肖艷新 王 翯 李立琴 董越華 辛歡歡 程曉東 張?jiān)屏?王 君

糖尿病腎病患者血清血管內(nèi)皮生長因子和色素上皮衍生因子水平變化

肖艷新 王 翯 李立琴 董越華 辛歡歡 程曉東 張?jiān)屏?王 君*

目的：探討2型糖尿病腎病(DN)患者血清血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)和色素上皮衍生因子(PEDF)水平變化及其在DN發(fā)生發(fā)展中的意義。方法：將175例研究對象分為正常對照組(NC組，n=35)、單純糖尿病組(T2DM組，n=35)、DN Ⅲ期組 (Ⅲ組，n=40)、DN Ⅳ期組(Ⅳ組，n=35)、DN Ⅴ期組(Ⅴ組，n=30)。采用酶聯(lián)免疫法檢測各組血清VEGF及PEDF水平并分析二者相關(guān)性，同時(shí)測定全血糖化血紅蛋白(HbA1c)、血漿纖維蛋白原(Fib)、血肌酐(Cr)及24h尿微量白蛋白排泄率(UAER)，并行UAER危險(xiǎn)因素的多元回歸分析。結(jié)果：五組血清PEDF、VEGF水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，各病例組水平均高于NC組，且Ⅴ組>Ⅳ組>Ⅲ組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，T2DM組與Ⅲ組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。研究對象血清VEGF與PEDF水平呈直線相關(guān)(r=0.847，P<0.01)。血清VEGF、 HbA1c是UAER的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(R2=0.430)。結(jié)論：VEGF和PEDF可能參與了DN的發(fā)生發(fā)展。

糖尿病腎病；血管內(nèi)皮生長因子；色素上皮衍生因子

糖尿病腎病(DN)是糖尿病(DM)微血管病變之一，是引起慢性腎功能不全導(dǎo)致血液透析的主要原因。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)可通過促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增生、改變細(xì)胞外基質(zhì)及增加血管通透性而促進(jìn)血管新生；色素上皮衍生因子(PEDF)可通過抑制炎癥及氧化應(yīng)激反應(yīng)、促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡等抑制新生血管形成，兩者的動(dòng)態(tài)化改變在DN微循環(huán)改變中可能起到重要作用。為了解VEGF與PEDF水平在DN發(fā)生發(fā)展中的變化，本文檢測DN患者血清VEGF與PEDF水平及相關(guān)指標(biāo)變化，分析兩者對DN發(fā)生發(fā)展的作用。

1 資料與方法

1.1 對象和分組

2011-05-2014-05本院門診及住院的2型糖尿病(T2DM)患者140例，其中男73例，女67例，年齡21-81歲，平均54.8歲。T2DM診斷符合世界衛(wèi)生組織制定的糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]。按照Mogensen提出的分期標(biāo)準(zhǔn)，將患者分為單純T2DM組[T2DM組，尿微量白蛋白排泄率(UAER)<20μg/min]、DN Ⅲ期組 (Ⅲ組，20μg/min200 μg/min)、DN Ⅴ期組[Ⅴ組，血肌酐(Cr)>137μmol/L]。排除DM急性并發(fā)癥(如DM酮癥酸中毒、 高滲非酮癥昏迷)、泌尿系感染、嚴(yán)重心、肺、肝臟疾患以及惡性腫瘤、原發(fā)性腎病、風(fēng)濕性疾病等系統(tǒng)性疾病。所有患者均接受常規(guī)降糖治療。另選同期門診體檢健康者35例作為正常對照組(NC組)。本研究遵循赫爾辛基宣言并經(jīng)本院倫理委員會(huì)通過；所有受檢者均知情并簽署知情同意書。各組受檢者性別構(gòu)成比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.098,P>0.05)。5組年齡差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=16.13,P<0.01)，Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅴ組大于NC組(t=4.82、6.04、6.02,均P<0.01)和T2DM組(t=3.59、4.86、4.87,P<0.01)；其余組間兩兩差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。5組收縮壓(SBP)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=8.78，P<0.01)，T2DM組、Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅴ組均高于NC組(t= 3.86-5.34,P<0.01)，其余組間兩兩差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。舒張壓(DBP)和體重指數(shù)(BMI)各組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=1.20、1.59，P>0.05)。見表1。

表1 各組一般資料

注：與NC組和T2DM組比較，1)P<0.01；與NC組比較，2)P<0.01

1.2 檢測指標(biāo)和方法

所有受檢者行實(shí)驗(yàn)室VEGF、PEDF以及Cr、糖化血紅蛋白(HbA1c)、纖維蛋白原(Fib)、24h UAER測定。

抽取受檢者過夜空腹肘靜脈血，離心分離血漿或血清。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)測定血清VEGF及PEDF水平，試劑盒購自美國Chemicon公司(批號140213，140122)，批內(nèi)差異<5.1%，批間差異<10.6%；采用SysmexCA-7000；凝固法測定血漿Fib；采用D-10糖化血紅蛋白儀，高效液相色譜分析法測定HbA1c；收集24h尿液，采用免疫比濁法檢測UAER。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 各組VEGF、PEDF水平比較及兩者相關(guān)性

5組血清VEGF水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=58.56，P<0.01)；T2DM組與Ⅲ組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.31，P>0.05)，其余組間兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.83-12.50，P<0.01)。5組血清PEDF水平差異亦有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=27.53，P<0.01)；T2DM組與Ⅲ組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.23，P<0.05)，其余組間兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.08-9.40，P<0.01)。見表2。

相關(guān)分析顯示，血清VEGF與PEDF水平呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.847，P<0.01)。

表2 各組VEGF和PEDF血清水平比較

注：與NC組比較，1)P<0.01；與T2DM組比較，2)P<0.05；與Ⅲ組比較，3)P<0.01；與Ⅳ組比較，4)P<0.01

2.2 各組HbA1c、Fib和腎功能指標(biāo)比較

5組HbA1c水平差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=11.07，P<0.01)；T2DM組、Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅴ組較NC組均顯著升高(t=6.59-10.75，P<0.01)，Ⅲ組、Ⅴ組與T2DM組比較明顯降低(t=3.18、3.75，P<0.05)。5組Fib水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=13.68，P<0.01)；除Ⅲ組與T2DM組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.57,P>0.05)外，Ⅳ組、Ⅴ組較T2DM組升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.22、6.55，P<0.05)。5組血Cr水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=161.7,P<0.01)，Ⅴ組較其它4組顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=20.3-20.8，P<0.01)，其它4組組間兩兩比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。5組UAER比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=61.17，P<0.01)；Ⅲ組、Ⅳ組、Ⅴ組明顯高于NC組和T2DM組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.07-13.2，P<0.05或P<0.01)。T2DM組與NC組、Ⅳ組與Ⅴ組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表3。

表3 各組HbA1c、Fib和腎功能指標(biāo)比較

注：與NC組比較，1)P<0.01；與T2DM組比較，2)P<0.05，3)P<0.01；與Ⅲ組比較，4)P<0.01；與Ⅳ組比較，5)P<0.01

2.3 UAER危險(xiǎn)因素分析

先行單變量相關(guān)分析，結(jié)果顯示，UAER與血清VEGF、PEDF、血漿Fib、全血HbA1c水平顯著正相關(guān)(r值=0.631、0.483、0.278、0.357，P均<0.01)。

再行逐步多元回歸分析，結(jié)果表明，只有血清VEGF、全血HbA1c是UAER的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(R2=0.430)。見表4。

表4 逐步多元回歸分析結(jié)果

3 討 論

DN的基本病理改變?yōu)槟I小球、腎小管肥大和腎小球、腎小管基膜增厚、腎動(dòng)脈硬化及腎間質(zhì)纖維化。VEGF是作用于內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞因子，可促進(jìn)血管生成及內(nèi)皮細(xì)胞增殖和遷移，并增強(qiáng)腎小球毛細(xì)血管通透性，促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)合成。VEGF的表達(dá)受多種因素調(diào)控，缺氧是目前所發(fā)現(xiàn)的最強(qiáng)調(diào)節(jié)因素，缺氧狀態(tài)下進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，數(shù)小時(shí)后即可見VEGF mRNA表達(dá)明顯增加[2,3]。早期研究發(fā)現(xiàn)，PEDF能抑制糖尿病視網(wǎng)膜病變(DR)和新生血管形成，對抗VEGF的促血管生成作用[4,5]。Wang等[6，7]先后報(bào)道，PEDF水平在腎臟局部組織中下降與 DN的發(fā)病機(jī)制密切相關(guān)；高糖培養(yǎng)的腎小球系膜細(xì)胞中，高表達(dá)的VEGF可以被PEDF抑制。還有研究[8,9]認(rèn)為PEDF保護(hù)腎臟作用與其能抑制腎臟炎癥反應(yīng)有關(guān)。臨床研究發(fā)現(xiàn)，DN患者血清及尿PEDF水平隨著尿蛋白水平升高而升高，合并有DR的患者升高更明顯[10]；低水平PEDF患者全因死亡率及心血管發(fā)病率風(fēng)險(xiǎn)升高[11]。

本研究結(jié)果顯示，DN患者VEGF和PEDF水平不僅高于NC組，也高于T2DM組，而且血清VEGF、PEDF水平隨著DN病情加重呈逐漸升高趨勢，與相關(guān)文獻(xiàn)[10]報(bào)道一致。肝臟、脂肪組織是 PEDF的主要來源[12]，當(dāng)DN患者因?yàn)榭寡滓约芭cVEGF對抗消耗致PEDF水平降低時(shí)，肝臟、脂肪組織代償性合成PEDF增多使血清水平增高[13]，且與VEGF水平呈正相關(guān)，這種機(jī)制有利于延緩DN的發(fā)展。本研究結(jié)果還表明，DN患者HbA1c和VEGF不僅高于NC組和/或T2DM組，而且是腎功能指標(biāo)UAER的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。提示糖代謝紊亂可加重氧化應(yīng)激，導(dǎo)致腎臟病理性改變[14]。

近年研究發(fā)現(xiàn)，代謝綜合征及胰島素抵抗患者血清PEDF水平增高[15，16]。本研究結(jié)果顯示T2DM組PEDF水平較NC組升高，提示PEDF可能與代謝綜合征有著密切關(guān)系。對于PEDF在DM發(fā)病中的更多作用以及能否作為DN預(yù)測因子還有待進(jìn)一步研究。

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本文第一作者簡介：

肖艷新(1982—)，女，漢族，碩士研究生，主治醫(yī)師

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Change and Significance of Serum Vascular Endothelial Growth Factor and Pigment Epithelium-derived Factor in Type 2 Diabetic Nephropathy

XIAO Yan-xin， WANG He， Li Li-qin， DONG Yue-hua, XIN Huan-huan, CHENG Xiao-dong, ZHANG Yun-liang, WANG Jun*

Baoding NO.1 Central Hospital，Baoding 071000，China;*

Objective:To investigate the change of vascular endothelial growth factor (VEGF) and pigment epithelium-derived factor (PEDF) in the development of diabetic nephropathy. Method:175 subjects were divided into control group(n=35)，T2DM group(n=35)，DN Ⅲ stage group(Ⅲ group,n=40)，Ⅳstage group(Ⅳ group,n=35) and stage group(Ⅴ group,n=30). ELISA was used to detect the serum VEGF and PEDF. Blood lipid，fasting plasma glucose，insulin，HBA1c，blood creatinine and fibrinogen were simultaneously determined. Results:The serum level of PEDF，VEGF and Fib increased gradually in the five groups and there were significant difference. Except T2DM group with Ⅲ group, there were significant difference between other groups. VEGF and PEDF showed linear correlation(r=0.847,P<0.01). VEGF，HbA1c were significant independent determinants of UAER(R2=0.430).Conclusion:VEGF and PEDF may involve in the development of diabetic nephropathy.

Diabetic nephropathy；Vascular endothelial growth factor；Pigment epithelium-derived factor

河北省保定市第一中心醫(yī)院，保定 071000；*

，E-mail：Sunday47@163.com

本文2015-03-27收到，2015-05-15修回

R587.2

A

1005-1740(2015)03-0030-04