速：0.25mL·min-1；柱溫：25℃；進(jìn)樣量：5μL。

表1 梯度洗脫程序表Tab.1 Gradient program of mobile phase

1.3.2 質(zhì)譜條件 離子源：ESI,負(fù)模式；掃描方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）；源溫度：110℃；去溶劑氣流量：550L·hr-1；N2氣；去溶劑溫度：350℃；錐孔氣流量：50L·hr-1,N2；碰撞氣壓力：3.30×10-4KPa,Ar，純度≥99.999%；毛細(xì)管電壓：3.0kV；其它質(zhì)譜參數(shù)見(jiàn)表2。

表2 乙二胺四乙酸二鈉衍生物的定性離子對(duì)、定量離子對(duì)、錐孔電壓和碰撞氣能量Tab.2 MRM transitions of precursor/product ion for qualitative and quantitative analysis,cone voltage，collision energy of EDTA disodium derivative

1.4 樣品前處理

1.4.1 提取 稱取魚(yú)罐頭試樣約5g（精確到0.01g）于50mL 螺旋蓋聚丙烯離心管中，加入15mL 水，再加入20mL 三氯甲烷，用均質(zhì)器以10000r·min-1均質(zhì)2min，4500r·min-1離心5min。將上清液轉(zhuǎn)移至50mL 玻璃具塞離心管中。再用15mL 水重復(fù)提取兩次,合并提取液于同一50mL 玻璃具塞離心管中，待衍生化和凈化。

1.4.2 衍生化[2]

1.4.2.1 樣品溶液的衍生化 向上述提取溶液中加入1.0mL 0.02mol·L-1FeCl3溶液，混合，于超聲波中超聲20mim，冷卻至室溫后，轉(zhuǎn)移至50mL 容量瓶中，用水定容至刻度。

1.4.2.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的衍生化 準(zhǔn)確吸取適當(dāng)濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作液于50mL 玻璃具塞離心管中，加入40mL水和1.0mL 0.02mol·L-1FeCl3鐵溶液，以下操作同1.3.2.1。

1.4.3 凈化 準(zhǔn)確移取5mL 上述衍生化樣品溶液轉(zhuǎn)移到MAX 陰離子交換柱中，控制流速在1～2 mL·min-1，棄去流出液。用5mL 水、5mL 甲醇和3mL 10%甲酸甲醇水溶液淋洗，棄去流出液。最后用6mL 10%甲酸甲醇水溶液洗脫，收集洗脫液。洗脫液經(jīng)80℃氮吹儀吹干后，用5mL水溶解并定容，過(guò)0.22μm濾膜，供超高效液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀測(cè)定。

2 結(jié)果與討論

2.1 測(cè)定方法的選擇

乙二胺四乙酸常用H4Y 表示，由于其在水及酸中的溶解度很小，常用的為其二鈉鹽：Na2H2Y2H2O，也簡(jiǎn)寫(xiě)為EDTA。當(dāng)溶液的酸度很高時(shí)，兩個(gè)羧基可再接受H+，形成H6Y2+，相當(dāng)于一個(gè)六元酸，有六級(jí)離解常數(shù)：Ka1=10-0.9、Ka2=10-1.6、Ka3=10-2.1、Ka4=10-2.8、Ka5=10-6.2、Ka6=10-10.3；7 種形式：H6Y2+、H5Y+、H4Y、H3Y-、H2Y2-、HY3-、Y4-；當(dāng)pH ＜1 時(shí)，主要以H6Y2+形式存在；當(dāng)pH 值＞11 時(shí)，主要以Y4-形式存在配位離子[15]。從中可以看出，EDTA 是極性很強(qiáng)化合物，如果不進(jìn)行金屬離子絡(luò)合和采用離子對(duì)試劑，很難采用液相色譜法（紫外檢測(cè)器）測(cè)定其含量，國(guó)內(nèi)外的文獻(xiàn)報(bào)道大都基于此；Jos'e Benito Quintana 等人采用反相離子對(duì)液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法測(cè)定水中乙二胺四乙酸二鈉的含量[14]，使乙二胺四乙酸二鈉不進(jìn)行酯化進(jìn)行LC-MS/MS 測(cè)定成為可能。所以本標(biāo)準(zhǔn)最后選用UPLC-MS/MS 進(jìn)行研究，經(jīng)實(shí)驗(yàn)本方法的測(cè)定低限為20mg·kg-1，完全能滿足食品中乙二胺四乙酸二鈉最低限量為25mg·kg-1的要求。

2.2 衍生化試劑的確定

由于EDTA 是極性很強(qiáng)化合物，極容易與金屬離子絡(luò)合，形成穩(wěn)定的鰲合物。EDTA 為六齒螯合劑，可以一個(gè)分子和二價(jià)及三價(jià)金屬以1∶1 比例形成螯合物。在溶液中存在多種金屬離子時(shí)，EDTA螯合優(yōu)先與穩(wěn)定常數(shù)大的金屬離子進(jìn)行反應(yīng)。螯合物穩(wěn)定常數(shù)表示EDTA 金屬螯合物的穩(wěn)定狀態(tài)，LogK（穩(wěn)定常數(shù)）越大，表示該螯合物越穩(wěn)定，越有利優(yōu)先發(fā)生螯合反應(yīng)。EDTA 螯合金屬離子穩(wěn)定性排序?yàn)镸o6+＞Bi3+＞Fe3+＞Cu2+＞Zn2+＞Fe2+＞Mn2+＞K+＞Ca2+＞Mg2+。雖然Mo6+和Bi3+穩(wěn)定常數(shù)大，但在食品中含量是極微量的，所以用Fe3+與乙二胺四乙酸二鈉鰲合進(jìn)行含量測(cè)定要比有些文獻(xiàn)方法采用CuCl2作為衍生化試劑要穩(wěn)定得多，其螯合物見(jiàn)圖1。

圖1 乙二胺四乙酸二鈉鰲合物Fig.1 Chelate of EDTA disodium

所以本方法中選擇FeCL3作為衍生化試劑進(jìn)行方法檢測(cè)是可靠、可行的。

2.3 凈化方法的選擇和優(yōu)化

魚(yú)罐頭等樣品基質(zhì)，雖然進(jìn)行了三氯甲烷初步的凈化，但仍然達(dá)不理想的凈化效果，色譜峰分叉比較明顯，無(wú)法進(jìn)行液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜分析測(cè)定，詳見(jiàn)圖2。

圖2 未經(jīng)MAX 柱陰離子交換柱凈化的乙二胺四乙酸二鈉色譜圖Fig.2 MRM chromatogram of EDTA disodium without the MAX anion exchange column purification

為此，我們選擇了固相萃取柱的凈化試驗(yàn)。分別選擇HLB、C18、WAX、NH2、MAX 柱進(jìn)行了固相萃取柱的凈化試驗(yàn)，結(jié)果表明：HLB、C18、WAX、NH2柱的保留效果不好，起不到凈化的目的；MAX 柱保留效果和凈化效果都比較理想，但洗脫起來(lái)非常困難。如果酸度達(dá)不到一定程度，很難將乙二胺四乙酸二鈉的衍生物從MAX 柱洗脫下來(lái)。為此，我們進(jìn)行了洗脫溶劑的選擇。首先，選取0.2mol·L-1三氯乙酸和甲醇，配制成5%三氯乙酸-甲醇溶液、10%三氯乙酸-甲醇溶液、20%三氯乙酸-甲醇溶液、30%三氯乙酸-甲醇溶液進(jìn)行了MAX 柱的洗脫實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明：20%三氯乙酸-甲醇溶液只用10mL 就能完全將乙二胺四乙酸二鈉的衍生物洗脫下來(lái)。但如果不吹干直接上液質(zhì)那是不行的，因?yàn)槿纫宜岬乃岫忍?，質(zhì)譜的峰型很差，無(wú)法進(jìn)行定量分析。如果進(jìn)行吹干處理，處理后樣品中仍然有酸性存在，所以就放棄了這種洗脫方式。其次，選取甲酸、水和甲醇，主要考慮甲酸是揮發(fā)性有機(jī)酸，容易吹干，配制成2%甲酸甲醇水溶液（2+50+48，V/V）、5%甲酸-水-甲醇水溶液（5+50+45，V/V）、10%甲酸-水-甲醇水溶液（10+50+40，V/V）、15%甲酸-水-甲醇水溶液（15+50+35，V/V）進(jìn)行了MAX 柱的洗脫實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明：2%甲酸甲醇水溶液和5%甲酸-水-甲醇水溶液所用的洗脫體積大約在15mL 以上，15%甲酸-水-甲醇水溶液洗脫又太快，僅需要1mL，而10%甲酸-水-甲醇水溶液所用洗脫體積在6mL 以內(nèi)，吹干后進(jìn)行質(zhì)譜檢測(cè)，峰型很好，所以本凈化方法選擇了10%甲酸-水-甲醇水溶液作為洗脫溶劑，具體的洗脫曲線見(jiàn)圖3。

圖3 MAX 柱陰離子交換固相萃取柱洗脫曲線Fig.3 MAX eluate curve of the anion exchange solid-phase extraction column

2.4 色譜柱和流動(dòng)相的選擇

據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道[4，6，7]，利用液相色譜分析EDTA 螯合物常用的色譜柱為C18色譜柱，流動(dòng)相通常采用四丁基氫氧化銨水溶液等離子對(duì)試劑進(jìn)行分析。如果對(duì)EDTA 螯合物采用LC-MS/MS 進(jìn)行分析測(cè)定，其色譜柱要有一定保留，且離子對(duì)試劑要具有很強(qiáng)的揮發(fā)性，通常的離子對(duì)試劑是不能使用。為此，本試驗(yàn)選擇了C18（50mm×2.1mm（i.d）,1.7μm）、Phenyl（50mm×2.1 mm（i.d）,1.7μm）液相色譜柱和含有一定量三正丁胺的甲醇水溶液作為流動(dòng)相進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明：C18液相色譜柱的色譜峰不尖，而且分叉；而Phenyl 液相色譜柱沒(méi)有出現(xiàn)這種情況，而且分離度和靈敏度都能滿足要求，所以本文的定量分析選擇了Pheny 液相色譜柱作為本實(shí)驗(yàn)方法的色譜柱。對(duì)于流動(dòng)相的選擇，我們選擇了4 種不同溶劑配比：10%甲醇水溶液（含5mmol 三正丁胺,pH 3.5）-100%甲醇、10%甲醇水溶液（含5mmol 三正丁胺,pH3.5）-80%甲醇水溶液、10%甲醇水溶液（含5mmol 三正丁胺,pH 3.5）-90%甲醇水溶液（含5mmol 三正丁胺,pH 3.5）、10%甲醇水溶液（含5mmol 三正丁胺,pH 3.5）-95%甲醇水溶液（含5mmol 三正丁胺,pH 3.5）。

試驗(yàn)表明：10%甲醇水溶液（含5mmol 三正丁胺,pH3.5）-90%甲醇水溶液（含5mmol 三正丁胺,pH3.5）和10%甲醇水溶液（含5mmol 三正丁胺,pH3.5）-95%甲醇水溶液（含5 mmol 三正丁胺,pH3.5）這兩種流動(dòng)相，EDTA 螯合物的出峰時(shí)間和峰形都比較理想，但10%甲醇水溶液（含5mmol 三正丁胺,pH3.5）-95%甲醇水溶液（含5mmol 三正丁胺,pH3.5）的靈敏度要優(yōu)于10%甲醇水溶液（含5mmol三正丁胺,pH3.5）-90%甲醇水溶液（含5mmol 三正丁胺,pH3.5）。所以本實(shí)驗(yàn)方法的流動(dòng)相選擇為10%甲醇水溶液（含5mmol 三正丁胺,pH3.5）-95%甲醇水溶液（含5mmol 三正丁胺,pH3.5）。

2.5 線性范圍的確定

在方法所確定的實(shí)驗(yàn)條件下，取一系列不同濃度的乙二胺四乙酸二鈉的衍生物標(biāo)準(zhǔn)溶液，以儀器響應(yīng)峰面積對(duì)乙二胺四乙酸二鈉的衍生物的濃度進(jìn)行線性回歸，結(jié)果表明:當(dāng)乙二胺四乙酸二鈉的衍生物的濃度在1.0～50.0μg·mL-1范圍內(nèi)時(shí)，線性關(guān)系良好，其相關(guān)系數(shù)（R2）為0.9922,回歸方程為Y=1368.57x+470.384。當(dāng)樣品中的乙二胺四乙酸二鈉的衍生物濃度超過(guò)上述兩個(gè)線性范圍時(shí)，可適當(dāng)加大樣品的稀釋倍數(shù)。

2.6 方法的測(cè)定低限、回收率和精密度

2.6.1 測(cè)定低限 測(cè)定低限是根據(jù)有關(guān)國(guó)家在魚(yú)罐頭等食品中對(duì)乙二胺四乙酸二鈉限量要求，而采用添加法進(jìn)行實(shí)測(cè)的情況確定的。乙二胺四乙酸二鈉的測(cè)定低限為20mg·kg-1，其基質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)品譜圖、測(cè)定低限譜圖和基質(zhì)的空白譜圖參見(jiàn)圖4～6?？蓾M足國(guó)外限量和《基本規(guī)定》要求。

圖4 乙二胺四乙酸二鈉標(biāo)準(zhǔn)品多反應(yīng)監(jiān)測(cè)色譜圖（20mg·kg-1）Fig.4 MRM chromatogram of EDTA disodium derivative standard（20mg·kg-1）

圖5 魚(yú)罐頭樣品添加（20mg·kg-1）色譜圖Fig.5 Chromatogram of spiked（20mg·kg-1）in canned fish

圖6 魚(yú)罐頭樣品空白色譜圖Fig.6 Chromatogram of blank in canned fish

2.6.2 方法的回收率和精密度實(shí)驗(yàn) 本方法以八寶粥罐頭為研究對(duì)象，采用添加法進(jìn)行了三個(gè)水平的回收率試驗(yàn)，其回收率、精密度的結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 魚(yú)罐頭中乙二胺四乙酸二鈉的回收率、精密度（n=6）Tab.3 Recoveries and relative standard deviations of EDTA disodium in canned eight ingredient porridge（n=6）

由表3 可以看出，乙二胺四乙酸二鈉在20～400mg·kg-1濃度范圍之間，方法的回收率在80.75～105.40%之間，精密度均小于10%，符合殘留分析的要求。

3 結(jié)論

本文采用固相萃取技術(shù)（SPE）和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS）技術(shù)相結(jié)合的分析方法，解決了魚(yú)罐頭等樣品基質(zhì)干擾嚴(yán)重的難題，為食品中乙二胺四乙酸二鈉檢測(cè)和確證，探索了一套新穎的樣品前處理方法和色譜分析方法。該方法應(yīng)用于實(shí)際樣品檢測(cè),效果理想。

［1］中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì).GB 2760-2011 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)-食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)［S］.北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2011:6.

［2］魏冬旭，胡珅，孫瑩,等.高效液相色譜法測(cè)定食品中乙二胺四乙酸二鈉［J］.檢驗(yàn)檢疫學(xué)刊，2013，23（6）:50-53.

［3］鄭睿行，張旭，方芳，等.高效液相色譜法測(cè)定醬腌菜制品中EDTA 殘留量［J］.中國(guó)食品添加劑，2011，2:156-159.

［4］羅袆，趙永彪，李淑娟，等.反相高效液相色譜法測(cè)定食品中EDTA 的含量［J］.中國(guó)食品添加劑，2006，4:212-219.

［5］王瓊，方艷紅，徐金瑞.罐頭食品中EDTA 殘留量的薄層色譜測(cè)定［J］.華僑大學(xué)學(xué)報(bào)，2002，23（1）：37-39.

［6］施旭霞，陳笑梅.反相高效液相色譜法測(cè)定罐頭食品中乙二胺四乙酸的殘留量［J］.色譜，2000，18（5）：445-447.

［7］李琛，李迎麗，唐開(kāi)紅.離子色譜法測(cè)定罐頭、醬菜等食品中的EDTA-2Na 含量［J］.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2005，15（10）：1233-1234.

［8］呂曉華，文紅，許紅琴.高效液相色譜法測(cè)定板栗罐頭中乙二胺四乙酸二鈉的含量［J］.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2009，19（3）：517-518.

［9］Takashi Hamano,et al. Sensitive spectrophotometric method for the determination of ethylenediaminetetraacetic acid in foods［J］.Analyst,1993,118:909-912.

［10］Brilliantes,S,et al.Method modification of EDTA analysis in canned seafood by HPLC［J］.Thai Fisheries Gazettev,1998,51（2）:117-124.

［11］Carolina E. Cagnasso,et al. Development and validation of a method for the determination of EDTA in non-alcoholic drinks by HPLC［J］.Food Compositionand Analysis,2007,20:248-251.

［12］Ralph Fingerhut,et al. Determination of EDTA in dried blood samplesby tandem mass spectrometry avoids serious errors in newborn screening［J］.Eur J ediatr,2009,168:553-558.

［13］Congmin Z.Xie,et al.Determination of EDTA in Dairy Wastewater and Adjacent Surface Water［J］.World Academy of Science,Engineering and Technology,2008,44:50-54.

［14］Jose Benito Quintana et al. Rapid and sensitive determination of ethylenediaminetetraacetic acid and diethylenetriaminepentaacetic acid in water samples by ion-pair reversed-phase liquid chromatographyelectrospraytandemmass spectrometry［J］.Chromatography A,2007,1145:110-117.

［15］程艷,高靜，徐紅納，田語(yǔ)林.螯合劑EDTA 簡(jiǎn)介［J］.化學(xué)教育，2009，5：4-6.

［16］陳肇臻，劉小剛.何樹(shù)坤.油炸小食品中乙二胺四乙酸二鈉的測(cè)定［J］.標(biāo)準(zhǔn)科學(xué)，2013，6：52-54.