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        母豬附紅細(xì)胞體病的實(shí)驗(yàn)室診斷

        2015-03-02 01:53:57陶明江田
        中國(guó)畜牧獸醫(yī)文摘 2015年10期
        關(guān)鍵詞:實(shí)驗(yàn)室

        陶明江田 斌

        (1.貴州省德江縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,貴州銅仁 565200;2.德江縣長(zhǎng)豐鄉(xiāng)農(nóng)業(yè)服務(wù)中心,貴州銅仁 565200)

        母豬附紅細(xì)胞體病的實(shí)驗(yàn)室診斷

        陶明江1田 斌2

        (1.貴州省德江縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,貴州銅仁 565200;2.德江縣長(zhǎng)豐鄉(xiāng)農(nóng)業(yè)服務(wù)中心,貴州銅仁 565200)

        2012年7月13日,德江縣長(zhǎng)豐鄉(xiāng)某養(yǎng)豬場(chǎng)兩頭母豬出現(xiàn)低燒,食欲不振,以至食欲廢絕。經(jīng)過(guò)獸醫(yī)臨床觀察,結(jié)合實(shí)驗(yàn)室檢查,診斷為豬附紅細(xì)胞體病。

        1 流行病學(xué)

        該豬場(chǎng)有部分母豬出現(xiàn)了食欲減退甚至食欲廢絕的情況,檢測(cè)體溫偏高,經(jīng)青霉素、鏈霉素治療,效果不明顯。出診現(xiàn)場(chǎng)觀察,發(fā)現(xiàn)有部分母豬皮膚發(fā)紅,精神不振,眼結(jié)膜等黏膜發(fā)黃。分別采集編號(hào)分別是3號(hào)和7號(hào)兩頭母豬全血,送實(shí)驗(yàn)室檢查。

        2 實(shí)驗(yàn)室檢查

        2.1 材料與方法

        2.1.1 試驗(yàn)材料

        (1)試驗(yàn)病料:血樣來(lái)自某豬場(chǎng)母豬抗凝全血,分別為3號(hào)和7號(hào)。

        (2)主要試劑:抗凝劑為枸櫞酸三鈉;紅細(xì)胞計(jì)數(shù)稀釋液為0.85%NaCl溶液;白細(xì)胞稀釋液為1%的冰醋酸。

        (3)培養(yǎng)基:血平板培養(yǎng)基,將滅菌的營(yíng)養(yǎng)瓊脂加熱熔化,在冷至45℃~50℃時(shí),加無(wú)菌脫纖維家兔鮮血5%~10%,傾注平皿。待凝固后,置37℃培養(yǎng)1天。有污染者廢棄,無(wú)菌者保存于冰箱中備用。

        (4)主要儀器:?jiǎn)文抗怆婏@微鏡,白紅細(xì)胞計(jì)一套及血紅細(xì)胞計(jì)數(shù)板,電熱恒溫培養(yǎng)箱,手提式小型直立高壓滅菌器,電子天秤。

        2.1.2 試驗(yàn)方法

        (1) 細(xì)菌分離:將被檢病料(血液3號(hào),7號(hào))置于酒精燈旁,分別用滅菌毛細(xì)吸管取1~2滴置于血平板中央,再用滅菌的接種環(huán)做均勻涂布。于血平板蓋上分別作“3#”和“7#”記號(hào)、日期,再置于37℃培養(yǎng)48h。

        (2)附紅細(xì)胞體檢查

        ①血液壓片:分別取3號(hào)和7 號(hào)血樣1滴于兩片載玻片上,再加1~2滴生理鹽水混勻,之后用蓋玻片覆蓋,置于光電顯微鏡下鏡檢。

        ②血涂片制備及瑞氏染色:

        先取一張干凈的無(wú)油垢邊緣整齊的載玻片,其一端蘸取少許3#血液,以45°角放在另一張干凈無(wú)油垢的載玻片一端,從這端向另一端推成薄而均勻的血膜。同樣方法對(duì)7#血液進(jìn)行涂片,待干后備用。抹片自然干燥后,滴加瑞氏染色液于其上,經(jīng)1~3分鐘,再加染液等量的中性蒸餾水,輕輕晃動(dòng)玻片,使與染液混勻;經(jīng)1~3分鐘左右,直接用水沖洗,吸干后,鏡檢。

        2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

        2.2.1 細(xì)菌分離結(jié)果:用血平板分離,經(jīng)過(guò)在37℃培養(yǎng)48h后,沒(méi)有細(xì)菌生長(zhǎng),呈陰性。

        2.2.2 附紅細(xì)胞體檢查結(jié)果:3號(hào)、7號(hào)均為陽(yáng)性,紅細(xì)胞四周有大量附紅細(xì)胞體附著。

        2.2.3 形態(tài)觀察結(jié)果

        (1) 鮮血壓片:高倍鏡下即可見(jiàn)震顫和變形的血球以及呈淡綠色的附紅細(xì)胞體。在油鏡下可見(jiàn)菠蘿樣、鋸齒狀、星芒狀紅細(xì)胞,紅細(xì)胞內(nèi)和血漿中可見(jiàn)附紅細(xì)胞體。大多呈球形、逗號(hào)形、條形細(xì)小顆粒狀。

        (2)血涂片經(jīng)瑞氏染色:瑞氏染色時(shí)紅細(xì)胞一般呈淡紫紅色,附紅細(xì)胞體一般呈天藍(lán)色。每個(gè)紅細(xì)胞上附著的附紅細(xì)胞體的數(shù)目各異,中度感染一般為6~7個(gè)重度感染的時(shí)可達(dá)到20個(gè)以上,此時(shí)紅細(xì)胞暗視野下如同鋸齒狀,附紅細(xì)胞體染色的鏡檢形狀與鮮血鏡檢情況相同:呈球形、逗號(hào)形、條形細(xì)小顆粒狀,也有菠蘿樣、星芒狀紅細(xì)胞。

        2.2.4 紅細(xì)胞、白細(xì)胞計(jì)數(shù)及血紅蛋白檢測(cè)結(jié)果

        從表1可見(jiàn),紅細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果3號(hào)、7號(hào)均下降;白細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果3號(hào)下降,7號(hào)正常。血紅蛋白檢查結(jié)果3號(hào)、7號(hào)均下降。紅細(xì)胞和血紅蛋白下降明顯,表現(xiàn)明顯的貧血。詳見(jiàn)表1。

        表1 實(shí)驗(yàn)室血液檢測(cè)結(jié)果

        3 治療

        針對(duì)附紅細(xì)胞體,選擇用藥如下:肌注長(zhǎng)效土霉素注射液、5%的血蟲(chóng)凈溶液(4毫克/公斤體重),1次/d,交替進(jìn)行。同時(shí)靜滴5%葡萄糖氯化鈉注射液、維生素C等藥物。經(jīng)過(guò)5 d藥物治療,2頭母豬均好轉(zhuǎn),6 d后逐漸恢復(fù)健康。

        4 小結(jié)與討論

        (1)作者針對(duì)一例母豬發(fā)熱、皮膚發(fā)紅、厭食的病例,經(jīng)過(guò)流行病學(xué)調(diào)查、血液涂片觀察以及染色鏡檢、血液紅白細(xì)胞計(jì)數(shù)及血紅蛋白檢查,初步判斷為附紅細(xì)胞體感染。經(jīng)過(guò)針對(duì)性藥物治療,獲得較好的治療效果,基本確定本次病例為母豬附紅細(xì)胞體感染。

        (2)附紅細(xì)胞體寄生在人畜紅細(xì)胞表面、血漿和骨髓而引起的一種人畜共患的傳染病。附紅細(xì)胞體附著在紅細(xì)胞表面,使紅細(xì)胞膜內(nèi)陷形成凹陷和空洞,改變了紅細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和形狀。通過(guò)附紅細(xì)胞體病的流行病學(xué)調(diào)查結(jié)合實(shí)驗(yàn)室檢查對(duì)附紅細(xì)胞體病診斷,母豬皮膚發(fā)紅,紅細(xì)胞、血紅蛋白數(shù)下降說(shuō)明了各種類型的貧血、血孢子蟲(chóng)病、溶血性疾病。再結(jié)合附紅細(xì)胞體檢查都證明了附紅細(xì)胞體的存在。

        [1] 王永,馮昕煒,嚴(yán)光文,等.附紅細(xì)胞體病原學(xué)研究進(jìn)展[J].中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào),2008,30(6):491-494.

        [2] 孫亮,穆國(guó)冬,王笑玉,等.豬附紅細(xì)胞體病的研究進(jìn)展[J].吉林畜牧獸醫(yī),2008,29(11):10-11.

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