崔躍 李欣欣 崔皓哲 徐暢

戒斷對嗎啡成癮大鼠活動性的影響研究

崔躍 李欣欣 崔皓哲 徐暢

目的觀察戒斷對嗎啡成癮大鼠活動性的影響。方法20只大鼠隨機分為對照組和嗎啡組, 每組10只。用條件性位置偏愛實驗(CPP)檢測大鼠成癮及活動性的變化。結(jié)果經(jīng)皮下注射嗎啡7 d 建立大鼠CPP模型, 與對照組比較, 嗎啡組在伴藥箱停留時間增加, 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。自然戒斷7 d 后, 與對照組比較, 嗎啡組穿梭次數(shù)明顯增加, 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義 (P＜0.05)。結(jié)論嗎啡誘導(dǎo)大鼠CPP模型建立成功, 自然戒斷7 d后活動性增強, 提示嗎啡及其運動效應(yīng)之間的關(guān)系, 可能是大鼠覓藥行為的具體表現(xiàn)之一。

嗎啡；條件性位置偏愛；活動性

藥物成癮是一種慢性復(fù)發(fā)性腦疾病, 有其復(fù)雜的神經(jīng)生物學(xué)基礎(chǔ)[1]。成癮物質(zhì)的反復(fù)使用, 可以增強模型動物的運動敏感化, 這是成癮物質(zhì)的共有特征之一[2,3]。動機敏化理論認(rèn)為反復(fù)使用致成癮物質(zhì), 將使與成癮動機有關(guān)的神經(jīng)環(huán)路出現(xiàn)敏化, 進而表現(xiàn)出對成癮藥物的持續(xù)渴求, 成癮藥物導(dǎo)致的行為敏化被認(rèn)為是成癮后復(fù)吸的重要原因之一[3,4]。本研究利用條件性位置偏愛實驗檢測嗎啡自然戒斷對大鼠運動活性的影響?，F(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料 健康雄性SD大鼠20只(由沈陽醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供), 平均體重(225±25)g；鹽酸嗎啡(青島制藥廠有限公司, 中國)。

1.2 方法

1.2.1 分組 大鼠隨機化分為對照組和實驗組, 每組10只,分籠飼養(yǎng), 自由進食飲水。

1.2.2 主要儀器設(shè)備 條件性位置偏愛箱(CPP箱)：CPP箱由兩個規(guī)格相同(長53 cm, 寬30 cm, 高30 cm)的隔音箱組成。中間有擋板, 可以抽拉。擋板底端有小門, 動物可自由穿梭, 測試時用。另有一套無小門擋板, 實驗訓(xùn)練用。其中一個箱子為黑色, 地板為網(wǎng)格狀, 另一個箱子為白色,地板為條紋狀。箱體的上方有攝像頭, 可以記錄動物活動情況。

1.2.3 CPP模型制備及戒斷后運動活性檢測 CPP模型制備分3個階段[5,6]。預(yù)測試階段：建立模型之前, 連續(xù)3 d ,每天8:00, 讓大鼠自由穿梭于兩個箱體15 min(900 s), 第3天記錄大鼠在兩個箱體停留的時間, 確定其天然偏好。以大鼠非天然偏好箱為伴藥箱, 天然偏好箱為非伴藥箱。訓(xùn)練階段：用替代擋板封閉兩箱通道, 嗎啡組動物8:00皮下注射嗎啡(10 mg/kg), 隨即放入伴藥箱30 min；16:00皮下注射等量的生理鹽水, 隨即放非伴藥箱30 min,1次/d。對照組除將嗎啡替換為生理鹽水之外, 其他訓(xùn)練相同。連續(xù)訓(xùn)練6 d 。測試階段：第7天進行訓(xùn)練后測試, 將有小門的擋板置于兩箱之間,未做任何處理的大鼠放入箱內(nèi), 讓其自由活動15 min(900 s),記錄其在右箱(伴藥箱)停留時間和穿梭次數(shù)。位置偏愛指標(biāo)：右箱(伴藥箱)停留時間(Time spent in the white chamber, TW)；運動活性檢測指標(biāo)：大鼠停藥后戒斷1周(第14天)進行運動活性檢測。檢測指標(biāo)為穿梭次數(shù)(Shuttle times, ST),大鼠從一側(cè)箱子移動到另一側(cè)箱子則判定穿梭1次, 累計得到穿梭次數(shù)。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS16.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示, 對方差齊性的指標(biāo)用單因素方差分析, LSD-t檢驗進行均數(shù)間的多重比較；對方差不齊的指標(biāo)采用Kruskal-Wallis非參數(shù)檢驗, Mann-Whitney U法進行兩兩比較的秩和檢驗。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

經(jīng)過CPP訓(xùn)練, 第7天測試, 嗎啡組大鼠在伴藥箱停留時間明顯高于對照組, 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05), 提示嗎啡誘導(dǎo)的大鼠CPP模型建立成功。大鼠停藥后戒斷1周(第14天)進行運動活性檢測, 與戒斷前的活動性比較, 明顯增強, 差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

表1 兩組大鼠嗎啡成癮及戒斷后條件性位置偏愛和運動活性情況比較(±s)

表1 兩組大鼠嗎啡成癮及戒斷后條件性位置偏愛和運動活性情況比較(±s)

注：與對照組比較,aP＜0.05；與第1天比較,bP＜0.05

時間 對照組 時間 嗎啡組右箱停留時間(s) 穿梭次數(shù)(次) 右箱停留時間(s) 穿梭次數(shù)(次)第1天 146.776±30.85 22.7±5.85 第1天 152.004±26.07 26.3±6.85第7天 139.950±18.18 16.6±6.95 第7天 396.330±67.03a 22.1±12.75第14天 143.824±22.62 18.4±4.35 第14天 192.327±87.85 39.3±6.80bF 0.196 2.905 χ2 19.667 12.896 P 0.823 0.072 P 0.000 0.000

3 . 小結(jié)

條件性位置偏愛實驗是用于評價藥物成癮性的經(jīng)典實驗?zāi)Ｐ蚚7], 廣泛用于評價藥物的精神依賴情況。該實驗的基本原理是將實驗動物置于條件性位置偏愛箱的白箱, 并給予精神依賴性藥物, 經(jīng)過幾次訓(xùn)練后, 觀察實驗動物在條件性位置偏愛箱的活動情況。實驗觀察指標(biāo)有位置偏愛指標(biāo), 即伴藥箱停留時間；運動活性指標(biāo), 即穿梭次數(shù), 其檢測結(jié)果與藥物的精神依賴性相關(guān)。

本研究檢測了嗎啡成癮及戒斷后大鼠條件性位置偏愛和運動活性情況, 結(jié)果顯示經(jīng)訓(xùn)練后, 成癮大鼠在伴藥箱停留時間明顯增加。自然戒斷后1周, 其運動活性明顯增強。成癮敏感化理論認(rèn)為, 成癮物質(zhì)可以誘發(fā)運動敏感化, 從而引起強迫性覓藥行為, 進而產(chǎn)生復(fù)吸行為[2,3]。實驗結(jié)果提示了嗎啡及其運動效應(yīng)之間的關(guān)系, 如果能深入研究其內(nèi)在機制, 將對研究成癮后復(fù)吸提供有益的線索。

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Influence research of abstinence on mobility in rats with morphine addiction

CUI Yue, LI Xin-xin, CUI Hao-zhe, et al. School of Basic Medicine of Shenyang Medical College, Shenyang110034, China

ObjectiveTo observe influence of abstinence on mobility in rats with morphine addiction.MethodsA total of20 rats were randomly divided into control group and morphine group, with10 cases in each group. Conditioned place preference (CPP) was applied to detect changes of addiction and mobility of rats.ResultsRats CPP model was established by subcutaneous injection of morphine for7 d. Compared with the control group, the morphine group had increased residence time. Their difference had statistical significance (P＜0.05). After7 d of natural abstinence, the morphine group had obviously more shuttle times than the control group. Their difference had statistical significance (P＜0.05).ConclusionAfter successful CPP model establishment of morphine addiction rats and7 d of natural abstinence, increased mobility indicates that the correlation between morphine and motion effect can be one of the specific manifestations of drug-seeking behavior.

Morphine; Conditioned place preference; Mobility

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.16.190

2015-03-30]

國家自然科學(xué)基金資助(項目編號：81441110)；遼寧省教育廳科學(xué)研究一般項目(項目編號：L2014405)；沈陽醫(yī)學(xué)院博士科研啟動基金(項目編號：20133049)

110034 沈陽醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院