劉 瑋，丁 慧，朱宇涵，師雙雙，黃鴻飛，高 麗，劉宏飛*

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·藥學研究·

左旋多巴/鹽酸芐絲肼復方藥物樹脂制備

劉 瑋1，丁 慧2，朱宇涵2，師雙雙2，黃鴻飛2，高 麗2，劉宏飛2*

目的 制備左旋多巴/鹽酸芐絲肼復方藥物樹脂并對影響因素進行考察。方法 采用靜態(tài)法制備藥物樹脂復合物，對制備過程中的影響因素進行探究。采用高效液相色譜法，分別建立藥物和藥物樹脂的穩(wěn)定性考察方法。結(jié)果 影響因素研究表明，藥物樹脂的制備受藥物濃度、溫度和溶劑濃度的影響。色譜圖顯示，左旋多巴和鹽酸芐絲肼在一定條件下出現(xiàn)降解峰，而左旋多巴樹脂和鹽酸芐絲肼樹脂均無降解。結(jié)論 藥物樹脂有一定的緩釋效果。采用藥物樹脂技術(shù)后，能明顯提高藥物的穩(wěn)定性。

左旋多巴；鹽酸芐絲肼；離子交換樹脂；穩(wěn)定性

0 引言

左旋多巴透過血腦屏障進入腦內(nèi)，經(jīng)多巴脫羧酶轉(zhuǎn)化成多巴胺，增加大腦紋狀體中多巴胺含量，從而成為目前最有效的治療帕金森病(PD)的藥物，被譽為PD藥物治療的“金標準”[1]。但是左旋多巴吸收后，只有1%透過血腦屏障進入腦內(nèi)。為減少其外周不良反應(yīng)，可同時配伍服用多巴脫羧酶抑制劑鹽酸芐絲肼，可減少外周多巴胺的生成，使左旋多巴較大量地進入腦內(nèi)，轉(zhuǎn)化為多巴胺而生效。左旋多巴和鹽酸芐絲肼都含有2～3個酚羥基，非常不穩(wěn)定，放置在空氣中，易氧化分解，在水溶液中更不穩(wěn)定，在空氣中露光放置，迅速變黃。左旋多巴在堿性范圍，尤其當pH>8.5時，幾乎瞬時分解。

離子交換樹脂分子結(jié)構(gòu)中的解離酸性或堿性基團可以通過離子鍵與荷正電或荷負電藥物結(jié)合形成聚合物鹽，供口服或其他非注射途徑給藥，穩(wěn)定釋藥速度、提高生物利用度等[2-3]，是國內(nèi)外研究的熱點領(lǐng)域，有力地推動了制劑學的發(fā)展[4]。

由于左旋多巴和鹽酸芐絲肼均可離子化溶解，有望采用離子交換樹脂技術(shù)研制液體緩釋混懸劑。并且如制備成藥物樹脂混懸液，則由于大部分藥物存在于樹脂內(nèi)部，能夠明顯提高穩(wěn)定性[5]。本研究制備了左旋多巴/鹽酸芐絲肼復方藥物樹脂，并進行了體外含量測定及溶出實驗，為進一步制備液體緩釋混懸液進行前期研究。

1 試藥與儀器

左旋多巴(隨州市紅旗化工有限公司)；鹽酸芐絲肼(隨州市紅旗化工有限公司)；強酸性陽離子交換樹脂Amberlite IRP69(德國Rohm & Hass公司美國dow)；UV-2401PC紫外可見光分光光度計(上海欣茂儀器有限公司)；電子天平(德國 Sartorius)；高效液相色譜儀(日本島津)。

2 實驗方法

2.1 藥物樹脂復合物的制備[6-7]

2.1.1 離子交換樹脂的預(yù)處理 熱水清洗樹脂至洗滌水不帶褐色為止。再以乙醇或其他溶劑浸泡以除去吸附的少量有機物質(zhì)。將樹脂于水中浸泡0.5 h后，裝柱，以1 mol/L HCl沖洗至pH=0,然后用水沖洗至中性，再以1 mol/L NaOH沖洗至pH=14，然后用水洗至中性，再以1 mol/L HCl沖洗至pH=0，然后用水反復洗至中性，干燥備用。

2.2 藥物樹脂制備的影響因素考察

2.2.1 左旋多巴樹脂制備影響因素考察 溫度影響：取100 mg樹脂加至100 mL濃度為0.5 mg/mL的左旋多巴(溶解在0.001 mol/L HCl溶液)溶液中，分別在25、30、35 ℃下磁力攪拌，以藥物濃度對時間作圖。藥物濃度影響：取100 mg樹脂，分別加至100 mL 濃度為0.3、0.5、0.7 mg/mL的左旋多巴(溶解在0.001 mol/L HCl溶液)溶液中，在20 ℃下磁力攪拌，以藥物濃度對時間作圖。鹽酸溶液濃度的影響：取100 mg樹脂加至100 mL濃度為0.5 mg/mL的左旋多巴溶液(溶解在0.001、0.005、0.01 mol/L HCl溶液)中，在20 ℃下磁力攪拌，以藥物濃度對時間作圖。

2.2.2 鹽酸芐絲肼樹脂制備影響因素考察 藥物濃度的影響：取100 mg樹脂分別加至100 mL濃度為0.3、0.5、0.7 mg/mL的鹽酸芐絲肼溶液中，在15 ℃下磁力攪拌，以藥物濃度對時間作圖。溫度的影響：取100 mg樹脂加入100 mL濃度為0.5 mg/mL的鹽酸芐絲肼溶液中，在15、20、25 ℃下磁力攪拌。取樣100 min，測其吸光度A。以藥物濃度對時間作圖。

2.4 藥物樹脂的釋放試驗 按照釋放度測定法(中國藥典2010年版二部附錄XD第一法)，以0.15 mol/L NaCl溶液50 mL為釋放介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為50 r/min，溫度37 ℃。依法操作，每10 min取樣，測其吸光度A，及時補加同溫度、同體積的相應(yīng)介質(zhì)，以釋藥百分率對時間作圖。

以0.15 mol/L NaCl溶液100 mL為釋放介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為50 r/min，溫度37 ℃。依法操作，分別于1、2、4、6、8、10、15、20 min取樣，測其吸光度A，及時補加同溫度、同體積的相應(yīng)介質(zhì)，以釋藥百分率對時間作圖。

2.5 藥物樹脂的穩(wěn)定性考察

2.5.1 左旋多巴的穩(wěn)定性試驗[11]分別在酸性、堿性、氧化條件下，對左旋多巴原料藥和左旋多巴樹脂進行穩(wěn)定性考察。使用C18色譜柱，甲醇-水(2.5∶97.5)為流動相，檢測波長280 nm，柱溫30 ℃，流速1 mL/min，對左旋多巴進行檢查。氧化破壞：取0.1 mg/mL左旋多巴溶液10 mL，加入30% H2O25滴，放置3 h。氧化破壞空白對照：取水10 mL，滴加30% H2O25滴，即得。堿破壞：取左旋多巴2 mg，置量瓶中，加入1 mol/L NaOH至10 mL，放置3 h，加入1 mol/L HCl 10 mL。酸破壞：取左旋多巴2 mg，置量瓶中，加入1 mol/L HCl至10 mL，放置3 h，加入1 mol/L NaOH 10 mL。酸堿破壞空白對照：取1 mol/L HCl 5 mL和1 mol/L NaOH 5 mL搖勻即得。

2.5.2 鹽酸芐絲肼的穩(wěn)定性試驗 分別在堿性、光照、高溫條件下，對左旋多巴原料藥和左旋多巴樹脂進行穩(wěn)定性考察。使用C18色譜柱，以三氟醋酸-甲醇-水(1∶20∶1 000)為流動相，檢測波長為220 nm，對鹽酸芐絲肼進行檢查[12]。堿破壞：取鹽酸芐絲肼3 mg，置量瓶中，加入1 mol/L NaOH至10 mL，放置20 h，次日加入1 mol/L HCl 10 mL。光破壞：取0.3 mg/mL鹽酸芐絲肼溶液10 mL，置于紫外燈下光照20 h。熱破壞：取0.3 mg/mL鹽酸芐絲肼溶液10 mL，置于60 ℃水浴鍋加熱1 h。

3 結(jié)果

3.1 藥物樹脂制備的影響因素

3.1.1 左旋多巴樹脂制備影響因素考察 溫度影響結(jié)果見圖1、表1，溫度升高，載藥量增加，藥物利用率增加。

圖1 溫度對靜態(tài)離子交換的影響

T(℃)253035Q∞0．15420．15480．1794E(%)3233．535．2

藥物濃度影響結(jié)果見圖2、表2，隨著藥物濃度增加，載藥量略有增加，藥物利用率下降。

圖2 藥物濃度對靜態(tài)離子交換的影響

C0(mg/mL)0．36120．48520．6516Q∞0．16920．16990．1705E(%)46．83326

鹽酸溶液濃度的影響結(jié)果見圖3、表3，鹽酸溶液濃度增加，載藥量增加，藥物利用率增加。

圖3 鹽酸溶液濃度對靜態(tài)離子交換的影響

鹽酸濃度(mol/L)0．0010．0050．01Q∞0．16990．18100．2431E(%)3338．845．7

3.1.2 鹽酸芐絲肼樹脂制備影響因素考察 藥物濃度的影響結(jié)果見圖4、表4，隨著藥物濃度增加，載藥量增加，藥物利用率下降。

圖4 藥物濃度對靜態(tài)離子交換的影響

C0(mg/mL)0．31600．50140．6375Q∞0．29300．42080．4676E(%)92．7283．9373．35

溫度的影響結(jié)果見圖5、表5，溫度升高，載藥量減小，藥物利用率減小。

3.2 藥物樹脂的含量測定 計算得左旋多巴藥物樹脂Q=17.45%，鹽酸芐絲肼藥物樹脂Q=13.763%，則左旋多巴藥物樹脂含量為17.45 mg(左旋多巴)/100 mg(藥物樹脂)。鹽酸芐絲肼藥物樹脂含量為13.763 mg(鹽酸芐絲肼)/100 mg(藥物樹脂)。

圖5 溫度對靜態(tài)離子交換的影響

T(℃)152025Q∞0．42080．41760．3982E(%)83．9383．5880．91

3.3 藥物樹脂的釋放試驗 藥物樹脂有一定緩釋效果，但其釋藥較快，不能達到理想的緩釋效果。還需要在樹脂外用合適的阻滯材料包衣以獲得更好的緩釋效果。見圖6、圖7。

3.4 藥物樹脂的穩(wěn)定性考察

3.4.1 左旋多巴的穩(wěn)定性試驗 見圖8。由左旋多巴原料藥和左旋多巴樹脂的色譜圖看出，左旋多巴在酸性、堿性、氧化條件下均有降解峰，而左旋多巴樹脂無降解峰。故左旋多巴樹脂比左旋多巴原料藥穩(wěn)定。

圖6 左旋多巴樹脂釋藥曲線

圖7 鹽酸芐絲肼樹脂釋藥曲線

圖8 左旋多巴溶液色譜圖

3.4.2 鹽酸芐絲肼的穩(wěn)定性試驗 見圖9。由鹽酸芐絲肼原料藥和鹽酸芐絲肼樹脂的色譜圖看出，鹽酸芐絲肼在堿性、光照、高溫條件下均有降解峰，而鹽酸芐絲肼樹脂均無降解峰。故鹽酸芐絲肼樹脂比鹽酸芐絲肼原料藥穩(wěn)定。

以上結(jié)果表明，采用藥物樹脂技術(shù)后，能明顯提高藥物的穩(wěn)定性，從而為制備藥物樹脂緩釋混懸液奠定了良好的基礎(chǔ)。分析原因：形成藥物樹脂復合物后，大部分藥物存在于藥物樹脂內(nèi)部，與外界形成了隔離，從而保護藥物免受外界降解。

4 討論

對靜態(tài)離子交換而言，制備的最佳工藝應(yīng)具備載藥量高、藥物利用率高的特點。由藥物樹脂制備影響因素結(jié)果中可以看出，藥物溶液濃度、反應(yīng)溫度和采用的鹽酸溶液濃度均對制備有明顯的影響。對于左旋多巴，隨著藥物濃度增加，載藥量增加，藥物利用率下降。但由結(jié)果可知當濃度從0.3 mg/mL增至0.7 mg/mL時，載藥量只有輕微上升，但藥物利用率下降較大，表明0.3 mg/mL時，已近似達到飽和載藥量，故應(yīng)選擇適中濃度的藥物溶液進行制備。溫度升高，載藥量增加，藥物利用率增加，所以應(yīng)采用較高溫度；鹽酸溶液濃度增加，載藥量增加，藥物利用率增加，所以應(yīng)采用較高濃度的鹽酸溶液，但不能過高，以防氫離子與藥物競爭進入樹脂。

圖9 鹽酸芐絲肼溶液色譜圖

對于鹽酸芐絲肼，隨著藥物濃度增加，載藥量增加，藥物利用率下降。綜合考慮載藥量和藥物利用率，應(yīng)選擇適中濃度的藥物溶液進行制備。溫度升高，載藥量減小，藥物利用率減小。故應(yīng)盡可能選擇較低溫度。

左旋多巴和鹽酸芐絲肼藥物樹脂體外釋放度考察結(jié)果顯示，藥物樹脂釋藥較快，這表明單純依靠藥物樹脂不能獲得足夠的緩釋效果，如需制備緩釋混懸劑，則需要進一步的包衣操作。

由鹽酸芐絲肼原料藥和鹽酸芐絲肼樹脂的色譜圖看出，鹽酸芐絲肼在堿性、光照、高溫條件下均有降解峰，而鹽酸芐絲肼樹脂均無降解峰。故鹽酸芐絲肼樹脂比鹽酸芐絲肼原料藥穩(wěn)定。以上結(jié)果表明，采用藥物樹脂技術(shù)后，能明顯提高藥物的穩(wěn)定性，從而為制備藥物樹脂緩釋混懸液奠定了良好的基礎(chǔ)。分析原因：形成藥物樹脂復合物后，大部分藥物存在于藥物樹脂內(nèi)部，與外界形成了隔離，從而保護藥物免受外界降解。

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Preparation of levodopa/benserazide hydrochloride compound drug resins

LIU Wei1,DING Hui2,ZHU Yu-han2,SHI Shuang-shuang2,HUANG Hong-fei2,GAO Li2,LIU Hong-fei2*

(1.Department of Pharmacy,Affiliated Hospital of Jiangsu University，Jiangsu 212001,China;2.Department of Pharmacy,Jiangsu University,Jiangsu 212013,China)

Objective To prepare the levodopa (L-dopa)/benserazide hydrochloride compound drug resins and to investigate the influence factors (temperature,drug concentration,particle size,efflux speed).Methods The drug resins were made by bath method and affecting factors during the process of preparation were studied.Studies on the stabilities of drugs and drug resins were carried out by HPLC.Results The preparation of drug resins was influenced by particle size of resins,drug concentration,reaction temperature and solvent concentration.In certain conditions,the degradation peaks were found in the chromatograms of L-dopa and benserazide hydrochloride,and the drug resins were not degraded.Conclusion The drug resin technology can greatly improve the stability of the drug and the drug resin has certain sustained-release effects.

L-dopa;Benserazide hydrochloride;Ion exchange resin;Stability

2015-03-24

1.江蘇大學附屬醫(yī)院藥劑科，江蘇 212001；2.江蘇大學藥學院，江蘇 212013

2015年江蘇省大學生實踐創(chuàng)新訓練計劃

10.14053/j.cnki.ppcr.201511020

*通信作者