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1.100027，武警北京總隊醫(yī)院，2.100073，北京電力醫(yī)院腎內科；3.100039　北京，武警總醫(yī)院首保臨床部

尿中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白對高血壓早期腎損害的預測價值

牛棟1,侯菲2，周晶3

1.100027，武警北京總隊醫(yī)院，2.100073，北京電力醫(yī)院腎內科；3.100039北京，武警總醫(yī)院首保臨床部

【摘要】目的探討檢測血和尿中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)對高血壓早期腎損害的預測價值。方法435例高血壓患者按照病程長短分為長病程組及短病程組，按照分級標準分為3級；135例健康體檢者作為對照組。應用酶聯(lián)免疫吸附方法檢測尿NGAL濃度，同時測Scr、ACR、血β2-mG及尿β2-mG。結果高血壓各級、各亞組血、尿NGAL檢測濃度均高于對照組，血和尿中NGAL濃度呈正相關，尿NGAL濃度可以反映血濃度，尿NGAL高血壓1級(1.21±0.63)μg/L、短病程組(2.21±1.59)μg/L均高于對照組(0.58±0.32)μg/L( P<0.05)，高血壓2級(1.93±1.86)μg/L，高血壓3級(3.11±1.38)μg/L和長病程組(3.29±1.41)μg/L與對照組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P均<0.01)；高血壓3級較高血壓1級尿NGAL濃度高，長病程組較短病程組高(P均<0.05)；尿NGAL與高血壓級別、高血壓病程和Scr均呈顯著性正相關(r=0.415、0.427、0.540，P均<0.05)，與ACR、血β2-mG、尿β2-mG相關性不明顯。結論尿NGAL可作為診斷高血壓性腎損害敏感而準確的早期標志物，有望用于臨床監(jiān)測。

【關鍵詞】中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白；高血壓；高血壓腎損害

【中國圖書分類號】R544.1

Value of blood and urine NGAL in diagnosing hypertensive nephropathy

NIU Dong1, HOU Fei2, and ZHOU Jing3.1.General Hospital of Beijing Municipal Corps, Chinese People’s Armed Police Force,Beijing,100027,China; 2.North China Grid Company Limited Beijing Electric Power Hospital,Beijing 100073,China;3.Very Important People’s Health Care Department, General Hospital of Chinese People’s Armed Police Forces, Beijing 100039, China

【Abstract】ObjectiveTo study the role of neutrophil gelatinase-associated lipocalin(NGAL) played in hypertensive nephropathy,and to identify its clinical significance. Methods435 patients with hypertension were divided into two groups according to their course of the diseases,and in three degrees.135 healthy people were enrolled as an observation group. We detected urine NGAL levels by enzyme linked immune absorption assay,Scr、ACR、sβ2-mG and uβ2-mG were detected,too. ResultsThe levels of urine NGAL in all subjects with hypertension were obviously higher than in the healthy people,compared with control group(0.58±0.32)μg/L,the degree 1 hypertension(1.21±0.63)μg/L and shorter course of the hypertension (2.21±1.59)μg/L showed higher urine NGAL (P<0.05),while the 2 (1.93±1.86)μg/L and degree 3 hypertension(3.11±1.38)μg/L and longer course of the hypertension(3.29±1.41)μg/L had higher urine NGAL(P<0.01).Urine NGAL was significantly higher in patients with degree 3 hypertension than in patients with degree 1 hypertension (P<0.05). The longer course of the hypertension distinctly higher than the shorter(P<0.05),too.The concentration of urine NGAL had positive relation to degree of hypertension,course of the hypertension and Scr(r=0.415，0.427，0.540，P<0.05),no relation to ACR、serum β2-mG and urineβ2-mG. ConclusionsUrine NGAL is expected to be developed as a new biomarker to diagnose hypertensive nephropathy because of its sensitive and specific character.

【Key words】neutrophil gelatinase-associated lipocalin；hypertension；hypertensive nephropathy

中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)，是lipocalin家族的新成員，是1993年在人中性粒細胞中發(fā)現(xiàn)的一種小分子量分泌性蛋白，分子量為25 kU，存在于人體內許多正常組織細胞中，可能與免疫反應、腫瘤的發(fā)生發(fā)展，以及腎臟疾病有關。近期研究表明，NGAL是診斷急性腎損傷新的最有效生物學標志之一[1]，可以反映早期腎臟損傷，與糖尿病腎病、IgA腎病、狼瘡性腎炎、間質性腎炎、慢性腎臟病等相關研究正在展開[2，3]。

流行病學研究顯示，收縮壓由120 mmHg升至130 mmHg，發(fā)生終末期腎臟病(end stage renal disease,ESRD)的風險明顯升高[4]；而高血壓導致的慢性腎臟病已成為發(fā)達國家引起ESRD的第二位或第三位的原因。近期資料顯示，在北京，高血壓導致的腎損害也已經(jīng)是ESRD的第三位原因[5]。

1對象與方法

1.1對象依據(jù)JNC7對成年人高血壓分期和治療的建議及2010年中國高血壓防治指南制定的診斷標準[6]，排除既往腎臟疾病、糖尿病、急性感染、心功能不全及腫瘤，收集2010-2014年某醫(yī)院門診及住院治療的原發(fā)性高血壓患者435例，男234例，女201例，平均(63.5±11.3)歲，其中高血壓1級121例，2級148例，3級166例；同期健康對照135例，男72例，女63例，平均(61.8±11.2)歲。

根據(jù)病程長短將高血壓組分為二個亞組：長病程組(病史等于或超過10年)237例，短病程組(病史小于10年)198例。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準，所有患者均簽署知情同意書，且檢測不向患者收取費用。見表1。

表1　高血壓各級、各亞組與對照組一般資料比較　±s)

1.2方法

1.2.1標本收集處理收集受試者晨起清潔中段尿5 ml，用無菌尿管收集，2000 r/min，離心20 min，仔細收集上清，置于Eppendrof管中；清晨抽取受試者靜脈血3 ml，不抗凝，2000 r/min，離心20 min，取上清液，置于Eppendrof管中。血及尿標本均于-30 ℃冰箱凍存，10 d內檢測完畢，避免反復凍融。

1.2.2檢測方法血、尿NGAL檢測采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)方法，美國RD公司提供人NGAL的ELISA試劑盒(檢測范圍0.5～8 μg/L)，按照說明書嚴格操作，根據(jù)所得樣本的吸光度值，由標準曲線計算各樣本相應的NGAL濃度，尿NGAL用尿肌酐進行校正。常規(guī)全自動生化分析儀檢測血肌酐(serum creatinine，Scr)；免疫比濁法檢測尿微量白蛋白，尿微量白蛋白用尿肌酐值校正，以尿白蛋白-肌酐比(albumin creatinine ratio，ACR)表示；免疫比濁法檢測血β2微球蛋白(β2-mG)及尿β2微球蛋白。

2結果

2.1與對照組比較高血壓各級、各亞組患者血、尿NGAL檢測濃度均高于對照組，其中高血壓1級、短病程組與對照組比較(P均<0.05)；高血壓2級、高血壓3級和長病程組與對照組比較(P均<0.01)，差異均有統(tǒng)計學意義(表2)。

2.2組間比較高血壓3級較高血壓1級尿NGAL濃度高(P<0.05)，長病程組尿NGAL濃度較短病程組高(P<0.05)，差異均有統(tǒng)計學意義(表2)。

2.3相關性分析血和尿中NGAL呈正相關(r=0.408，P<0.05)，尿中NGAL濃度基本可以代表血NGAL濃度；血、尿NGAL濃度與高血壓級別有顯著性正相關(r=0.415，P<0.05)；血、尿NGAL濃度與高血壓病程呈顯著性正相關(r=0.427，P<0.05)。

如表2所示，血、尿NGAL與血肌酐呈顯著性正相關(r=0.540，P<0.05)，與尿白蛋白-肌酐比、血β2微球蛋白、尿β2微球蛋白相關性不明顯(r=0.272，P>0.05)。

表2　高血壓各級、各亞組與對照組檢測數(shù)據(jù)資料比較　±s)

注：與對照組比較, ①P<0.05,②P<0.01； 組間比較③P<0.05

3討論

高血壓腎損害起病隱匿，病程長，其診斷主要基于臨床表現(xiàn)，早期階段常規(guī)檢查很難發(fā)現(xiàn)。目前，其實驗室指標主要是尿微量白蛋白[7]，它主要反映了腎小球濾過功能受損情況。然而，早期腎損害有相當一部分主要是腎小管損害，此時，尿微量白蛋白并無明顯升高[8]，還需繼續(xù)尋找相關腎小管損傷的標志物。

體內外研究均發(fā)現(xiàn)，腎近曲小管上皮細胞受到損傷性刺激后會大量分泌NGAL，可誘導腎小管間質中浸潤的中性粒細胞發(fā)生凋亡，以保護腎組織免受炎細胞的侵害。同時，NGAL可誘導腎間充質細胞向腎小管上皮細胞轉化，從而誘導腎小管上皮細胞再生[9]。體內注射重組NGAL可減輕小鼠腎臟缺血-再灌注所引起的腎小管損傷[10]，這可能是因為NGAL作為一個鐵轉運蛋白，參與了損傷后腎小管上皮細胞內鐵轉運和誘導血紅蛋白加氧酶的生成，從而利于損傷腎小管的再生[11]。

本研究定量檢測高血壓患者尿NGAL水平，發(fā)現(xiàn)高血壓患者無論其血壓水平、病程長短如何，其尿NGAL檢測濃度均高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義；也就是說，高血壓一經(jīng)發(fā)現(xiàn)，即可能伴隨此項指標的升高。提示腎小管損害可能在確診原發(fā)性高血壓時已經(jīng)出現(xiàn)，推測這種尿NGAL的升高或與腎臟在高灌注高濾過狀態(tài)下發(fā)揮的代償性防御措施機制有關。

進一步比較發(fā)現(xiàn)，高血壓長病程組及血壓水平偏高的高血壓2級、3級患者尿NGAL檢測值較對照組升高更為明顯(P<0.01)，且隨著病程的延長、血壓水平的升高，其尿NGAL濃度逐漸升高，呈顯著的正相關，考慮或為持續(xù)高血壓的損傷刺激導致腎小管上皮細胞大量分泌NGAL的結果。從另一個角度說明血壓水平居高、病程延長確是造成腎損害的關鍵因素，對于長病程的原發(fā)性高血壓患者和血壓水平控制不良者即使無明顯腎臟受損表現(xiàn)，亦應定期監(jiān)測相關指標，而尿NGAL檢測或可提高早期腎損害的檢出率。

目前有很多研究發(fā)現(xiàn)，血清和尿液NGAL水平與腎小球濾過率存在顯著的負相關關系，認為NGAL或可作為評價腎功能的新指標。本研究也有類似發(fā)現(xiàn)，尿NGAL濃度與血肌酐呈正相關，這表明，高血壓患者尿NGAL水平反映了腎損害的嚴重程度，可繼續(xù)探討其對殘留腎小球濾過率的預測價值。

綜上，尿NGAL檢測方法簡單易行，靈敏可靠，可以作為診斷高血壓性腎損害的早期標志物，有望成為高血壓患者早期篩查腎損害的手段之一。

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(2015-03-15收稿2015-07-10修回)

(責任編輯張楠)

作者簡介：牛棟，碩士，主任醫(yī)師，E-mail：holistic@sohu.com通訊作者：周晶，E-mail:ccc_008@sina.com