范艷玲　郭子健　楊曉丹　吳小紅　余　波　李莉華

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16q12 rs3803662 基因多態(tài)性與乳腺癌易感性的關(guān)聯(lián)性分析

范艷玲郭子健楊曉丹吳小紅余波李莉華

【摘要】目的分析16q12 rs3803662位點(diǎn)基因多態(tài)性與乳腺癌罹患風(fēng)險(xiǎn)的相關(guān)性。方法檢索PubMed、 Ovid、 Medline 和Web of Science數(shù)據(jù)庫(kù)的文獻(xiàn)，應(yīng)用Stata/SE 12.0 對(duì)全部關(guān)于16q12 rs3803662基因多態(tài)性與乳腺癌易感性的研究結(jié)果進(jìn)行異質(zhì)性檢驗(yàn)和效應(yīng)值合并。結(jié)果檢索到30篇相關(guān)文獻(xiàn)，25篇納入研究的文獻(xiàn)中，累計(jì)病例69 127例，對(duì)照95 954例。總研究人群分析結(jié)果顯示，與C等位基因相比，16q12 rs3803662位點(diǎn)T等位基因顯著增加高加索人群、亞洲人群和混合人群乳腺癌的罹患風(fēng)險(xiǎn)。分層分析結(jié)果顯示，與雌激素受體陰性乳腺癌患者相比，rs3803662 T等位基因顯著增加雌激素受體陽(yáng)性乳腺癌患者的罹患風(fēng)險(xiǎn)。與攜帶BRCA1基因突變的乳腺癌患者相比，rs3803662 T等位基因顯著增加攜帶BRCA2基因突變?nèi)橄侔┗颊叩囊赘行?。結(jié)論排除非洲人群，16q12 rs3803662位點(diǎn)T等位基因顯著增加個(gè)體罹患乳腺癌風(fēng)險(xiǎn)。

【關(guān)鍵詞】rs3803662；雌激素受體；孕激素受體；乳腺癌；Meta分析

(ThePracticalJournalofCancer,2015,30:0046～0050)

乳腺癌是女性最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，是女性癌癥相關(guān)死亡的主要原因[1]。近日出版的《2012中國(guó)腫瘤登記年報(bào)》顯示，乳腺癌的發(fā)病率已躍居我國(guó)女性惡性腫瘤發(fā)病率的首位，明顯高于其它癌癥的發(fā)病率，并以每年2%~3%的增長(zhǎng)速率遞增和呈現(xiàn)年輕化趨勢(shì)。乳腺癌發(fā)病是遺傳與環(huán)境因素共同作用的結(jié)果。與家族性乳腺癌相比，大多數(shù)散發(fā)性乳腺癌的發(fā)生主要與低外顯率基因的多態(tài)性有關(guān)。近年，全基因組關(guān)聯(lián)性研究發(fā)現(xiàn)一些新的乳腺癌易感基因位點(diǎn)。Easton等[2]發(fā)現(xiàn)位于16q12的rs3803662是一個(gè)乳腺癌風(fēng)險(xiǎn)因子。然而隨后在不同人群中進(jìn)行的獨(dú)立研究的結(jié)論不一致。因此，我們對(duì)目前已發(fā)表的數(shù)據(jù)進(jìn)行Meta分析，以更精確地評(píng)估16q12 rs3803662位點(diǎn)基因多態(tài)性與乳腺癌易感性的關(guān)聯(lián)性。

1材料與方法

1.1文獻(xiàn)檢索

在PubMed、Ovid、Medline和 Web of Science數(shù)據(jù)庫(kù)中，以“16q12 or rs3803662”、“polymorphism or polymorphisms”、“breast cancer”為關(guān)鍵詞聯(lián)合檢索2013年10月以前發(fā)表的相關(guān)研究。

1.2納入標(biāo)準(zhǔn)

①關(guān)于16q12 rs3803662 C>T位點(diǎn)多態(tài)性與乳腺癌罹患風(fēng)險(xiǎn)的研究；②病例對(duì)照或隊(duì)列研究；③有足夠的原始數(shù)據(jù)以提供比值比(OR)及95%置信區(qū)間(CI)或可以轉(zhuǎn)化OR值及95%CI的研究；④相同研究重復(fù)發(fā)表的僅納入樣本量較大的文獻(xiàn)。

1.3排除標(biāo)準(zhǔn)

①無(wú)對(duì)照人群；②無(wú)可利用的基因型頻率分布數(shù)據(jù)。

1.4資料提取

資料提取由2名研究人員分別獨(dú)立完成，不一致部分經(jīng)討論解決。資料包括：第一作者姓名、文獻(xiàn)發(fā)表年限、研究對(duì)象種族、樣本量、病例組和對(duì)照組基因型、各組等位基因頻率、雌激素受體和孕激素受體狀態(tài)、BRCA基因狀態(tài)和是否進(jìn)行Hardy-Weinberg平衡(HWE)檢驗(yàn)。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

通過(guò)計(jì)算下列基因型模型獲得OR值及其95%CI，用以評(píng)估16q12 rs3803662位點(diǎn)多態(tài)性與乳腺癌易感性的關(guān)聯(lián)強(qiáng)度：等位基因?qū)Ρ饶Ｐ?T vs.C)、雜合子模型(TC vs.CC)、純合子模型(TT vs.CC)以及顯性和隱性模型(TT/TC vs.CC，TT vs.TC/CC)，并按照種族、雌激素受體和孕激素受體狀態(tài)以及BRCA基因狀態(tài)分層分析。各研究之間的異質(zhì)性判斷采用基于卡方檢驗(yàn)的Q檢驗(yàn)[3]，有異質(zhì)性者應(yīng)用隨機(jī)效應(yīng)模型(P<0.10和(或)I2>50%)[4]，否則應(yīng)用固定效應(yīng)模型(P≥0.10和(或)I2≤ 50%)[5]。采用卡方檢驗(yàn)計(jì)算對(duì)照組中Hardy-Weinberg平衡，P值>0.01視為滿(mǎn)足Hardy-Weinberg平衡。應(yīng)用Egger’s線(xiàn)性回歸和繪制倒漏斗圖的方法評(píng)估潛在發(fā)表性偏倚，P<0.05表示存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的發(fā)表性偏差。用敏感性分析評(píng)價(jià)結(jié)果的穩(wěn)定性。用卡方檢驗(yàn)比較低頻等位基因在人群中的頻數(shù)分布情況。所有的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析均應(yīng)用Stata/SE version 12.0軟件(Stata Corporation，College Station，TX，USA)。

2結(jié)果

2.1基本情況

共檢索到相關(guān)文獻(xiàn)資料30篇，根據(jù)上述入選及排除標(biāo)準(zhǔn)，最終納入統(tǒng)計(jì)文獻(xiàn)共計(jì)25篇。研究對(duì)象涉及14個(gè)國(guó)家及地區(qū)，其中12篇文獻(xiàn)涉及高加索人群，6篇文獻(xiàn)涉及亞洲人群，1篇文獻(xiàn)涉及非洲人群，6篇文獻(xiàn)涉及混合人種，累計(jì)病例69127例，對(duì)照95954例。納入文獻(xiàn)的基本資料見(jiàn)表1，所有文獻(xiàn)的基因頻率分布見(jiàn)表2。

2.2文獻(xiàn)合并分析

總研究人群分析顯示，與C等位基因相比，16q12 rs3803662位點(diǎn)T等位基因顯著增加乳腺癌的罹患風(fēng)險(xiǎn)(等位基因模型T vs.C：OR 1.20，95%CI 1.16-1.24；純合子模型TT vs.CC：OR 1.38，95%CI 1.27-1.50；雜合子模型TC vs.CC：OR 1.16，95%CI 1.10-1.21；顯性模型TT/TC vs.CC：OR 1.20，95%CI 1.14-1.27； 隱性模型TT vs.TC/CC：OR 1.29，95%CI 1.21-1.37)，見(jiàn)圖1。

按人種分層分析發(fā)現(xiàn)，在高加索人群中，T等位基因顯著增加乳腺癌的罹患風(fēng)險(xiǎn)(T vs.C：OR 1.24，95% 1.17-1.32； TT vs.CC：OR 1.53，95% 1.30-1.79；TC vs.CC：OR 1.18，95% 1.06-1.31； TT/TC vs.CC：OR 1.24，95% 1.11-1.38；TT vs.TC/CC：OR 1.40，95% 1.24-1.59)，對(duì)于亞洲人群，在等位基因模型中T等位基因與增加乳腺癌的罹患風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)(T vs.C OR 1.19，95%CI 1.12-1.26)。在非洲人群中未發(fā)現(xiàn)16q12 rs3803662基因多態(tài)性與乳腺癌易感性相關(guān)。

分析結(jié)果顯示，與雌激素受體陰性乳腺癌(OR 1.08，95%CI 0.97-1.20) 相比，rs3803662 T等位基因顯著增加雌激素受體陽(yáng)性患者乳腺癌(OR1.23，95%CI 1.13-1.32)的罹患風(fēng)險(xiǎn)。對(duì)于孕激素受體狀態(tài)進(jìn)行分層分析，得出相似的結(jié)論。與攜帶BRCA1基因突變的乳腺癌患者 (OR 1.09，95%CI 1.04-1.15) 相比，rs3803662 T等位基因顯著增加攜帶BRCA2基因突變患者的乳腺癌(OR 1.23，95%CI 1.05-1.44)易感性。

2.3敏感性分析

從總體分析中逐一剔除單個(gè)研究之后進(jìn)行Mata分析顯示，所有基因模型的合并比值比沒(méi)有發(fā)生實(shí)質(zhì)性的改變，表明盡管在合并分析過(guò)程中存在研究間的異質(zhì)性，但統(tǒng)計(jì)結(jié)果是仍然是可靠的。

2.4偏倚性分析

發(fā)表性偏倚 Begger’s漏斗圖未顯有明顯的不對(duì)稱(chēng)性。Egger’s檢驗(yàn)顯示在所有基因模型中未發(fā)現(xiàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的發(fā)表性偏倚(P>0.05)，見(jiàn)圖2。

3討論

16q12 rs3803662是一個(gè)功能未知的基因位點(diǎn)。盡管如此，近期的全基因組關(guān)聯(lián)性研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)其基因多態(tài)性與乳腺癌的罹患風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)，但是后來(lái)的各獨(dú)立研究對(duì)于其是否增加乳腺癌的罹患風(fēng)險(xiǎn)的結(jié)論尚不一致。

總?cè)巳旱暮喜⒎治鼋Y(jié)果表明16q12 rs3803662 C>T位點(diǎn)基因多態(tài)性與乳腺癌的罹患風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)。在人種的分層分析中，高加索人群、亞洲人群、混合人群中T等位基因相較于C等位基因顯著增加乳腺癌的罹患風(fēng)險(xiǎn)，而在非洲人群中并未發(fā)現(xiàn)兩者有相關(guān)性。T 等位基因在不同人種分布不同，在Tapper 等[6]的研究中，歐裔美國(guó)人中T等位基因的頻率是 0.341，在Barnholtz-Sloan等[7]的研究中，非洲人群中T等位基因的頻率是0.530，因此推測(cè)不同人種間腫瘤易感性的差異性結(jié)果可能主要與不同人種的遺傳差異有關(guān)。此外，本文納入的25篇文獻(xiàn)中高加索人研究病例數(shù)最多，且得出rs3803662 C>T 位點(diǎn)多態(tài)性增加乳腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的結(jié)論，根據(jù)所占權(quán)重比，本研究得出rs3803662 C>T 位點(diǎn)多態(tài)性增加乳腺癌患病風(fēng)險(xiǎn)結(jié)論可能性大。

表1　25組病例的一般情況比較

注：其中NA為未能獲取，PB為基于人群的，HB為基于醫(yī)院的，Nested為巢式病例對(duì)照，HWE為Hardy-Weinberg平衡。

圖1　rs3803662 C>T 基因多態(tài)性與人罹患乳腺癌的關(guān)系

第一作者報(bào)道年限病例組CCCTTTCT對(duì)照組CCCTTTCTStacey200761842924256989456Tapper2008127652244301530Mcinerney2009486382821354546532396581460512Barnholtz-Sloan20105855121331682778589440891618618Tamimi201033330054966408415273501103373Latif201042239584123956321713719571175Gorodnova201074501619882778215236112Hemminki201018969342708952Slattery20117787552042311116397886220228181266Teraoka2011306309889214856406061431886892Butt201235327864984406780512952072702Ottini201314319574481343352323701027463Li20091181413237720512312840374208Long20104061862926564934Liang201012641348666513851274644557181374Seuta201156083413101478Han201136914351481217343975161617136126494339Kim20121408310614772627Barnholtz-Sloan2010166378196710770142333182617697Garcia-Closas2008775971321848226501082813295970520263629513757Antoniou200824222173497701731672244183138263192595Campa2011370635281071109405670572147241150161667024Muligan201131092652585887038222899219742679953049Harlid201217941420330500820802768189835274342602Rinella2013219187326200

圖2　納入文獻(xiàn)的發(fā)表偏倚性分析

另外，本篇meta分析結(jié)果表明：在亞洲人群中，T等位基因顯著增加乳腺癌的罹患風(fēng)險(xiǎn)，這與先前Li等[8]和Liang等[9]的研究不一致。Liang等[9]報(bào)道來(lái)自于中國(guó)的一個(gè)小的病例對(duì)照研究，而我們的大樣本量的綜合分析發(fā)現(xiàn)16q12 rs3803662 C>T 基因多態(tài)性與亞洲人群乳腺癌易感性之間有相關(guān)性。這種結(jié)果的不同可能與納入樣本量不同有關(guān)系，因此以后還需要更多更大樣本含量的獨(dú)立研究來(lái)證實(shí)。

分層分析顯示，與雌、孕激素受體陰性相比，T等位基因顯著增加雌激素受體陽(yáng)性和孕激素受體陽(yáng)性乳腺癌的罹患風(fēng)險(xiǎn)，表明不同腫瘤亞型的變異風(fēng)險(xiǎn)不同。內(nèi)分泌系統(tǒng)產(chǎn)生的性激素對(duì)乳腺癌發(fā)生有促進(jìn)作用，大部分乳腺組織表達(dá)ER、PR、AR，性激素通過(guò)這些受體發(fā)揮作用[10]。由于雌、孕激素受體狀態(tài)是乳腺癌分型的重要標(biāo)記，因此測(cè)定雌、孕激素受體表達(dá)情況，不僅可以對(duì)已罹患乳腺癌的患者制訂個(gè)體化的內(nèi)分泌治療方案，提高術(shù)后生存率，還可在一定程度上預(yù)測(cè)乳腺癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，進(jìn)而預(yù)防、早期篩查。

乳腺癌易感基因BRCA1和BRCA2發(fā)生突變直接影響基因組的穩(wěn)定性，使細(xì)胞對(duì)環(huán)境變化的敏感性增加，同時(shí)損傷修復(fù)功能降低，由此導(dǎo)致多種突變包括原癌基因突變?cè)诩?xì)胞內(nèi)累積，最終發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化[11]。我們的結(jié)果顯示，與BRCA1基因突變攜帶者相比，T等位基因顯著增加BRCA2基因突變攜帶者乳腺癌的易感性。

異質(zhì)性的存在可能對(duì)結(jié)果的解釋產(chǎn)生潛在的影響。我們的研究表明異質(zhì)性并非來(lái)自于某單個(gè)研究，基因多態(tài)性在種族之間頻率分布的差異以及其他未知的因素可能是真正的異質(zhì)性來(lái)源。由于乳腺癌發(fā)生受多因素影響，未來(lái)還需結(jié)合飲食、生活習(xí)慣、環(huán)境暴露、乳腺相關(guān)疾病史等因素進(jìn)行綜合研究分析。

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(編輯：吳小紅)

Correlation Analysis of 16q12 rs3803662 Polymorphism and Breast Cancer Susceptibility

FANYanling，GUOZijian，YANGXiaodan，etal.DepartmentofOncology，TheFourthAffiliatedHospitalofSoochowUniversity，Wuxi，214062

【Abstract】ObjectiveTo study the relationship between 16q12 rs3803662 polymorphisms and breast cancer susceptibility.MethodsPubMed，Ovid，Medline and Web of Science database were searched.Crude odds ratio (OR) with 95% confidence interval (CI) was used to assess the strength of association.ResultsA total of 25 studies including 69，127 cases and 95，954 controls were identified.Breast cancer risk was associated with 16q12 rs3803662 polymorphism when all studies were pooled into the meta-analysis (OR 1.20，95%CI 1.16-1.24).For rs3803662，stronger association was observed with ER+ tumors (OR 1.23，95%CI 1.13-1.32) compared to ER- tumors (OR 1.08，95%CI 0.97-1.20) and a same condition occurred for the polymorphism with PR+ tumors (OR 1.26，95%CI 1.02-1.55) versus PR-tumors (OR 1.15，95%CI 0.90-1.46).When stratified by BRCA mutation status，stronger association was observed with BRCA2 carriers (OR 1.23，95%CI 1.05-1.44) than BRCA1 carriers (OR 1.09，95%CI 1.04-1.15).ConclusionThe T-allele of 16q12 rs3803662 is risk factor associated with increased breast cancer susceptibility.

【Key words】rs3803662；Estrogen receptor；Progesterone receptor；Breast cancer；Meta-analysis

(收稿日期2014-03-03修回日期 2014-05-13)

中圖分類(lèi)號(hào)：R737.9

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1001-5930(2015)01-0046-05

DOI：10.3969/j.issn.1001-5930.2015.01.013

通訊作者：李莉華

基金項(xiàng)目：無(wú)錫市科技發(fā)展計(jì)劃(CAE00801-08)
作者單位：214062 蘇州大學(xué)附屬第四醫(yī)院，無(wú)錫市第四人民醫(yī)院