杜曉霞郭建強(qiáng)祁根兄許 楠解紅梅蓋晉宏徐海斌張興娟

（1.山東畜牧獸醫(yī)職業(yè)學(xué)院寵物科技系,山東濰坊 261061；2.山東畜牧獸醫(yī)職業(yè)學(xué)院動(dòng)物醫(yī)學(xué)系,山東濰坊 261061）

精美動(dòng)物器官鑄型標(biāo)本制作的實(shí)踐

杜曉霞1郭建強(qiáng)2祁根兄1許 楠1解紅梅1蓋晉宏1徐海斌1張興娟1

（1.山東畜牧獸醫(yī)職業(yè)學(xué)院寵物科技系,山東濰坊 261061；2.山東畜牧獸醫(yī)職業(yè)學(xué)院動(dòng)物醫(yī)學(xué)系,山東濰坊 261061）

動(dòng)物器官內(nèi)管道鑄型是一項(xiàng)實(shí)踐性很強(qiáng)的技術(shù)，在制作過(guò)程中，需要不斷摸索和嘗試才能獲得豐富的經(jīng)驗(yàn)，并且需要不斷的總結(jié)和完善技術(shù)要領(lǐng)。筆者在從事管道鑄型標(biāo)本制作過(guò)程中，積極探索，獲得如下經(jīng)驗(yàn):（1）采取最新鮮的器官作為材料是鑄型成功的前提；（2）選用適宜濃度的鑄型劑是顯示各種管道特點(diǎn)的關(guān)鍵；（3）針對(duì)器官內(nèi)部管道的不同特點(diǎn)適度掌握首次灌注量和補(bǔ)充灌注量是必要的手段；（4）用心體會(huì)手工控制壓力是鑄型成敗的重要因素；（5）用丙酮與丁酮混合作為溶劑有明顯的優(yōu)點(diǎn)。此外，精心的清理和修整可以收到錦上添花的效果。此外，制作并研究各種動(dòng)物器官內(nèi)管道鑄型，尤其是血管鑄型，還能為臨床醫(yī)學(xué)以及動(dòng)物醫(yī)學(xué)中進(jìn)行人和動(dòng)物（犬、貓等寵物）器官移植提供有價(jià)值的參考依據(jù)。

鑄型標(biāo)本 制作 方法改進(jìn)

精美的鑄型標(biāo)本不僅可以全面真實(shí)地模擬正常器官內(nèi)部的管腔結(jié)構(gòu)形態(tài)和立體構(gòu)型，用來(lái)作為動(dòng)物解剖學(xué)、動(dòng)物外科手術(shù)學(xué)等學(xué)科的形象化教具，而且是一種令人賞心悅目的藝術(shù)品。理想化的標(biāo)本應(yīng)當(dāng)具備色澤鮮亮、枝條清晰逼真等特點(diǎn)。但是制作一件完美精致的鑄型標(biāo)本絕非易事，從動(dòng)物器官的取材、插管、灌注、硬化、腐蝕、沖洗、干燥、修剪直至封裝，每一個(gè)環(huán)節(jié)都至關(guān)重要。筆者從2003年起至今，已經(jīng)制作了大量的大體解剖鑄型標(biāo)本和微血管鑄型標(biāo)本。曾經(jīng)參與了牦牛肺臟內(nèi)部管道鑄型標(biāo)本的制作，親自制作了不同年齡段牦牛肺微血管鑄型的標(biāo)本，以及黃牛心、肺；山羊心、肺、脾、肝、腎、乳腺、子宮；犬心、肺、肝、腎等器官內(nèi)的管道鑄型標(biāo)本，獲得了寶貴的實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。制出了一些令人滿意的標(biāo)本，其中，1日齡牦牛肺微血管鑄型的一系列標(biāo)本圖片在“1日齡牦牛肺泡毛細(xì)血管的掃描電鏡觀察”（杜曉霞等，2008）和“The subpleural pulmonary microvasculature in newborn yak（Bos grunniens）”（Du等，2009）兩篇文章中發(fā)表。在此將一些心得體會(huì)歸納如下，以饗讀者。

1 關(guān)鍵技術(shù)介紹

1.1 采取最新鮮的器官作為材料是鑄型成功的前提

例如，采集新鮮的黃牛心臟，其心臟壁及各血管壁均有良好的彈性與柔韌性，故不論是尋找冠狀動(dòng)脈口還是灌注過(guò)程中的結(jié)扎等操作都比較容易，制作出的鑄型，效果很好（圖1）。但是，已經(jīng)固定過(guò)的不新鮮的黃牛心臟，彈性與韌性較差，給插管、結(jié)扎等操作帶來(lái)很大的困難，而且脂肪被固定后很難剝除，在剝除脂肪的過(guò)程中也會(huì)傷及細(xì)小血管，致使出現(xiàn)漏液現(xiàn)象嚴(yán)重影響鑄型標(biāo)本的質(zhì)量。

1.2 選用適宜濃度的鑄型劑是顯示各種管道特點(diǎn)的關(guān)鍵

我們制作過(guò)的器官標(biāo)本大小相差懸殊，體積最大的是黃牛的肺臟，最小的是犬的腎臟。具體經(jīng)驗(yàn)：掌握鑄型劑濃度時(shí)，應(yīng)當(dāng)遵循“管徑越大鑄型劑濃度要求越高，管徑越小濃度要求越低”的原則。例如，黃牛肺臟的肺動(dòng)脈和支氣管樹(shù)，二者主干及分支的管徑都比較粗，選用30%ABS丙酮和丁酮1：1的灌注液進(jìn)行灌注，結(jié)果標(biāo)本主干飽滿，并且很好地顯示了肺動(dòng)脈和支氣管樹(shù)的分支（圖2）。例如，犬的腎臟，灌注腎動(dòng)脈選用10%ABS丙酮和丁酮1：1的灌注液，而腎靜脈和輸尿管則選用20%的灌注液效果比較好。對(duì)羊、犬肝臟和肺臟等器官內(nèi)多個(gè)管道同時(shí)鑄型時(shí)，更要注意控制濃度。例如，肝臟的肝動(dòng)脈、肝靜脈、門(mén)靜脈和肝管同時(shí)鑄型時(shí)，因肝動(dòng)脈細(xì)小，宜選用10%ABS丙酮和丁酮1：1的灌注液，肝靜脈、門(mén)靜脈和肝管比較粗，均宜選用30%ABS丙酮和丁酮1：1的灌注液。鑄型肺臟的肺動(dòng)脈、肺靜脈和支氣管樹(shù)時(shí)，三種管道均宜選用30%ABS丙酮和丁酮1：1的灌注液（圖3）。此外，無(wú)論器官的大小、管道的粗細(xì)均應(yīng)當(dāng)注意，首次，灌注濃度與補(bǔ)充灌注濃度盡量要有濃度梯度。一般原則是“首次灌注濃度低，補(bǔ)充灌注濃度高”；同時(shí)，也要注意補(bǔ)充灌注的時(shí)間間隔，原則是“管道越粗，時(shí)間間隔越長(zhǎng)”。例如，黃牛肺動(dòng)脈和支氣管樹(shù)的鑄型，首次灌注濃度采用30%ABS丙酮和丁酮1：1的灌注液，但如果繼續(xù)增加濃度，液體太黏稠，可能難以進(jìn)入管道，因此，用原濃度補(bǔ)充灌注8～9次，且每24 h補(bǔ)充灌注一次，效果比較好；對(duì)犬腎腎動(dòng)脈而言，首次灌注濃度用10%ABS丙酮和丁酮1：1的灌注液，補(bǔ)充灌注可用10%～15%的灌注液，因管道非常細(xì)小，如果濃度太高灌注液無(wú)法進(jìn)入管道，故間隔12 h，補(bǔ)充灌注一次即可。

1.3 針對(duì)器官內(nèi)部管道的不同特點(diǎn)適度掌握首次灌注量和補(bǔ)充灌注量是必要的手段

比如羊的腎臟，即便選用適宜的灌注液濃度，如果首次灌注液的用量過(guò)多也會(huì)造成鑄型標(biāo)本密度過(guò)高（圖4）。因此，首次用量宜控制在5～10 ml，而且補(bǔ)充灌注時(shí)灌注液的用量也不宜過(guò)多，2～3 ml即可。一般遵循“灌注量適當(dāng)即可，切忌過(guò)多”的原則。還比如同時(shí)鑄型肝臟的門(mén)靜脈、肝動(dòng)脈和肝管時(shí)，更要控制灌注門(mén)靜脈的液體用量，如果用量太大，不僅影響門(mén)靜脈及其分支的顯示，甚至由于對(duì)其他管道的壓迫，將會(huì)影響其他管道的主干及其分支的顯示（圖5）。

1.4 用心體會(huì)手工控制壓力是鑄型成敗的重要因素

壓力大小是直接影響灌注效果的原因之一。筆者制作鑄型標(biāo)本時(shí)未采用任何壓力裝置，灌注時(shí)利用10 ml和20 ml塑料注射器手動(dòng)加壓，效果比較理想。因?yàn)槭謩?dòng)加壓可以根據(jù)灌注情況隨時(shí)調(diào)整壓力。一般原則是“壓力寧小勿大”。尤其是管道分支繁多的器官，比如心、肝、脾、肺和腎等更應(yīng)控制好壓力。如果壓力過(guò)大，就容易導(dǎo)致管道破裂，出現(xiàn)漏液。但有時(shí)也需要增大壓力，比如用固定過(guò)的黃牛心臟灌注冠狀動(dòng)脈或心靜脈時(shí)，壓力不能過(guò)小，否則灌注液不易進(jìn)入，尤其是靜脈阻力更大。因此，壓力的控制要根據(jù)器官內(nèi)管道的粗細(xì)，適當(dāng)進(jìn)行調(diào)整。

1.5 用丙酮與丁酮混合作為溶劑有明顯的優(yōu)點(diǎn)

過(guò)去人們往往采用丙酮或者丁酮作為溶劑，常常顯示出不同的缺點(diǎn)。我們研究的結(jié)果是，將丙酮與丁酮混合作為溶劑，二者可以取長(zhǎng)補(bǔ)短。丙酮揮發(fā)太快，不易進(jìn)入細(xì)小管道，而丁酮容易進(jìn)入細(xì)小管道，揮發(fā)比較慢，丁酮可以補(bǔ)丙酮之不足；丙酮能溶于水，而丁酮不溶于水，但丙酮和丁酮又有良好的互溶性，可以避免管道內(nèi)存留水分而發(fā)生阻塞，尤其對(duì)細(xì)小的管道更是如此。比如羊、犬腎的腎動(dòng)脈，羊、犬肝的肝動(dòng)脈等。

圖1 黃牛心臟左冠狀動(dòng)脈鑄型圖，A（紅色）:左冠狀動(dòng)脈；圖2 黃牛肺動(dòng)脈和支氣管樹(shù)的鑄型，A（藍(lán)色）:肺動(dòng)脈，B（白色）:支氣管；圖3 山羊肺動(dòng)脈、肺靜脈和支氣管樹(shù)聯(lián)合鑄型圖，A（藍(lán)色）:肺動(dòng)脈，B（白色）支氣管，V（紅色）肺靜脈；圖4 山羊腎血管鑄型，A（紅色）:腎動(dòng)脈，V（紅色）:腎靜脈（注:鑄型過(guò)密，動(dòng)靜脈主干均充盈紅色）；圖5 山羊肝動(dòng)脈、門(mén)靜脈和肝管聯(lián)合鑄型，A（紅色）:肝動(dòng)脈，V（黃色）:門(mén)靜脈，D（綠色）:肝管（注:門(mén)靜脈分支太過(guò)密集）

2 鑄型過(guò)程中的其他注意事項(xiàng)

2.1 精心的清理和修整可以收到錦上添花的效果

對(duì)制作出的鑄型標(biāo)本在腐蝕和沖洗后，要充分去除殘留在鑄型表面的腐敗組織和細(xì)小的雜物，比如脂肪、線頭等。甚至要采用一邊沖洗一邊用針尖、小鑷子等器具細(xì)心去除雜物的工作。鑄型標(biāo)本上局部過(guò)度密集時(shí)也可稍作修剪，疏密打枝。常見(jiàn)對(duì)犬肺、羊肺鑄型時(shí)，灌注肺動(dòng)脈、肺靜脈、支氣管樹(shù)時(shí)常難以保證兩側(cè)肺內(nèi)的管道同時(shí)充盈到相同的程度，常常出現(xiàn)一側(cè)比較密而另一側(cè)比較稀的情況，因此需要稍作修剪。尤其在顯示管道的宏觀或亞宏觀效果時(shí)，更要對(duì)照鑄型前原材料的照片，對(duì)鑄型好的標(biāo)本進(jìn)行修剪和疏密打枝的工作。當(dāng)多個(gè)管道在同一標(biāo)本上（如肺、肝、腎）同時(shí)顯現(xiàn)時(shí)，更應(yīng)當(dāng)通過(guò)修整次要枝條，以便保證各種管道既能同時(shí)顯示，又能表現(xiàn)出相互之間的關(guān)系，使其自然而美觀的顯現(xiàn)。

2.2 鑄型過(guò)程中其他環(huán)節(jié)應(yīng)當(dāng)重視的問(wèn)題

在制作鑄型過(guò)程中，從取材、插管、灌注、硬化、腐蝕、沖洗、干燥、修剪，到最后的封裝。每一個(gè)程序都應(yīng)當(dāng)小心謹(jǐn)慎，否則很可能前功盡棄。以下兩點(diǎn)尤其應(yīng)當(dāng)引起重視。

2.2.1 腐蝕

腐蝕時(shí)可以選擇酸腐蝕法、堿腐蝕法或者自然腐蝕法。筆者制作的標(biāo)本大多選用50%鹽酸作為腐蝕液。僅在牛肺上先利用自然腐蝕，再用50%硫酸腐蝕相結(jié)合的方法。腐蝕的要點(diǎn)是一定要腐蝕徹底，原則是“腐蝕時(shí)間寧長(zhǎng)勿短”。

2.2.2 沖洗

不論應(yīng)用強(qiáng)酸、強(qiáng)堿或是自然腐蝕法，都必須用流水充分沖洗，沖洗完后宜用自來(lái)水或蒸餾水浸泡數(shù)天。每天都要換水，以便中和殘余的酸或堿，如果長(zhǎng)時(shí)間不換水，將會(huì)因霉變而導(dǎo)致標(biāo)本的色澤發(fā)生變化。沖洗時(shí)的原則是必須徹底干凈，“水流壓力寧小勿大”，否則使得標(biāo)本表面細(xì)小的血管被沖斷或者改變?cè)械臉?gòu)型。

[1] 杜曉霞，俞紅賢，劉英，等.1日齡牦牛肺泡毛細(xì)血管的掃描電鏡觀察[J].畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2008，39（3）：355-359.

[2] Du X X，Yu H X，Liu Y，et al. The subpleural pulmonary microvasculature in newborn yak（Bos grunniens）[J].Veterinary Research Communications，2009，33（4）：355-365.

杜曉霞（1980-），女，甘肅慶城人，講師，博士，研究方向:動(dòng)物解剖學(xué)、組織胚胎學(xué)、動(dòng)物生理學(xué).

山東省高等學(xué)?？萍加?jì)劃項(xiàng)目（J11LC63）