葛振民 馬樞 賈曉青

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·臨床研究·

甲硫氨酸對(duì)抗強(qiáng)脈沖噪聲致聾作用的觀察

葛振民 馬樞 賈曉青

目的 探討口服甲硫氨酸對(duì)抗強(qiáng)脈沖噪聲致聾的預(yù)防作用。方法 選擇某部健康男性軍人203例作為受試者，隨機(jī)分為2組：試驗(yàn)組113例和對(duì)照組90例。噪聲暴露前2組分別給予口服甲硫氨酸片和安慰劑，用法：1 500 mg/d×3 d。2組受試者噪聲暴露前、后均行純音測聽、聽性腦干反應(yīng)測聽檢查，對(duì)檢查結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果 所有受試者噪聲暴露前后聽力均有改變，2組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 噪聲暴露前口服甲硫氨酸片能有效減輕強(qiáng)脈沖噪聲暴露后耳聾的發(fā)生。(中國眼耳鼻喉科雜志，2015，15：41-43)

甲硫氨酸；噪聲性聾；聽閾

噪聲性聾(noise-induced hearing loss, NIHL)是指生產(chǎn)、生活以及軍事活動(dòng)中因接觸噪聲刺激所引起的感音神經(jīng)性聽力減退，在世界范圍內(nèi)都是一個(gè)重要的公共健康問題。大量的研究與觀察發(fā)現(xiàn)，氧應(yīng)激是導(dǎo)致耳蝸毛細(xì)胞死亡引起噪聲性聾發(fā)生的重要機(jī)制[1]，而且動(dòng)物實(shí)驗(yàn)也已經(jīng)證實(shí)，抗氧化劑對(duì)噪聲性聾具有明確的保護(hù)作用[2-3]。本研究旨在觀察口服甲硫氨酸片對(duì)抗強(qiáng)脈沖噪聲致聾的作用。

1 資料與方法

1.1 對(duì)象與分組 選擇某部健康男性軍人203例作為受試者，隨機(jī)分為2組：試驗(yàn)組113例和對(duì)照組90例。2組受試者年齡為19～35歲，平均(21.5±7.2)歲，既往均無明確噪聲接觸史，無聽力減退、耳部疾病或其他影響聽力的疾病(如高血壓、糖尿病、耳毒性藥物使用等)史。

1.2 方法 2組受試者于噪聲接觸(自動(dòng)武器實(shí)彈射擊訓(xùn)練)前3 d分別給予口服甲硫氨酸片和安慰劑。試驗(yàn)組給予甲硫氨酸片，1 500 mg/d；對(duì)照組給予等量安慰劑，2組均連續(xù)給藥3 d。噪聲接觸前及接觸后1、7 d分別行純音測聽、聽性腦干反應(yīng)(auditory brain response, ABR)測聽檢查。

1.2.1 純音測聽 由同一名檢查者按國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的測試方法，對(duì)每位受試者進(jìn)行0.5、1、2、4 kHz頻率的常規(guī)純音測聽。儀器采用丹麥生產(chǎn)的MadsenOB 922型臨床聽力計(jì)，測試在環(huán)境噪聲<25 dB專用隔聲室內(nèi)進(jìn)行。

1.2.2 ABR測聽 ABR測試儀器選用日本光電誘發(fā)電位儀。測試在隔聲屏蔽室進(jìn)行，記錄電極置于顱頂，參考電極置于同側(cè)乳突處，接地電極置于前額發(fā)際。短聲刺激，帶通濾波100～3 000 Hz，分析時(shí)間10 ms，疊加1 000次。刺激強(qiáng)度從70 dB nHL開始，以10 dB nHL級(jí)依次遞減，以能引出可重復(fù)記錄到波Ⅴ的最小聲強(qiáng)作為ABR波Ⅴ閾值。測試指標(biāo)：①Ⅰ-Ⅴ波間期；②波Ⅴ閾值。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用配對(duì)t檢驗(yàn)分析同組試驗(yàn)前后差異，t檢驗(yàn)分析組間差異。所有檢測結(jié)果使用SPSS11.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。

2 結(jié)果

2組受試者噪聲暴露前、暴露后1、7 d聽閾，ABR I-V波間期結(jié)果比較見圖1和圖2。由圖可見，噪聲暴露前聽閾、ABR I-V波間期在2組之間差異不顯著(P>0.05)，但2組之間在噪聲暴露后1 d差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，7 d差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；同時(shí)顯示，與各自噪聲暴露前相比較，聽閾、ABR I-V波間期，噪聲暴露后1 d實(shí)驗(yàn)組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，對(duì)照組差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；噪聲暴露后7 d實(shí)驗(yàn)組無顯著差異(P>0.05)，對(duì)照組存在顯著差異(P<0.05)。

圖1. 2組受試者暴露前后聽閾比較

3 討論

研究已經(jīng)證實(shí)，多種機(jī)制參與噪聲暴露后耳聾的發(fā)生，包括耳蝸血流減少、谷氨酸的興奮毒性、鈣離子平衡改變及氧應(yīng)激的產(chǎn)生等[4]，臨床主要表現(xiàn)為聽覺敏感度下降和聽閾改變。強(qiáng)脈沖噪聲暴露可引起耳蝸血流的劇烈變化和高代謝活動(dòng)，產(chǎn)生過多的活性氧和活性氮等自由基，超過了細(xì)胞抗氧化系統(tǒng)的清除能力，蓄積的活性氧和活性氮等自由基損害DNA、脂質(zhì)和蛋白質(zhì)，從而引起耳蝸細(xì)胞的壞死或凋亡，證實(shí)氧應(yīng)激引起耳蝸毛細(xì)胞死亡是強(qiáng)脈沖噪聲導(dǎo)致耳聾發(fā)生的重要機(jī)制[1，5]。同時(shí)，許多研究證實(shí)使用抗氧化劑能夠調(diào)節(jié)耳蝸抗氧化狀態(tài)，減輕噪聲性聾和耳蝸毛細(xì)胞損傷，具有保護(hù)聽力的作用[4，6-8]，進(jìn)一步證明了氧應(yīng)激在噪聲性聾發(fā)生中的作用，也提示抗氧化劑能夠有效預(yù)防噪聲性聾。本研究主要觀察口服甲硫氨酸片對(duì)抗強(qiáng)脈沖噪聲致聾的作用。

甲硫氨酸片為氨基酸類藥，是體內(nèi)膽堿生物合成的甲基供體，釋放出活性甲基，阻斷自由基的連鎖反應(yīng)，保護(hù)抗氧化酶的活性；同時(shí)還能夠增加還原型谷胱甘肽的活性，增加機(jī)體抗氧化能力，通過抗氧化機(jī)制可發(fā)揮預(yù)防噪聲性聾的作用[2]。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)已經(jīng)證實(shí)抗氧化劑甲硫氨酸對(duì)噪聲、順鉑和氨基糖苷類藥物引起的聽力減退具有保護(hù)作用。Kopke等[9]利用沙鼠研究發(fā)現(xiàn)，噪聲暴露前、后或暴露后7 h靜脈使用甲硫氨酸可減輕永久性閾移和耳蝸外毛細(xì)胞死亡。許多研究者應(yīng)用小鼠、豚鼠也得到了相同的結(jié)果。本研究發(fā)現(xiàn)，強(qiáng)脈沖噪聲暴露前3 d給予甲硫氨酸片1 500 mg/d，能有效減輕強(qiáng)脈沖噪聲暴露對(duì)聽力的損傷，而且噪聲暴露后7 d，試驗(yàn)組內(nèi)及與對(duì)照組之間仍有顯著差異，提示甲硫氨酸對(duì)聽力的保護(hù)作用在停止用藥后仍可持續(xù)一段時(shí)間，與Claussen等[10]利用沙鼠的實(shí)驗(yàn)研究結(jié)論相一致。我們推測甲硫氨酸能直接清除自由基，保持過氧化氫酶、谷胱甘肽還原酶、超氧化物歧化酶的水平，阻止耳蝸細(xì)胞凋亡，可能是其有效對(duì)抗強(qiáng)脈沖噪聲致聾的作用機(jī)制之一。

我們前期的研究已經(jīng)證實(shí)，作為還原型谷胱甘肽補(bǔ)充物前體N-乙酰半胱氨酸能夠減輕強(qiáng)脈沖噪聲對(duì)聽力的損害[7]，臨床驗(yàn)證了還原型谷胱甘肽參與強(qiáng)脈沖噪聲致暫時(shí)性閾移主要的細(xì)胞內(nèi)抗氧化途徑。Yamasoba等[11]研究發(fā)現(xiàn)，噪聲暴露能夠改變耳蝸還原型和氧化型谷胱甘肽的比例，氧化型谷胱甘肽增加，還原型谷胱甘肽減少，而前者參與活性氧引起的耳蝸細(xì)胞損害。Campbell等[12]研究證實(shí)，甲硫氨酸能減輕順鉑引起的谷胱甘肽還原酶活性降低，預(yù)防順鉑對(duì)聽力的損傷。本研究發(fā)現(xiàn)，預(yù)服甲硫氨酸片在強(qiáng)脈沖噪聲暴露后7 d仍具有聽力保護(hù)作用，推測甲硫氨酸通過后期修飾，硫化為半胱氨酸的中間物腺苷甲硫氨酸，增加還原型谷胱甘肽水平發(fā)揮抗氧化作用，也可能是其減輕強(qiáng)脈沖噪聲致聽力損傷的作用機(jī)制。

目前，甲硫氨酸已經(jīng)安全地應(yīng)用于人類的營養(yǎng)研究、腫瘤成像，近期在接受放療和順鉑化療的頭頸部腫瘤患者中開展了I期臨床試驗(yàn)[13]。幾種抗氧化劑也已經(jīng)開始了預(yù)防噪聲性聾的臨床試驗(yàn)，包括：甲硫氨酸，維生素A、C、E和鎂劑，N-乙酰半胱氨酸以及依布硒[10]。本研究證實(shí)了僅在強(qiáng)脈沖噪聲暴露前應(yīng)用甲硫氨酸具有有效的聽力保護(hù)作用，因此，當(dāng)進(jìn)入超過現(xiàn)有聽力防護(hù)裝置防護(hù)能力的噪聲場所前口服甲硫氨酸片作為耳保護(hù)劑可減輕噪聲性聾，但噪聲暴露前口服甲硫氨酸預(yù)防噪聲性聾的最佳使用時(shí)機(jī)及其確切的作用機(jī)制還需要進(jìn)一步的研究。

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(本文編輯 楊美琴)

Protective effect of D-methionine pre-loading on intense impulse noise-induced hearing loss

GEZhen-min,MAShu,JIAXiao-qing.

DepartmentofOtorhinolaryngology,the404HospitalofPublicLiberationArmy,Weihai264200,China

GE Zhen-min, Email: gezmin@163.com

Objective To observe the protective effect of oral administration of D-methionine tablets on intense impulse noise-induced hearing loss. Methods Two hundred and three volunteers were recruited and randomly divided into two groups: experimental group (n=113) and control group (n=90). The subjects had received oral administration of D-methionine tablets in the experimental group and placebo in the control group before noise exposure. The routine audiometric evaluation and auditory brainstem response testing were performed and recorded pre- and post- noise exposure. The statistical analysis was carried out with SPSS 11.0. Results The changes of hearing in all participators were observed after noise exposure, however, there were statistically significant differences between the two groups. Conclusions The protective effect of D-methionine tablets were prominent on the intense impulse noise-induced hearing loss. (Chin J Ophthalmol and Otorhinolaryngol,2015,15:41-43)

D-methionine; Noise-induced hearing loss; Hearing threshold

中國人民解放軍第404醫(yī)院耳鼻咽喉科 威海 264200

葛振民(Email：gezmin@163.com)

10.14166/j.issn.1671-2420.2015.01.014

2014-01-10)