李培育　高宏偉　董天崴　畢　勝(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院，黑龍江　佳木斯　54000)

2型糖尿病伴抑郁癥患者外周血Th1/Th2/Th17相關(guān)細胞因子水平變化

李培育高宏偉1董天崴畢勝
(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院，黑龍江佳木斯154000)

〔摘要〕目的探討2型糖尿病伴抑郁癥發(fā)病與Th1/Th2/Th17相關(guān)細胞因子干擾素(IFN) -γ、白細胞介素(IL) -4和IL-17的相關(guān)性。方法

58例2型糖尿病患者進行漢密爾頓抑郁量表測評、臨床資料收集及統(tǒng)計，隨后分為三組:正常對照(NC)組，2型糖尿病(T2DM)組和2型糖尿病伴抑郁癥(T2DM+YY)組;清晨空腹取血，ELISA法檢測血清中IFN-γ、IL-4和IL-17的水平。結(jié)果與NC和T2DM組相比，T2DM+YY組IFN-γ、IL-4水平明顯降低(P＜0.05) ;而IL-17水平明顯升高(P＜0.01)。結(jié)論糖尿病合并抑郁癥后加重了Th1/Th2失衡程度，加重了Th17誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)。糖尿病伴抑郁癥患者體內(nèi)的免疫抑制和免疫激活同時并存，免疫功能的變化與糖尿病伴抑郁癥患者發(fā)病密切相關(guān)。

〔關(guān)鍵詞〕2型糖尿病伴抑郁癥; Th1/Th2/Th17;細胞因子

1黑龍江省醫(yī)院

第一作者:李培育(1980-)，男，碩士，主治醫(yī)師，主要從事神經(jīng)系統(tǒng)疾病研究。

糖尿病已成為繼腫瘤、心腦血管疾病之后的第三大非傳染病。糖尿病患者需終生服藥，加之嚴格的飲食控制及對嚴重并發(fā)癥的恐懼和藥物治療的巨大支出對每個糖尿病患者造成了嚴重的心理負擔(dān)，因此糖尿病繼發(fā)抑郁為糖尿病常見的一種伴發(fā)病。研究表明〔1，2〕，糖尿病抑郁癥的發(fā)病率是健康人的2～3倍，嚴重影響患者血糖的控制及生活質(zhì)量，不利于糖尿病的治療和康復(fù)。糖尿病的發(fā)病涉及遺傳、環(huán)境及自身免疫等多個方面，具體病因尚未明確，研究〔3〕顯示糖尿病的發(fā)病可能與Th17 等CD4+淋巴細胞亞群失衡密切相關(guān)。糖尿病患者出現(xiàn)抑郁不良情緒嚴重影響了自身的糖代謝功能〔4〕。本研究對糖尿病合并抑郁癥的相關(guān)免疫學(xué)方面進行探討。

1　資料與方法

1.1一般資料2012年6月至2014年6月我院內(nèi)分泌科門診及住院部收治的糖尿病患者共58例，病程均超過2年。其中2型糖尿病合并抑郁癥患者28例為T2DM+YY組，2型糖尿病非抑郁癥患者30例為T2DM組。10名隨機招募健康志愿者為NC組。見表1。

1.2納入標準糖尿病診斷標準采用中華醫(yī)學(xué)會糖尿病學(xué)會于1999年通過的《糖尿病新的診斷與分型》標準:即符合空腹血糖(FPG)＞7.0 mmol/L或餐后2 h血糖(2 h PG)＞11.1 mmol/L?！岸囡?、多尿、多食、體重下降”癥狀不明顯者需在另一天測定以確診。抑郁診斷參照《中國精神疾病分類與診斷標準》(第2版)，漢密頓抑郁量表(HAMD) : 24項≥20分且≤35分者。入組前3個月未服用過任何抗精神病藥物及中藥制劑;自愿接受臨床試驗且預(yù)測依從性較好者。排除標準:①其他嚴重軀體疾病;②離異、寡居者;③雙向性情感障礙和精神分裂癥患者;④精神疾病的既往史及家族史;⑤智能障礙不能正確回答量表條目者;⑥目前濫用酒精藥物者或應(yīng)用精神活性物質(zhì)者。

表1　3組臨床資料特點(±s)

表1　3組臨床資料特點(±s)

臨床指標　T2DM組(n=30) T2DM+YY組(n=28) NC組(n=10) 男/女(n)　19/11　10/18　6/4平均年齡(歲)　 46.3±10.5　 42.1±6.5　 39.9±6.2糖化血紅蛋白(％)　 8.6±1.7　 10.3±2.3　 5.2±0.7

1.3標本采集取清晨空腹靜脈血3 ml，肝素抗凝，收集血液后，以1 358 r/min離心10 min，將血清和紅細胞迅速小心分離，將血清置于EP管，置-8℃冰箱待檢。

1.4細胞因子檢測用雙抗體夾心ELISA試劑盒檢測外周血干擾素(IFN) -γ、白細胞介素(IL) -4和IL-17水平，按試劑盒說明操作，酶標儀測定450 nm處吸光度(A)值。以試劑盒提供的標準品測定結(jié)果繪制標準曲線，計算細胞因子含量。

1.5統(tǒng)計學(xué)方法應(yīng)用SPSS11.5統(tǒng)計學(xué)分析軟件進行單因素方差分析。

2　結(jié)果

2.1血清IFN-γ水平與NC組〔(358.09±39.74) pg/ml〕相比，T2DM組〔(302.65±60.85) pg/ml〕和T2DM+YY組IFN-γ水平〔(275.35±49.84) pg/ml〕明顯降低(P＜0.05) ;而T2DM組與T2DM+YY組IFN-γ分泌水平有顯著性差異(P＜0.05)。

2.2血清IL-4水平與NC組〔(30.9±5.19) pg/ml〕相比，T2DM組IL-4水平〔(36.08±6.19) pg/ml〕明顯升高(P＜0.05)，而T2DM+YY組IL-4水平〔(26.61±3.76) pg/ml〕低于NC組; T2DM組與T2DM+YY組，IL-4分泌水平有顯著性差異(P＜0.01)。

2.3血清IL-17水平與NC組〔(20.09±1.98) pg/ml〕相比，T2DM組〔(24.06±3.32) pg/ml〕和T2DM+YY組IL-17水平〔(32.47±6.06) pg/ml〕明顯升高(P＜0.01) ;而T2DM組與T2DM+YY組比較，IL-17分泌水平有顯著性差異(P＜0.01)。

3　討論

2型糖尿病的發(fā)生是多因素、多步驟的一個過程，患者因分泌免疫網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)失控而引起糖代謝紊亂，大量代謝產(chǎn)物的累積可導(dǎo)致機體免疫功能異常，而異常免疫應(yīng)答又可加重病情發(fā)展。因此，病理性免疫反應(yīng)可能是糖尿病致病機制之一。諸多研究也發(fā)現(xiàn)，抑郁癥的臨床狀態(tài)與免疫應(yīng)答的異常相關(guān)聯(lián)，抑郁癥患者體內(nèi)存在著廣泛的免疫抑制和免疫激活。

研究多種代謝紊亂造成的細胞因子的改變，從一個側(cè)面反映了糖尿病發(fā)生的病理、生理機制。許多學(xué)者〔5，6〕對抑郁癥血清和腦脊液進行了多種細胞因子檢測，傾向于認為抑郁癥中存在細胞因子濃度異常，但其改變的方向和程度不完全一致，其結(jié)果差異較大。抑郁癥病人的免疫功能在一些方面表現(xiàn)降低，但在另一些方面表現(xiàn)激活。

文獻報道，初始CD4+細胞在不同細胞因子作用下可分化為功能不同的效應(yīng)T細胞(Th細胞)，Th細胞又分為Th1、Th2 及Th17〔7〕三個亞群，Th1細胞群主要分泌IFN-γ，TFN-α及IL-2等細胞因子，介導(dǎo)細胞免疫反應(yīng)、遲發(fā)型超敏反應(yīng)(炎癥反應(yīng)) ; Th2細胞群主要表達IL-4、IL-10及IL-13等，主要增強B細胞介導(dǎo)的體液免疫應(yīng)答; Th17可分泌IL-17、IL-21和IL-22等，在促炎癥反應(yīng)和自身免疫病中發(fā)揮重要作用〔8〕。生理條件下，機體Th1/Th2/Th17細胞處于動態(tài)平衡狀態(tài)，疾病狀態(tài)下平衡被打破，Th1/Th2/Th17細胞所致不同優(yōu)勢免疫應(yīng)答與疾病的發(fā)生、發(fā)展及其預(yù)后有關(guān)。本實驗結(jié)果證明糖尿病及糖尿病伴抑郁癥患者體內(nèi)存在廣泛的免疫抑制。糖尿病患者外周血中IL-17水平顯著增加，可能與Th17通過釋放IL-17、IL-23等炎癥因子，調(diào)節(jié)諸多炎癥因子水平，放大炎癥反應(yīng)，引起胰島β細胞的損傷和死亡相關(guān)〔9〕;而糖尿病伴抑郁癥患者外周血中IL-17水平增加更明顯，可能與抑郁癥的發(fā)病伴有細胞介導(dǎo)的免疫激活現(xiàn)象引起更嚴重的炎癥反應(yīng)相關(guān)〔10〕。

4　參考文獻

1 B1azer D，Williams CD.Epidemiology of dysphoria and depression in the elderly〔J〕．Population Am J Psychiat，1980; 137(3) : 439-44．

2 Williamson GM，Schulz R．Pain activity restriction，and symptoms of despresion community community-residing elderly adults〔J〕．J Gerontol，1992; 47(6) : 367-72.

3趙汝星．CD4+T細胞亞群在肥胖、2型糖尿病及其并發(fā)癥中的作用及機制研究〔D〕．濟南:山東大學(xué)博士學(xué)位論文，2014．

4劉宇.2型糖尿病伴抑郁癥狀患者中西醫(yī)結(jié)合社區(qū)干預(yù)效果研究〔D〕．中南大學(xué)，2010.

5 Johnson JD，Campisi J，Sharkey CM，et al．Catecholamines mediate stressinduced increases in peripheral and central inflammatory cytokines〔J〕．Neuroscience，2005; 135: 1295-307．

6 Bierhaus A，Wolf J，Andrassy M，et al．A mechanism converting psychosocial stress into mononuclear cell activation〔J〕．Proc Natl Acad Sci USA，2004; 100: 1920-5．

7 Zhong X，Gao W，Degauque N，et al.Reciprocal generation of Thl/Thl7 and T(reg) cells by B1 and B2 B cells〔J〕．Eur J Immunol，2007; 37(9) : 2400-4.

8 Bettelli E，Kom T，Kuchroo VK.Th17: the third member of the effector T cell trilogy〔J〕．Curr Opin Immunol，2007; 19(6) : 652-7.

9杜愛民，曾姣娥，寧尚俠.2型糖尿病患者Thl7細胞檢測及其臨床意義〔J〕．臨床薈萃，2010; 25(6) : 495-7.

10Nunes-de-Souza V，Nunes-de-Souza RL，Rodgers RJ，et al．5-H Tzrecept or activation in the midbrain periaqueductal grey(PAG) reduces anxietylike behavior in mice〔J〕．Beha V Brain Res，2008; 187(1) : 72-9.

〔2014-06-27修回〕

(編輯苑云杰)

通訊作者:畢勝(1981-)，女，博士，主治醫(yī)師，主要從事神經(jīng)免疫學(xué)研究。

基金項目:黑龍江省衛(wèi)生廳項目(No．2013235) ;佳木斯大學(xué)校級青年基金項目(No．Sq2013-022)

〔中圖分類號〕R749.4

〔文獻標識碼〕A

〔文章編號〕1005-9202(2015) 16-4559-02;

doi:10.3969/j.issn.1005-9202.2015.16.062