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ASO測(cè)定陽(yáng)性在診斷溶血性鏈球菌感染中的臨床意義

馬春利

(陜西省寶雞市人民醫(yī)院 兒科, 陜西 寶雞, 721000)

關(guān)鍵詞:溶血性鏈球菌感染; 抗鏈球菌溶血素O; 抗DNA酶B

兒童感染A族鏈球菌(GAS)后，可引起上呼吸道感染、猩紅熱、風(fēng)濕熱、皮膚感染、腎小球腎炎和風(fēng)濕性心臟病等。GAS感染后可產(chǎn)生多種外毒素和侵襲性酶，嚴(yán)重者可導(dǎo)致中毒性休克綜合征(TSS)，后者病死率高達(dá)20%～30%[1], 嚴(yán)重危及患兒健康和生命安全。A族溶血性鏈球菌感染后，在細(xì)胞外產(chǎn)生抗鏈球菌溶血素O(ASO)和抗DNA酶B抗體[2]。測(cè)定血清中相應(yīng)的ASO等抗體滴度，能為臨床明確診斷GAS感染提供依據(jù)。

1資料與方法

1.1　一般資料

收集本院2013年5月—2014年12月明確診斷為鏈球菌感染的137例患兒的臨床資料，依據(jù)各類型疾病相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)對(duì)患兒進(jìn)行分組。其中急性風(fēng)濕熱組29例：男17例，女12例，年齡1～14歲，平均(6.53±2.18)歲；急性咽炎、扁桃體炎組36例：男19例，女17例，年齡2～12歲，平均(7.13±2.05)歲；急性腎小球腎炎組35例：男18例，女17例，年齡3～14歲，平均(7.29±2.24)歲；風(fēng)濕性心臟病組37例(活動(dòng)期20例，非活動(dòng)期17例)：男18例，女19例，年齡2～13歲，平均(6.41±2.56)歲。各組患者性別、年齡等資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.2　檢測(cè)方法

① 咽拭子培養(yǎng)：用棉簽取患兒咽喉部分泌物送檢; ② ASO測(cè)定：抽取外周靜脈血3 mL, 經(jīng)高速離心后取血清待檢。采用免疫散射比濁法測(cè)定ASO滴度，正常值<223 U/mL[3]。本研究選用BNⅡ特種蛋白分析儀(西門(mén)子公司)，嚴(yán)格按標(biāo)準(zhǔn)規(guī)程進(jìn)行操作; ③ 抗DNA 酶B 檢測(cè)：采用微量中和法，滅活血清后3倍稀釋，加入DNA 酶B 抗原溫育15 min，然后加甲基綠-DNA 底物，置入溫箱24 h后，根據(jù)底物顏色消退程度確定抗DNA 酶B 抗體的滴度。采用美國(guó)心臟病學(xué)會(huì)推薦的標(biāo)準(zhǔn)[4]，間隔2 次測(cè)定有2個(gè)滴度的抗體升高即可診斷陽(yáng)性?？笵NA 酶B 檢測(cè)陽(yáng)性值為7～18 歲≥240 U/mL, 2～6歲≥60 U/mL。本研究試劑由廣東省心血管病研究所風(fēng)濕熱鏈球菌實(shí)驗(yàn)室提供；④炎癥指標(biāo)：抽取外周靜脈血檢測(cè)血常規(guī)、CRP及紅細(xì)胞沉降率(ESR)。

2結(jié)果

2.1　不同檢測(cè)方法診斷溶血性鏈球菌感染陽(yáng)性率的比較

咽拭子培養(yǎng)陽(yáng)性率、ASO陽(yáng)性率、抗DNA酶B陽(yáng)性率及聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性率呈依次增高趨勢(shì)，各種檢測(cè)方法結(jié)果陽(yáng)性率比較均有顯著差異(P<0.05), 且檢測(cè)方法不同，對(duì)相關(guān)溶血性鏈球菌感染疾病的檢測(cè)陽(yáng)性率不同，見(jiàn)表1。

表1　咽拭子培養(yǎng)、ASO與抗DNA酶B檢測(cè)陽(yáng)性率觀察[n(%)]

2.2　ASO和抗DNA酶B 檢測(cè)抗體高峰及抗體滴度持續(xù)時(shí)間

在GAS 感染后，ASO抗體反應(yīng)高峰時(shí)間、抗體滴度持續(xù)時(shí)間分別為(4.28±1.05)d和(52.38±4.08)d，均明顯低于抗DNA酶B檢測(cè)的(5.47±1.36)d和(163.06±15.16)d，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

2.3　炎癥指標(biāo)檢測(cè)

137例鏈球菌感染患兒炎癥指標(biāo)檢測(cè)中, C反應(yīng)蛋白(CRP)為(34.16±6.45) g/L, 血沉(ESR)(18.06±4.87) mm/h, 白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)為(10.76±2.34)×109/L, 中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)為(6.29±2.63)×109/L。

3討論

GAS感染率高，全球每年約有6 億人口發(fā)生鏈球菌感染性咽喉炎，皮膚感染例數(shù)高達(dá)1億[5]。鏈球菌感染后通過(guò)變態(tài)反應(yīng)可引起風(fēng)濕熱和腎小球腎炎, GAS感染后可產(chǎn)生多種外毒素和侵襲性酶，部分患兒感染侵襲性GAS, 可因TSS發(fā)生死亡[6]。因此應(yīng)早期檢測(cè)、明確診斷GAS 感染，及時(shí)進(jìn)行病因治療，以改善患兒預(yù)后。

抗鏈球菌溶血素O(ASO)測(cè)定是目前檢測(cè)GAS 感染的常用血清學(xué)檢測(cè)方法。β溶血性鏈球菌分為20個(gè)組，其中鏈球菌A、C、G族均可引起ASO升高[7]; ASO測(cè)定陽(yáng)性率受干擾的因素較多，急慢性肝炎、高脂血癥、腎病綜合征時(shí)可出現(xiàn)非特異性ASO 增高；當(dāng)血清標(biāo)本發(fā)生溶血、或保存不當(dāng)被細(xì)菌污染后, ASO滴度也可發(fā)生改變[8]。目前ASO測(cè)定采用微量特定蛋白免疫散射比濁法，靈敏度相對(duì)較低，可導(dǎo)致部分患者漏檢[9]。本組數(shù)據(jù)中，ASO陽(yáng)性率為40.15%, 其中急性風(fēng)濕熱組、急性咽炎、扁桃體炎組、急性腎小球腎炎組、風(fēng)濕性心臟病活動(dòng)期組和非活動(dòng)期組檢測(cè)陽(yáng)性率分別為55.17%、22.22%、60.00%、45.00%、5.88%, 數(shù)據(jù)說(shuō)明ASO測(cè)定陽(yáng)性率在診斷溶血性鏈球菌感染中的有較高的臨床意義。

微量中和法檢測(cè)GAS抗DNA酶B抗體是近年來(lái)開(kāi)始的一種新方法，對(duì)測(cè)定鏈球菌感染具有較高的特異性和敏感性[10]。GAS細(xì)胞外產(chǎn)物脫氧核糖核酸B具有較強(qiáng)的抗原性，當(dāng)機(jī)體感染GAS后，抗DNA酶B升高，且抗DNA酶B不受肝功能、血脂水平及血清標(biāo)本污染等因素的影響，具有良好的穩(wěn)定性，檢測(cè)陽(yáng)性率較高[11]。本研究中抗DNA 酶B陽(yáng)性率為59.12%，其中急性風(fēng)濕熱組、急性咽炎、扁桃體炎組、急性腎小球腎炎組、風(fēng)濕性心臟病活動(dòng)期組和非活動(dòng)期組檢測(cè)陽(yáng)性率分別為68.97%、33.33%、82.86%、85.00%、17.65%。

ASO和抗DNA酶B有不同的抗體動(dòng)力學(xué)，因此各檢測(cè)方法中抗鏈球菌抗體中滴度高峰及維持陽(yáng)性時(shí)間不一[12]。GAS感染2周后開(kāi)始出現(xiàn)ASO, 3～5周達(dá)高峰，抗體高滴度持續(xù)時(shí)間約2個(gè)月?？笵NA酶B抗體反應(yīng)高峰出現(xiàn)時(shí)間遲，抗體滴度持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，二者之間可作為梯度檢測(cè)，取到聯(lián)合互補(bǔ)作用。本研究結(jié)果還顯示，聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性率72.26%, 其中各組檢測(cè)陽(yáng)性率分別為89.66%、52.78%、94.29%、90.00%、17.65%。由此表明ASO聯(lián)合抗DNA酶B檢測(cè)能顯著提高GAS感染檢測(cè)陽(yáng)性率。

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收稿日期:2015-01-20

中圖分類號(hào):R 556

文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A

文章編號(hào):1672-2353(2015)17-188-02

DOI:10.7619/jcmp.201517071