趙 浩 劉劍剛 雷 燕

血脂異常血瘀證患者血液流動(dòng)性和流變性觀察*

趙 浩1，2劉劍剛1,#雷 燕3

目的：應(yīng)用計(jì)算機(jī)血液流變學(xué)可視化技術(shù)(MC-FAN)觀察血脂異?；颊哐毫鲃?dòng)性，探討血脂異常血瘀證患者血液流動(dòng)性與中醫(yī)血瘀證之間的關(guān)系。方法：98例血脂異常患者，按照中醫(yī)辯證分型分為血瘀證組(n=50)和非血瘀證組(n=48)，另設(shè)健康人群為對(duì)照組(n=29)。平行測(cè)定各組血脂指標(biāo)總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白-膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白-膽固醇(HDL-C)、極低密度脂蛋白-膽固醇(VLDL-C)以及血液流變學(xué)指標(biāo)全血表觀粘度(BV)、血漿粘度(PV)、紅細(xì)胞壓積(HCT)、紅細(xì)胞聚集指數(shù)(EAI)、紅細(xì)胞變形指數(shù)(EDI)、血漿纖維蛋白原(Fib)、血小板聚集率(PTGT)和血小板黏附率(PAdT)，并利用MC-FAN觀察血液流動(dòng)時(shí)間(TT)。結(jié)果：與對(duì)照組比較，血瘀證組和非血瘀證組患者各血脂指標(biāo)水平均顯著升高(P<0.01)，但兩患者組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。血瘀證患者(25μl、50μl、75μl、100μl)血液的TT分別為21.48±7.19s，52.92±18.72s，94.11±33.00s和164.60±65.20s，較非血瘀證組患者(17.70±4.14s、40.84±14.88s、69.90±27.76 s、110.06±47.24s)均顯著延長(zhǎng)(P<0.01)。三組間血液流變學(xué)各指標(biāo)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論：血脂異常血瘀證患者的血液流動(dòng)時(shí)間顯著延長(zhǎng)。

血脂異常；血瘀證；血液流動(dòng)時(shí)間；計(jì)算機(jī)可視化技術(shù)

日本MC-FAN株式會(huì)社研制的血液流動(dòng)性可視化檢測(cè)儀(Micro Channel Array Flow Analyzer，MC-FAN)，利用硅晶片模擬人體內(nèi)微血管，通過(guò)計(jì)算機(jī)可視化技術(shù)，直接觀察血液流動(dòng)狀況和計(jì)量血液流動(dòng)時(shí)間(Transiting Time，TT)，同時(shí)通過(guò)LED顯示器實(shí)時(shí)觀察血液流動(dòng)時(shí)紅細(xì)胞、白細(xì)胞和血小板等血液成分的流動(dòng)[1]，較傳統(tǒng)血液流變學(xué)指標(biāo)檢測(cè)更直觀、更形象[2-5]。本研究運(yùn)用該儀器和技術(shù)觀察血脂異常(Dyslipidemia)血瘀證患者的血液流動(dòng)性，同時(shí)測(cè)量宏觀血液流變學(xué)指標(biāo)，旨在了解血脂異常血瘀證患者的血液流動(dòng)性和流變性變化，為臨床防治和研究提供資料和方法。

1 資料與方法

1.1 對(duì)象與分組

選擇2007-05-2008-01在西苑醫(yī)院就診的血脂異?；颊?8例，按照血瘀證的中醫(yī)辨證標(biāo)準(zhǔn)分為血瘀證組(n=50，參照《中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則》[6]中的血瘀證有關(guān)證候，包括胸脅脹悶、胸痛、舌質(zhì)紫暗或有瘀斑等)和非血瘀組(n=48，肝腎陰虛、脾腎陽(yáng)虛型等證候患者)；另選體檢健康人群作為對(duì)照組(n=29)。三組間年齡、性別差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，兩病例組病程和合并癥差異亦無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 對(duì)象納入和排除標(biāo)準(zhǔn)

血脂異常病例的診斷參照《中國(guó)成人血脂異常防治指南》[7]，并為近2個(gè)月未服用降脂藥物、非妊娠期、年齡20-85歲者。排除合并糖尿病、甲亢等內(nèi)分泌及代謝系統(tǒng)疾病以及不穩(wěn)定型心絞痛、心肝腎功能不全等嚴(yán)重疾病患者。

健康者納入?yún)⒄罩腥A醫(yī)學(xué)會(huì)制定的健康標(biāo)準(zhǔn)建議[7]，對(duì)本次檢測(cè)均知情并簽署知情同意書(shū)。

1.3 檢測(cè)指標(biāo)和方法

1.3.1 血脂測(cè)定：采集空腹外周靜脈血2ml，離心分離血清。采用酶法測(cè)定總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)；采用免疫比濁法測(cè)定高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)和極低密度脂蛋白膽固醇(VLDL-C)。所用儀器為全自動(dòng)生化儀(RX-2000型)，由美國(guó)TECHNICON公司生產(chǎn)。TC檢測(cè)試劑盒(批號(hào)：180131)和TG檢測(cè)試劑盒(批號(hào)：220451)購(gòu)自北京中生北控生物科技股份有限公司；HDL-C檢測(cè)試劑盒(批號(hào)：￡409612)、LDL-C檢測(cè)試劑盒(批號(hào)：￡409261)、VLDL-C檢測(cè)試劑盒(批號(hào)：￡409532)均購(gòu)自北京利德曼生化技術(shù)有限公司。

1.3.2 TT測(cè)定：采用MC-FAN KH-6型計(jì)算機(jī)可視化檢測(cè)儀[日本エムシー(MC-FAN)研究所提供]。取空腹外周靜脈血2ml，肝素抗凝，1h內(nèi)完成檢測(cè)。操作流程：排空儀器壓力水管中的空氣，檢測(cè)生理鹽水通過(guò)的時(shí)間(一般控制在21.7±1.57s)；向模擬毛細(xì)血管裝置內(nèi)注入100μl抗凝血樣，儀器自動(dòng)加樣25μl、50μl、75μl和100μl流經(jīng)模擬毛細(xì)血管裝置，記錄所用時(shí)間(TT)，并自動(dòng)打印結(jié)果。檢測(cè)儀彩色顯示器上同時(shí)實(shí)時(shí)呈現(xiàn)血液流經(jīng)模擬毛細(xì)血管圖像。

1.3.3 血液流變學(xué)指標(biāo)測(cè)定：同TT測(cè)定制備抗凝血樣。(1)紅細(xì)胞聚集指數(shù)(Erythrocyte Aggregation Index，EAI)，儀器為L(zhǎng)BY-BX2型紅細(xì)胞功能激光測(cè)定儀(北京普利生儀器有限公司生產(chǎn))，采用光密度法測(cè)定。將0.4ml血樣置于圓錐板測(cè)試杯中，600s-1運(yùn)行10s使紅細(xì)胞解聚，然后停止運(yùn)行100s，使紅細(xì)胞重新聚集，計(jì)算EAI。(2)紅細(xì)胞變形指數(shù)(Erythrocyte Deformity Index，EDI)，檢測(cè)儀器亦為L(zhǎng)BY-BX2型紅細(xì)胞功能激光測(cè)定儀(北京普利生儀器有限公司生產(chǎn))，采用激光衍射法檢測(cè)。紅細(xì)胞懸浮液采用15%聚乙烯吡咯烷酮K-30(PVP，北京化學(xué)試劑公司生產(chǎn)，批號(hào)：060826，pH=7.4)，將紅細(xì)胞懸浮其中，測(cè)試剪切率由100s-1-11 500s-1不斷增加時(shí)，紅細(xì)胞形態(tài)由圓形逐漸被拉長(zhǎng)成橢園形，計(jì)算機(jī)自動(dòng)計(jì)算EDI。(3)血小板聚集率(Platelet Aggregation， PAgT)，LBY-NJ2型血小板聚集儀(北京普利生儀器有限公司生產(chǎn))，采用比濁法檢測(cè)。按常規(guī)方法檢測(cè)1min、3min、5min PAgT。血小板聚集誘導(dǎo)劑為二磷酸腺苷(ADP，批號(hào)：04P01，由美國(guó)Biopool International公司生產(chǎn)，誘聚濃度2mM)。(4)血小板黏附率(Platelet adhesion， PAdT)，檢測(cè)儀器為XSN-RII型血小板黏附測(cè)定儀(江蘇省無(wú)錫電子儀器二廠生產(chǎn))，采用旋轉(zhuǎn)玻球法，按常規(guī)方法測(cè)算黏附率。(5)血液表觀黏度(Blood Viscosity，BV)，檢測(cè)儀器為L(zhǎng)BY-N6型全血黏度測(cè)定儀(北京普利生儀器有限公司生產(chǎn))，采用錐-板法測(cè)定。測(cè)定全血在1.0s-1、5.0s-1、10.0s-1、35.0s-1、120.0s-1剪切率下的黏度。(6)血漿黏度(Plasma Viscosity，PV)采用毛細(xì)管法按常規(guī)方法測(cè)定。(7)血漿纖維蛋白原(Fibrinogen，F(xiàn)ib)濃度，采用凝血酶衍生法(Von clauss)，按常規(guī)方法測(cè)定。(8)紅細(xì)胞壓積(Hematocrit，HCT)采用毛細(xì)管法測(cè)定。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié) 果

2.1 各組血脂水平比較

三組間LDL-C、HDL-C差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，三組間TC、TG和VLDL-C差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。血瘀證組和非血瘀證患者TC、TG和VLDL-C較對(duì)照組升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01)，而血瘀證組和非血瘀證組以上指標(biāo)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)表1。

2.2 各組TT比較

三組間不同血樣量的TT差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。血瘀證組患者25μl、50μl、75μl和100μl的TT值較對(duì)照組和非血瘀證組增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，而非血瘀證組與對(duì)照組TT值差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見(jiàn)圖1、表2。

2.3 各組血液流變學(xué)指標(biāo)比較

單因素方差分析顯示，三組間各血流變指標(biāo)測(cè)值差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見(jiàn)表3、表4。

表1 各組血脂水平比較

注：與對(duì)照組比較，1)P<0.05,2)P<0.01

表2 各組TT比較

注：與對(duì)照組比較，1)P<0.01；與非血瘀證組比較，2)P<0.01

表3 各組不同剪切率下BV和PV比較

表4 各組EAI、EDI、HCT、ESR、PagT、PadT、Fib比較

[本文圖1見(jiàn)封4]

3 討 論

隨著國(guó)民生活水平明顯提高、飲食結(jié)構(gòu)和習(xí)慣發(fā)生改變，我國(guó)血脂異常的發(fā)生率正逐年上升[8]。血脂異?；颊哂捎谥愇镔|(zhì)在血漿中沉積，可能導(dǎo)致血液流速減慢，還可引起氧化應(yīng)激損害和動(dòng)脈血管功能紊亂[9]；同時(shí)，血脂異常也是糖尿病的繼發(fā)癥，大約40%的糖尿病患者存在脂代謝紊亂[10]。血脂異常在中醫(yī)屬于“痰濁”、“血瘀”范疇，主要原因是飲食肥甘厚味，腎之陰陽(yáng)俱虛所致。中醫(yī)的血脂異常病機(jī)分為虛實(shí)兩類，“實(shí)”主要指血瘀、痰濁，“虛”則可分為陰虛、陽(yáng)虛(包括氣虛)。但無(wú)原發(fā)病的血脂異?；颊卟o(wú)明顯癥狀和異常體征，往往在進(jìn)行有關(guān)生化檢查時(shí)偶然被發(fā)現(xiàn)。這種隱蔽性造成了動(dòng)脈粥樣硬化等疾病的發(fā)生發(fā)展。

為提高血脂異常檢出率，近年來(lái)的新技術(shù)和新方法不斷呈現(xiàn)。MC-FAN即為新方法之一，它可以通過(guò)血液流動(dòng)性的可視化技術(shù)檢測(cè)血脂異?；颊咴缙谘髯兓M(jìn)而評(píng)估血脂異?；颊叩奈ｋU(xiǎn)性及其嚴(yán)重程度[11，12]。本文采用該技術(shù)檢測(cè)分析血脂異常血瘀證患者血液流動(dòng)時(shí)間及血流變狀態(tài)，為相關(guān)疾病的診療觀察提供新的指標(biāo)和方法。已有研究者[13]觀察到血脂異常患者白細(xì)胞活性升高，較容易黏附在毛細(xì)血管內(nèi)壁上，阻礙血液流動(dòng)。還有文獻(xiàn)報(bào)道，血瘀證患者血脂譜較非血瘀證患者顯著升高[14]。

本研究結(jié)果顯示，血脂異常血瘀證患者4種血樣量血流時(shí)間與對(duì)照組和與非血瘀證患者比較均減慢。提示采用血液流動(dòng)性計(jì)算機(jī)可視化分析方法可對(duì)血脂異常中醫(yī)證候進(jìn)行量化，將中醫(yī)血瘀證與血液流動(dòng)性可視化指標(biāo)進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析，促進(jìn)血脂異常血瘀證證候的客觀化。也是未病防治研究和血脂異常早期判別值得借鑒的方法。

(本課題儀器操作和圖像處理得到日本エムシー研究所市橋裕一工程師和北京咸通佳儀科技發(fā)展有限公司咸大元、陳亦舟工程師的指導(dǎo)和幫助，謹(jǐn)致謝忱！)

?

本文第一作者簡(jiǎn)介：

趙 浩(1975-)，男，漢族，主治醫(yī)師，碩士研究生，研究方向：心腦血管疾病的中西醫(yī)結(jié)合治療

1 劉劍剛，何良志，王丹巧，等. 血液流變性的可視化測(cè)定方法及臨床應(yīng)用[J]. 微循環(huán)學(xué)雜志，2005，15(4):74-75，79.

2 劉劍剛，王丹巧.第十二屆日本血液流變學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議概要[J].中國(guó)血液流變學(xué)雜志，2006,16(3):495-496.

3 趙 浩，劉劍剛，雷 燕.血脂異?；颊哐毫髯儗W(xué)可視化檢測(cè)與血脂、炎癥因子的相關(guān)性分析[J].中國(guó)體視學(xué)與圖像分析，2014，19(3):310-319.

4 劉劍剛, 王丹巧，趙 浩，等. 血液流動(dòng)性的計(jì)算機(jī)可視化測(cè)定及其技術(shù)應(yīng)用[J]. 現(xiàn)代科學(xué)儀器, 2007, (6):78-81.

5 劉劍剛，海 鴻，汪曉芳，等.應(yīng)用血液流動(dòng)性可視化測(cè)定裝置觀察高脂血癥患者血液流動(dòng)性的變化[J].中國(guó)微循環(huán)，2008，12(1)：47-50．

6 鄭莜萸主編．中藥新藥臨床研究指導(dǎo)原則[M]．北京中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2002：85-89．

7 中國(guó)成人血脂異常防治指南制訂聯(lián)合委員會(huì)．中國(guó)成人血脂異常防治指南[J]．中華心血管雜志，2007，35(5)：390-410.

8 趙文華，張 堅(jiān)，由 悅，等.中國(guó)18歲及以上人群血脂異常流行特點(diǎn)研究[J]. 中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2005,39(5) :306-310.

9 宋鐵英. 高脂血癥血液流變學(xué)結(jié)果分析[J]. 中國(guó)社區(qū)醫(yī)師，2011，13(263)：160.

10 黎國(guó)德，許慶波，梁 巖，等.糖尿病高危人群血脂異?；疾÷始跋嚓P(guān)危險(xiǎn)因素分析[J].廣東醫(yī)學(xué),2014,35(6):922-924.

11 菊池佑二，俊騰清，森正治，等.液面自動(dòng)計(jì)測(cè)裝置を用いだ測(cè)定法の改良[J].日本ヘモレオロジー研究會(huì)誌，2001,4:59-63.

12 高橋洋一，加藤順一，本間宏之，等.腦血管障害患者におけゐ 赤血球變形能[J]. 日本ヘモレオロジー研究會(huì)誌，1998,1(1):13-17.

13 栗原毅，出口祥子，柳遲明子，等．血液しオロジー測(cè)定裝置MC-FANの臨床應(yīng)用(第一期) [J].日本ヘモレオロジー研究會(huì)誌，2001，4:43-52．

14 謝 琛，馬曉昌. 冠心病血瘀證與血脂譜的關(guān)系研究[J]. 北京中醫(yī)藥，2010， 29 (6):427-428.

Observation of the Blood Flow and Rheology in Patients with Blood Stasis Syndrome and Dyslipidemia

ZHAO Hao1,2, LIU Jian-gang1，#, LEI Yan3

1Xiyuan Hospital, China Academy of Chinese Medical Sciences, Angiocardiopathy Institute of China Academy of Chinese Medical Sciences,Beijing 100091, China;2The Southern Districtt of Guanganmen Hospital, China Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 102600, China;3Medical Experimental Center, China Academy of Chinese Medical Sciences, Beijing 100700, China;#

Objective:To explore the relationship between rheology and blood stasis of traditional Chinese medicine (TCM) of hyperlipidemia with the MC-FAN. Method:A total of 127 cases were enrolled，and tested all the patients' lipid, MC-FAN TT and hemorheology indexes. The 98 hyperlipidemia patients were divided into the Blood stasis group and non-blood stasis group with the rule of traditional Chinese medicine, and the other 29 normal lipid cases were in the controlled group. Results:Compared with healthy people,the blood lipid indicators rised in the blood stasis group and the non-blood stasis group.The MC-FAN TT (25μl TT is 21.48±7.19s，50μl TT is 52.92±18.72s，75μl TT is 94.11±33.00s and 100μl TT is 164.60±65.20s,P<0.01) were extended,compared with non-blood stasis group.There were no significant differences between the 3 groups in rheology. Conclusion:For the patients of hyperlipidemia in blood stasis group, the MC-FAN TT is extended.

Dyslipidemia;Blood stasis; Hemorheology; Computer Visualization

中日合作血液流變學(xué)可視化基金項(xiàng)目(XYW01-20100526)

1中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院西苑醫(yī)院，中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院心血管病研究所，北京 100091；2中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院廣安門(mén)醫(yī)院南區(qū)，北京 102600；3中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中心，北京 100700；#

，E-mail:liujiangang2002@sina.com

本文2015-03-05收到，2015-05-30修回

R285.5 R364.1

A

1005-1740(2015)03-0023-04