蔣玫, 李磊, 沈新強(qiáng), 許高鵬, 楊杰青

1. 中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院東海水產(chǎn)研究所，上海 200090 2. 上海海洋大學(xué)，上海，203360

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苯并[a]芘和菲對(duì)縊蟶血細(xì)胞DNA損傷的研究

蔣玫1,*, 李磊1, 沈新強(qiáng)1, 許高鵬2, 楊杰青2

1. 中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院東海水產(chǎn)研究所，上海 200090 2. 上海海洋大學(xué)，上海，203360

為研究苯并[a]芘和菲對(duì)縊蟶的毒性效應(yīng)，將縊蟶(Sinonovacula constricta) 分別暴露于濃度為0.45 mg·L-1、0.15 mg·L-1、0.05 mg·L-1苯并[a]芘溶液和0.45 mg·L-1、0.15 mg·L-1、0.05 mg·L-1菲的溶液中，采用單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)(彗星實(shí)驗(yàn))技術(shù)檢測(cè)不同暴露時(shí)間縊蟶血淋巴細(xì)胞的DNA損傷程度，對(duì)照組為清潔海水。結(jié)果顯示，高濃度(0.45 mg·L-1) 苯并[a]芘溶液和(0.45 mg·L-1)菲溶液在短期(7 d) 內(nèi)即可導(dǎo)致縊蟶血細(xì)胞顯著的DNA損傷，并且隨苯并芘[a]和菲濃度的增大和暴露時(shí)間的延長(zhǎng)，DNA損傷程度增加。21 d恢復(fù)實(shí)驗(yàn)后，各濃度組DNA損傷又均有不同程度的恢復(fù)，但中高濃度組(0.45 mg·L-1和0.15 mg·L-1)與對(duì)照組仍顯著性差異。兩種多環(huán)芳烴物質(zhì)對(duì)縊蟶血細(xì)胞的 DNA 損傷作用均存在較顯著時(shí)間-劑量-效應(yīng)關(guān)系。其中，苯并芘[a]對(duì)縊蟶血細(xì)胞的DNA損傷作用要高于菲。

苯并芘[a]和菲；縊蟶；血細(xì)胞；DNA 損傷；單細(xì)胞凝膠電泳； 彗星實(shí)驗(yàn)

多環(huán)芳烴(polycyclicaromatic hydrocarbons，PAHs)是一類典型的疏水性有機(jī)污染物[1]，主要來(lái)源于生物燃料和與化石燃料的不完全燃燒[2-3]。多環(huán)芳烴廣泛存在于環(huán)境介質(zhì)中，含量水平較低，但是可通過(guò)大氣、土壤、水、食物等多種途徑進(jìn)入人體并富集，是誘導(dǎo)人類癌癥的重要環(huán)境污染物質(zhì)之一[4-5]。其中苯并[a]芘(Benzo[a] pyrene，BaP)的致癌性是多環(huán)芳烴中最強(qiáng)的[6]。由于BaP 分布廣泛，性質(zhì)穩(wěn)定，常被視為 PAHs 研究的指示物[7]。菲(phenanthrene，PHE)是一種具有三個(gè)苯環(huán)的，低分子量的最簡(jiǎn)單化學(xué)結(jié)構(gòu)的多環(huán)芳經(jīng)，對(duì)水生生物也有很大毒性，菲在污染場(chǎng)地的濃度水平也較高[8]。因而，菲常用作模式化合物研究相關(guān)的科學(xué)問(wèn)題[9-10]。

雙殼貝類由于分布廣泛，移動(dòng)能力弱，對(duì)污染物具有很強(qiáng)生物富集作用，常被作為海區(qū)污染監(jiān)測(cè)的指示生物[11]。PAHs污染物通過(guò)貝類攝入的水流進(jìn)入鰓絲，在經(jīng)血淋巴循環(huán)到達(dá)各組織器官(主要是消化盲囊)；貝類因代謝PAHs而產(chǎn)生大量的活性中間產(chǎn)物和活性氧類， 這些活性物質(zhì)會(huì)對(duì)生物大分子和組織結(jié)構(gòu)造成損傷，影響細(xì)胞的微核率、肝臟功能和DNA修復(fù)能力[12-13]。貝類細(xì)胞分子毒理學(xué) (DNA損傷)對(duì)于解析污染物的致毒機(jī)理和毒性評(píng)定具有非常重要的意義。目前針對(duì)多環(huán)芳烴對(duì)水生生物DNA損傷的研究也開(kāi)始逐漸得到關(guān)注[14-17]，張曉勇等將馬氏珠母貝暴露于苯并芘[a]中得出血淋巴細(xì)胞DNA受到一定的損傷，血細(xì)胞的 損傷程度隨苯并芘[a]濃度增加而增加[18]，但關(guān)于苯并[a]芘和菲對(duì)貝類的DNA損傷遺傳毒性研究還相對(duì)較少。

彗星試驗(yàn)又名單細(xì)胞凝膠電泳(SCGE)被認(rèn)為是一種簡(jiǎn)便、快速、敏感性高的DNA損傷與修復(fù)的檢測(cè)技術(shù)[14]。本研究以縊蟶為實(shí)驗(yàn)材料，采用單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)(彗星實(shí)驗(yàn))的方法檢測(cè)了苯并[a]芘和菲脅迫對(duì)縊蟶血細(xì)胞的遺傳損傷，探討了DNA損傷作為多環(huán)芳烴污染暴露生物標(biāo)記的可行性，同時(shí)為貝類養(yǎng)殖環(huán)境毒理學(xué)研究和近岸海區(qū)PAHs的污染監(jiān)測(cè)提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法(Materials and methods)

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

實(shí)驗(yàn)用縊蟶取自啟東市黃海灘涂公司縊蟶養(yǎng)殖區(qū)，實(shí)驗(yàn)前暫養(yǎng)一周，貝體平均殼長(zhǎng)(5.90±0.31) cm，殼寬為(1.99±0.11) cm，體重(14.60±2.62) g。實(shí)驗(yàn)用水來(lái)自經(jīng)過(guò)濾的天然海水，鹽度為20～21，pH為8.10～8.40。

實(shí)驗(yàn)所用苯并[a]芘和菲為Sigma公司產(chǎn)品，采用丙酮作為助溶劑溶解BaP和PHE配成儲(chǔ)備液。海水中苯并[a]芘和菲濃度的測(cè)定采用氣相色譜法[19]。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

隨機(jī)選取縊蟶分為4組，對(duì)照組(天然海水、低濃度組、中濃度組和高濃度組(苯并芘[a]和菲溶液)。苯并[a]芘和菲的溶液實(shí)驗(yàn)濃度梯度分別為：0.45 mg·L-1、0.15 mg·L-1、0.05 mg·L-1。每組約40只縊蟶，置于含14 L沙濾海水的玻璃箱(容積30 L)中，24 h連續(xù)充氧，實(shí)驗(yàn)期間水溫為23.60～25.40 ℃。每日100 %換水一次，更換相同濃度的實(shí)驗(yàn)液，及時(shí)清除排泄物和活力不好的貝體，貝類餌料為單獨(dú)培養(yǎng)扁藻，每天定時(shí)定量喂食二次，藻液體積為80 mL，扁藻密度為2×104cell·mL-1，。脅迫實(shí)驗(yàn)進(jìn)行15 d，15 d后將實(shí)驗(yàn)液全部換成清潔沙濾海水進(jìn)行為期6 d的恢復(fù)實(shí)驗(yàn)。分別于實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后的第0、3、7、 15 d和21 d，每個(gè)實(shí)驗(yàn)組采集2只貝類樣品。選取活力好的縊蟶，以潔凈海水洗凈外殼。先用75 %的酒精棉球消毒閉殼肌，再用預(yù)先吸入已消毒的預(yù)冷抗凝劑(8.0 g·L-1檸檬酸三鈉、20.80 g·L-1葡萄糖、22.5 g·L-1NaCl、3.36 g·L-1Na2EDTA、pH=7.5)的無(wú)菌注射器，按抗凝劑：血淋巴為2:1的比例由閉殼肌處抽取血淋巴，在無(wú)菌的試管內(nèi)用5 mL PBS將50 μL血樣稀釋，調(diào)節(jié)細(xì)胞濃度為1.4×107cell·mL-1，取此單細(xì)胞懸液1 mL加入滅菌eppendorf 管，放入冰盒內(nèi)備用。

1.3 彗星實(shí)驗(yàn)

彗星實(shí)驗(yàn)方法參照Singh等[20]的實(shí)驗(yàn)方法并略加改進(jìn)，應(yīng)用細(xì)胞培養(yǎng)板板蓋鋪單層膠的彗星實(shí)驗(yàn)檢測(cè)方式，對(duì)電泳條件進(jìn)行了摸索。制片前用臺(tái)酚藍(lán)染色法測(cè)定細(xì)胞存活率。25 μL 受檢細(xì)胞與8 %的75 μL低熔點(diǎn)瓊脂糖(LMA)混合，鋪于細(xì)胞培養(yǎng)板板蓋的小圓凹槽中，每個(gè)樣品平均加入3個(gè)圓凹槽中作為3個(gè)重復(fù)。待膠凝固后加入4 ℃新配制細(xì)胞裂解液(2.5 mol·L-1NaCl、0.1 mol·L-1EDTA、0.01 mol·L-1Tris、1% 肌氨酸鈉、pH 10、1%曲拉通X-100、10 %二甲亞砜)，浸泡2 h之后用磷酸緩沖液(pH 7.0)浸洗2次，再置于有新配置的堿性電泳緩沖液(0.3 mol·L-1NaOH、1 mmol·L-1EDTA，pH >13)的水平電泳槽中，在4 ℃避光解旋20 min。調(diào)節(jié)電泳液面高度，在300 mA、25 V電壓下電泳5 min。然后用pH 7.5，0.4 mol·L-1的Tris-HCl浸洗2次，每次10 min。加50 μL 的25 μg·mL-1EB 水溶液染色30 min。置熒光顯微鏡下觀察，拍照后進(jìn)行分析。

1.4 數(shù)據(jù)處理

用Scion Image Beta 4.0.2 圖像軟件進(jìn)行分析計(jì)算出尾長(zhǎng)、頭長(zhǎng)、尾長(zhǎng)/頭長(zhǎng)、尾矩、尾DNA 含量(Tail DNA%)等項(xiàng)DNA 損傷指標(biāo)。Tail DNA%是國(guó)際上普遍采用的評(píng)價(jià)指標(biāo)，不受單位影響，因此本實(shí)驗(yàn)利用它作為DNA 損傷的評(píng)價(jià)指標(biāo)。以彗尾長(zhǎng)度/核直徑(TL/D) 值衡量損傷程度，比值小于0.3為1級(jí)損傷或輕微損傷，0.3～0.6 為2級(jí)損傷或中級(jí)損傷，0.6 以上為3級(jí)損傷或嚴(yán)重?fù)p傷[21]。用SPSS 9.0 對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理分析，用單因素方差分析進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)，q 檢驗(yàn)進(jìn)行兩兩比較。

2 結(jié)果(Results)

2.1 DNA損傷指標(biāo)的統(tǒng)計(jì)

隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)，各濃度苯并[a]芘和菲處理組血細(xì)胞彗尾核DNA百分率均呈持續(xù)上升的趨勢(shì)，比較各濃度染毒組與對(duì)照組發(fā)現(xiàn)(圖1和圖2)：實(shí)驗(yàn)初期第3天，各濃度組尾核DNA百分率均與對(duì)照組無(wú)顯著差異，到了實(shí)驗(yàn)第7天后，至染毒時(shí)間末期第15天，中、高濃度組(0.15 mg·L-1和0.45 mg·L-1)對(duì)血細(xì)胞DNA損傷效果顯著(P<0.05), 低濃度組對(duì) DNA 損傷均不顯著?；謴?fù)試驗(yàn)期，各濃度組DNA百分率仍高于對(duì)照組，中、高濃度組與對(duì)照組依然差異性顯著(P<0.05)。

圖1 苯并[a]芘處理組帶彗尾核DNA百分率注：*為與對(duì)照組相比顯著性差異P<0.05Fig. 1 Percentage of damaged DNA with tail treatedby benzo[a]pyreneNote: significant differences from control at the same samplingtime are indicated with an asterisk at P<0.05

圖2 菲處理組帶彗尾核DNA百分率注：*為與對(duì)照組相比顯著性差異P<0.05Fig. 2 Percentage of damaged DNA with tail treatedby phenanthreneNote: significant differences from control at the same samplingtime are indicated with an asterisk at P<0.05

2.2 DNA損傷程度

在苯并[a]芘和菲染毒下的縊蟶血細(xì)胞DNA損傷程度來(lái)看(表1)，隨著處理時(shí)間延長(zhǎng)，3 d 時(shí)中、低濃度(0.15 mg·L-1和0.05 mg·L-1)苯并芘[a]和菲處理組DNA 損傷程度以2級(jí)為主(均小于0.6)，高濃度組則以3級(jí)損傷為主(大于0.6)，損傷率超過(guò)80%； 15 d 后除低濃度組外，其他各處理組DNA損傷程度呈現(xiàn)繼續(xù)上升的趨勢(shì)，造成DNA損傷嚴(yán)重級(jí)別(大于0.6)。與對(duì)照組差異性顯著(P<0.05)，21 d 恢復(fù)實(shí)驗(yàn)以后，各處理組DNA損傷程度均有所緩解，但中、高濃度組(0.15 mg·L-1和0.45 mg·L-1)與對(duì)照組差異性仍十分顯著(P<0.05) 。

表1 處理受損DNA的TL/D值

注：*為與對(duì)照組相比顯著性差異P<0.05, a,b,c,d分別為各縱列相比顯著性差異P<0.05。

Note: significant differences from control at the same sampling time are indicated with an asterisk at P<0.05, a, b, c, d for each column compared with the significant difference in P<0.05, respectively.

2.3 損傷檢測(cè)指標(biāo)間的相關(guān)性

損傷檢測(cè)指標(biāo)間的相關(guān)系數(shù)列于表2。從表2可見(jiàn)，尾長(zhǎng)、TDNA含量、尾長(zhǎng)/核直徑(TL/D)各指標(biāo)間的相關(guān)系數(shù)均有顯著性(P<0.05)。說(shuō)明在本實(shí)驗(yàn)室條件下應(yīng)用Scion Image Beta 4.0.2圖像軟件進(jìn)行分析所得的尾長(zhǎng)、TDNA含量、尾長(zhǎng)/核直徑(TL/D)3個(gè)指標(biāo)值用來(lái)衡量血細(xì)胞DNA損傷具有較好的有效性。

表2 彗星實(shí)驗(yàn)檢測(cè)指標(biāo)間的相關(guān)系數(shù)

2.4 DNA分子形態(tài)學(xué)的影響

在苯并[a]芘和菲染毒15 d后，縊蟶血細(xì)胞核DNA 單細(xì)胞凝膠電泳結(jié)果如圖1所示。圖1a和圖1d顯示對(duì)照組的血細(xì)胞核大小比較均一，為圓形熒光團(tuán)，熒光強(qiáng)度均勻，邊緣光滑，無(wú)拖尾現(xiàn)象，表明細(xì)胞沒(méi)有斷裂。中濃度(0.15 mg·L-1)組的苯并[a]芘和菲染毒后，斷片離頭部向陽(yáng)極方向遷移，形成一個(gè)緊連熒光頭部的尾部，縊蟶血細(xì)胞DNA發(fā)生斷裂(圖1b和圖1e)。高濃度組(0.45 mg·L-1)的菲染毒后，出現(xiàn)一定數(shù)量的凋亡細(xì)胞，彗星頭部很小，尾巴很大且偏圓，如同松鼠尾巴(圖1f)。高濃度組的苯并[a]芘染毒后，出現(xiàn)分散暗淡的尾部，損傷更為嚴(yán)重(圖1f)。

圖1 苯并芘[a]和菲暴露后第15天分別對(duì)溢蟶血細(xì)胞的DNA 損傷作用注：a. 對(duì)照組 b. BaP (0.15 μg·L-1)染毒后15 d c. BaP (0.45 μg·L-1)染毒后15 dd. 對(duì)照組 e. PHE(0.15 μg·L-1)染毒后15 d f. PHE(0.45 μg·L-1)染毒后15 dFig. 1 The DNA damage of hemolymph cell exposed to benzo[a]pyrene and phenanthrene at the fifteenth dayNote: a. The DNA damage of hemolymph cell exposed to solvent control group; b. The DNA damage of hemolymph cell exposed to benzo[a]pyrene (0.15 μg·L-1); c. The DNA damage of hemolymph cell exposed to benzo[a]pyrene (0.45 μg·L-1); d. The DNA damage of hemolymph cell exposed to solvent control group; e. The DNA damage of hemolymph cell exposed tophenanthrene (0.15 μg·L-1); f. The DNA damage of hemolymph cell exposed to phenanthrene (0.45 μg·L-1)

3 討論(Discussion)

大量研究證明持久性有機(jī)污染物進(jìn)入生物體內(nèi)經(jīng)過(guò)I相細(xì)胞色素P450酶系代謝轉(zhuǎn)化為更具極性的代謝中間產(chǎn)物，這些代謝產(chǎn)物在II相代謝酶谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶等催化下與內(nèi)源物質(zhì)分子結(jié)合，加速了代謝產(chǎn)物排出體外的速度；另一方面在代謝過(guò)程中產(chǎn)生大量的自由基，可被體內(nèi)抗氧化防御系統(tǒng)所清除同時(shí)，這些自由基和活性中間產(chǎn)物超過(guò)一定限度時(shí)，可分別與分子發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生氧化性損傷和生成加合物，最終導(dǎo)致DNA鏈斷裂和損傷[22-24]。

苯并[a]芘進(jìn)入動(dòng)物體后被轉(zhuǎn)化成大量的代謝產(chǎn)物，其親水性比苯并[a]芘更強(qiáng)[25]，而這些代謝產(chǎn)物在生物體內(nèi)經(jīng)過(guò)代謝后產(chǎn)生致癌性物質(zhì)——苯并(a)芘二氫二醇(BPDE)，它與DNA共價(jià)結(jié)合形成穩(wěn)定的加合物，從而導(dǎo)致DNA損傷。國(guó)內(nèi)學(xué)者針對(duì)苯并[a]芘對(duì)生物遺傳物質(zhì)DNA的影響做了廣泛的研究。周海龍等以及Liu等[26-27]的研究結(jié)果也顯示，3種典型持久性有機(jī)污染物(多氯聯(lián)苯Aroclor1254、苯并[a]芘和滴滴涕)對(duì)紫貽貝(Mytilusedulis)的鰓、性腺和消化腺各組織細(xì)胞以及櫛孔扇貝血細(xì)胞的DNA 損傷作用均存在明顯的時(shí)間-效應(yīng)和劑量-效應(yīng)關(guān)系。PAHs 代謝過(guò)程中產(chǎn)生的活性氧自由基能攻擊DNA，導(dǎo)致DNA單鏈斷裂或形成不穩(wěn)定的無(wú)嘌呤的加合物[28]。菲能通過(guò)降低細(xì)胞膜的穩(wěn)定性和吞噬能力，繼而對(duì)大海扇蛤(Pectenmaximus)的遺傳和免疫造成不利影響[29]。Oliveria等曾將金梭Lizaaurata短期暴露于菲溶液中，發(fā)現(xiàn)菲溶液濃度由0.1 μg·L-1提高到0.9 μg·L-1時(shí)其對(duì)肝臟DNA的完整性顯著低于對(duì)照組[30]。本次實(shí)驗(yàn)亦發(fā)現(xiàn)經(jīng)不同濃度的苯并[a]芘和菲溶液染毒下，縊蟶血細(xì)胞DNA受到了一定程度的鏈斷裂損傷，其損傷效應(yīng)表現(xiàn)出隨苯并[a]芘和菲濃度的升高，損傷的細(xì)胞數(shù)量增多和損傷程度加重的現(xiàn)象(圖1～圖3)。從表3可見(jiàn)，實(shí)驗(yàn)第3d，對(duì)照組的血細(xì)胞未檢測(cè)到DNA損傷；而中低濃度處理組實(shí)驗(yàn)檢測(cè)到DNA損傷程度集中在2級(jí)；高濃度處理組檢測(cè)到DNA損傷程度則在3級(jí)以上，損傷率超過(guò)80%；而且隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)，帶彗尾核DNA百分率和TL/D值均呈上升趨勢(shì)，DNA 損傷級(jí)別也逐步升高。王春光等報(bào)道的苯并[a]芘可對(duì)馬氏珠母貝(Pinctadamartensi)血細(xì)胞DNA的損傷效應(yīng)也與本實(shí)驗(yàn)相一致[14]。

DNA 損傷是評(píng)價(jià)環(huán)境毒物遺傳毒性的一個(gè)重要參數(shù)。本研究中，隨著苯并[a]芘和菲暴露時(shí)間的增加，兩種污染物在縊蟶體內(nèi)逐漸累積，組織解毒代謝酶受到抑制，誘導(dǎo)大量自由基產(chǎn)生，同時(shí)代謝形成的極性化合物與DNA發(fā)生反應(yīng)，導(dǎo)致DNA鏈斷裂和損傷，從而引發(fā)遺傳毒性。從圖3和表1可見(jiàn)，縊蟶血細(xì)胞暴露于高濃度苯并[a]芘和菲溶液中DNA損傷嚴(yán)重，均表現(xiàn)出不可逆轉(zhuǎn)的遺傳毒性，而中濃度處理組雖啟動(dòng)了DNA損傷修復(fù)功能，但仍造成損傷效應(yīng)，在實(shí)驗(yàn)恢復(fù)期(21 d)，DNA損傷性指標(biāo)與對(duì)照組仍有顯著差異。由此貝類DNA損傷可作為多環(huán)芳烴污染評(píng)價(jià)的毒性效應(yīng)指標(biāo)，亦作為海洋環(huán)境污染的潛在生物標(biāo)志物。

此外，實(shí)驗(yàn)中也發(fā)現(xiàn)相同濃度作用下，苯并[a]芘和菲對(duì)縊蟶血細(xì)胞DNA損傷效應(yīng)趨勢(shì)雖然相同，但相較而言，苯并[a]芘對(duì)縊蟶血細(xì)胞DNA鏈斷裂更為明顯(表1)，表明其對(duì)縊蟶血細(xì)胞的遺傳毒性更顯著。造成這種毒性的差異可能與兩者之間的分子結(jié)構(gòu)及毒性作用機(jī)制有一定關(guān)系，其機(jī)理還需待進(jìn)一步驗(yàn)證和研究。

致謝：本實(shí)驗(yàn)得到了江蘇省啟東市金海岸水產(chǎn)研究所朱善央老師的大力支持和幫助。

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Effects of Benzo[a]pyrene and Phenanthrene on DNA Damage of Hemolymph Cell inSinonovaculaconstricta

Jiang Mei1,*, Li Lei1, Shen Xinqiang1，Xu Gaopeng2，Yang Jie qing2

1. East China Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Shanghai 200090, China 2. Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China

Received 8 February 2015 accepted 8 March 2015

The paper reported the DNA damage effect of Benzo[a]pyrene(BaP) and phenanthrene (PHE) on the calmSinonovaculaconstrictaunder different concentration conditions with the single cell microgel electrophoresis (SCGE) technique. The calm were treated with concentrations (BaP: 0.45, 0.15, 0.05 mg·L-1and PHE: 0.45, 0.15, 0.05 mg·L-1) in control group was 0.00 mg·L-1for 15 days and were removed pollution for 6 days. The result showed the tail DNA percentage (DNA%) and TL/D of the 0.45 mg·L-1groups were significantly different from the control group (P<0.05) after 7 days exposure period. Furthermore, the damage intensity of treated groups increased gradually with respect to the increasing of Bap and PHE. Under the same concentration, the tail DNA% and TL/D increased gradually with the time of exposure. The DNA damage induced by BaP and PHE was very serious under the concentration of 0.45 mg·L-1. There was significant time-nd dose-dependent damage to the hemolymph cells. In addition, the toxic effect of BaP was much more than PHE. The comet assay was proven to be a useful tool for detecting DNA damage induced by PAH in marine hemolymph cells．DNA damage in hemolymph cells of could indicate the effects of BaP and PHE in marine environment as a good biomarker to be used in early warning and monitoring.

benzo[a]pyrene and phenanthrene; Sinonovacula constricta; DNA damage; single cell gel electrophoresis (SCGE); Comet assay;

中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)(2014A02XK01)；農(nóng)業(yè)部應(yīng)對(duì)溢油關(guān)鍵技術(shù)專項(xiàng)(2012-2014)；中央級(jí)公益性科研院所基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)(2014T06)；國(guó)家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)項(xiàng)目(CARS-48)

蔣玫(1973-)，女，研究員，研究方向?yàn)楹Ｑ笊鷳B(tài)環(huán)境和漁業(yè)生態(tài)學(xué)，E-mail: jiangrose73@163.com

10.7524/AJE.1673-5897-20150208001

2015-02-08 錄用日期：2015-03-08

1673-5897(2015)3-281-07

X820.4

A

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