宋振宇

外周血T淋巴細(xì)胞亞群與免疫球蛋白檢測(cè)在胃癌病情監(jiān)測(cè)及預(yù)后評(píng)價(jià)中的價(jià)值

宋振宇

目的探討外周血T淋巴細(xì)胞亞群與免疫球蛋白(Immunoglobulin，Ig)檢測(cè)對(duì)胃癌病情監(jiān)測(cè)及預(yù)后評(píng)價(jià)的意義。方法將475例胃癌患者按照其2年生存率分為預(yù)后良好組(n=266)及預(yù)后不良組(n=209)，并選取同期200例健康體檢者，納入正常對(duì)照組，比較各組受試者外周血T淋巴細(xì)胞亞群與Ig水平差異，探討其臨床意義。結(jié)果胃癌患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+顯著低于正常對(duì)照組，CD8+顯著高于正常對(duì)照組(P＜0．05);胃癌患者IgG、IgA、C3、C4均顯著低于正常對(duì)照組(P＜0．05)，其IgM水平比較未見明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0．05)。預(yù)后不良組與預(yù)后良好組患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群及Ig水平比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0．05)。結(jié)論胃癌患者會(huì)出現(xiàn)明顯的外周血T淋巴細(xì)胞亞群失調(diào)、Ig降低表現(xiàn)，且改變程度越明顯則表明患者預(yù)后越差，因此，早期檢測(cè)患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群與Ig水平有助于判斷其預(yù)后、指導(dǎo)治療對(duì)策。

T淋巴細(xì)胞亞群;免疫球蛋白;胃癌;病情;預(yù)后;評(píng)價(jià)

(The Practical Journal of Cancer，2015，30:1126～1128)

胃癌是我國(guó)發(fā)病率最高的消化道惡性腫瘤，其病情的進(jìn)展與患者免疫功能的變化具有密切關(guān)聯(lián)［1］。隨著醫(yī)療技術(shù)的提高，胃癌患者的近期生存質(zhì)量得到了有效保證，但其5年生存率仍不足50%，因此，進(jìn)一步探究免疫功能與患者病情及預(yù)后的關(guān)系有助于早期預(yù)后的判斷與治療策略的制定［2］。為此，我們選取外周血T淋巴細(xì)胞亞群及免疫球蛋白(Immunoglobulin， Ig)兩項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行了臨床研究，取得了可靠的結(jié)論。

1 材料與方法

1．1 臨床資料

自我院2008年9月-2012年9月收治的胃癌患者中進(jìn)行篩選，選取標(biāo)準(zhǔn):①接受胃癌根治性手術(shù)治療并經(jīng)術(shù)后病理學(xué)檢查確診［3］;②首發(fā)胃癌患者，且入組前未接受其他相關(guān)治療;排除:①合并機(jī)體免疫系統(tǒng)

疾病;②合并心、肝、腎等其他重要臟器官疾病;③隨訪年限不足2年或隨訪資料不完整。共選取符合條件的患者475例，按照其2年隨訪結(jié)果進(jìn)行分組，將復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移或死亡患者納入預(yù)后不良組［4］，其他患者納入預(yù)后良好組。預(yù)后不良組209例，男性127例，女性82例，年齡35～74歲，平均(52．1±7．6)歲，預(yù)后良好組266例，男性154例，女性112例，年齡33～70歲，平均(53．8±9．1)歲。并選取同期健康體檢者200例，在其簽署知情同意書并經(jīng)我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)后，將其納入正常對(duì)照組，其中男性120例，女性80例，年齡35～72歲，平均(52．9±6．4)歲。各組患者年齡、性別比例等臨床資料比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0．05)，具有可比性。

1．2 檢測(cè)方法

1．2．1 T淋巴細(xì)胞亞群取受試者(胃癌患者治療前)空腹靜脈血2 ml，置于EDTA抗凝管中，取全血100 μl，加入CD3+、CD4+、CD8+熒光抗體(美國(guó)Beckman-Coulter公司)標(biāo)記，標(biāo)記成功后取單抗(法國(guó)Immunotech公司)20 μl，避光，28℃下染色20 min;加入1．5 ml紅細(xì)胞裂解液，混勻，避光，28℃下處理10 min，以完全裂解紅細(xì)胞;以1 500 r/min離心5 min后，留取沉淀物，加入2 ml 0．1%疊氮鈉磷酸緩沖液，混勻，再次以1 500 r/min離心5 min，加入1 ml PBS溶液后，于2 h內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)設(shè)備為NovoCyte系列流式細(xì)胞儀(美國(guó)ACEA公司)。

1．2．2 免疫球蛋白取受試者(胃癌患者治療前)空腹靜脈血2 ml，3 000 r/min離心后，取上清液，使用IMMAGE型免疫濁度分析儀(美國(guó)Beckman-Coulter公司)，使用免疫比濁法直接進(jìn)行Ig檢測(cè)，檢測(cè)試劑購(gòu)自同公司;檢測(cè)指標(biāo)包括IgG、IgA、IgM及補(bǔ)體C3、C4。

1．3 觀察指標(biāo)

比較患者與正常對(duì)照組外周血T淋巴細(xì)胞亞群、Ig水平差異，并比較預(yù)后不良組及預(yù)后良好組患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群、Ig水平差異。

1．4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

對(duì)本臨床研究的所有數(shù)據(jù)采用SPSS 18．0進(jìn)行分析，對(duì)計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，對(duì)計(jì)量資料采用t檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水準(zhǔn)設(shè)定為α=0．05，當(dāng)P＜0．05時(shí)，認(rèn)為其有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2 結(jié)果

2．1 T淋巴細(xì)胞亞群

胃癌患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+顯著低于正常對(duì)照組，其CD8+顯著高于正常對(duì)照組(P＜0．05);預(yù)后不良組患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/ CD8+顯著低于預(yù)后良好組，其CD8+顯著高于預(yù)后良好組(P＜0．05)，見表1。

表1 正常對(duì)照組與胃癌組外周血T淋巴細(xì)胞亞群水平比較(%，±s)

表1 正常對(duì)照組與胃癌組外周血T淋巴細(xì)胞亞群水平比較(%，±s)

組別CD3+CD4+CD8+CD4+/CD8+66．39±5．8443．96±5．2823．31±7．631．90±0．24胃癌組51．09±8．4034．52±5．8329．31±6．711．19±0．35預(yù)后良好組56．37±7．9138．20±4．8525．40±6．621．47±0．40預(yù)后不良組正常對(duì)照組48．42±9．0330．19±6．1233．17±7．110．99±0．28

2．2 免疫球蛋白

患者組IgG、IgA、C3、C4均顯著低于正常對(duì)照組(P＜0．05)，其IgM水平比較未見明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0．05);預(yù)后不良組組IgG、IgA、C3、C4均顯著低于預(yù)后良好組組(P＜0．05)，其IgM水平比較未見明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0．05)，見表2。

表2 正常對(duì)照組與患者組血清免疫球蛋白水平比較(g/L，±s)

表2 正常對(duì)照組與患者組血清免疫球蛋白水平比較(g/L，±s)

組別IgGIgAIgMC3C4正常對(duì)照組13．95±2．801．99±0．811．07±0．391．19±0．310．35±0．98胃癌組10．36±1．941．35±0．361．06±0．210．62±0．190．18±0．27預(yù)后良好組12．07±1．351．90±0．271．05±0．310．84±0．250．26±0．19預(yù)后不良組9．33±2．021．16±0．271．07±0．420．53±0．160．14±0．30

3 討論

腫瘤與機(jī)體局部微環(huán)境的互相作用主要影響免疫微環(huán)境的變化，其對(duì)免疫微環(huán)境的抑制在促進(jìn)自身發(fā)生、發(fā)展甚至轉(zhuǎn)移方面均具有重要作用［5］。機(jī)體抗腫瘤機(jī)制主要借助于細(xì)胞免疫應(yīng)答的發(fā)揮，而細(xì)胞免疫

主要依賴T淋巴細(xì)胞功能的發(fā)揮，T淋巴細(xì)胞除能夠識(shí)別腫瘤細(xì)胞，產(chǎn)生抗原刺激外，還能分泌致敏T淋巴細(xì)胞用于腫瘤細(xì)胞的殺傷，因此，近年來T淋巴細(xì)胞在腫瘤進(jìn)展中的變化受到了廣泛關(guān)注。同時(shí)，有研究發(fā)現(xiàn)，在機(jī)體抗體產(chǎn)生、炎癥反應(yīng)出現(xiàn)的過程中亦伴隨著Ig水平的變化［6］，因而對(duì)Ig水平的監(jiān)測(cè)亦有望用于胃癌患者病情監(jiān)測(cè)與預(yù)后評(píng)價(jià)。

本研究發(fā)現(xiàn)，胃癌患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群、Ig水平較健康體檢者存在較大差異，且預(yù)后不良的胃癌患者其差異性更為明顯，提示外周血T淋巴細(xì)胞亞群、Ig水平的劇烈改變預(yù)示著患者病情較重、預(yù)后較差，其機(jī)制主要包括:①CD3+、CD4+在免疫應(yīng)答中起到促進(jìn)、擴(kuò)大免疫反應(yīng)的正向作用，而CD8+主要起到抑制細(xì)胞免疫進(jìn)程的負(fù)向作用，在健康者機(jī)體內(nèi)，上述3種T淋巴細(xì)胞亞群保持著一個(gè)較為穩(wěn)定的動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，但隨著惡性腫瘤的出現(xiàn)，患者可逐漸發(fā)生T淋巴細(xì)胞狀態(tài)異常以及比例失調(diào)表現(xiàn)，導(dǎo)致免疫內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的失常［7］;②隨著患者免疫內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定被打破，其記憶T細(xì)胞的表達(dá)逐漸受到抑制，機(jī)體對(duì)腫瘤細(xì)胞的免疫應(yīng)答作用有所降低，同時(shí)，CD3+、CD4+水平的下降以及CD8+水平的上升使得免疫反應(yīng)受到進(jìn)一步影響，機(jī)體對(duì)于腫瘤的清除能力及免疫監(jiān)視能力均受到抑制，這在一方面也促使腫瘤出現(xiàn)免疫逃逸狀態(tài)，從而更利于腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移，最終導(dǎo)致患者在術(shù)后出現(xiàn)復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移甚至死亡等較差的預(yù)后［8］;③Ig也是機(jī)體免疫防御功能的重要組成部分，屬于體液免疫范疇，主要作用為抗感染、抗腫瘤及免疫監(jiān)視。雙金權(quán)等［9］指出，惡性腫瘤患者在發(fā)病早期一般會(huì)出現(xiàn)B細(xì)胞分化能力增強(qiáng)的體液免疫功能亢進(jìn)的代償性表現(xiàn)，但隨著患者病程的延長(zhǎng)及病情的惡化，其體液免疫功能會(huì)迅速下降，導(dǎo)致Ig總體水平的降低，而病情較重、預(yù)后較差的患者體液免疫功能下降更為明顯;④IgM水平的變化一般見于炎癥反應(yīng)早期，而胃癌患者IgM與正常對(duì)照組無明顯差異，提示多數(shù)患者機(jī)體已度過腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生的早期反應(yīng)期，此時(shí)已出現(xiàn)免疫機(jī)能的衰退，進(jìn)一步印證了上述結(jié)論;⑤雖然機(jī)體具有較強(qiáng)的生成C3、C4能力，但在腫瘤細(xì)胞影響細(xì)胞免疫后，補(bǔ)體即被大量消耗，而當(dāng)機(jī)體的補(bǔ)體產(chǎn)生速度無法趕及其消耗速度后，患者腫瘤細(xì)胞即會(huì)出現(xiàn)猛烈的繁殖態(tài)勢(shì)，引起病情的迅速進(jìn)展［10］，因此，以Ig作為胃癌患者病情監(jiān)測(cè)的指標(biāo)亦存在一定意義。

綜上所述，胃癌患者會(huì)出現(xiàn)明顯的外周血T淋巴細(xì)胞亞群失調(diào)、Ig降低表現(xiàn)，這預(yù)示著其細(xì)胞免疫、體液免疫功能的下降，且上述指標(biāo)改變程度越明顯則表明患者病情越重、預(yù)后越差，因此，早期檢測(cè)患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群與Ig水平有助于判斷其預(yù)后、指導(dǎo)治療對(duì)策。

［1］許俊龍，張杰，李玉紅，等．D2-40，Paxillin蛋白在早期胃癌中表達(dá)的相關(guān)性及臨床病理學(xué)意義〔J〕．實(shí)用癌癥雜志，2013，28(2):140-143．

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［4］Schmidt K，Zilio S，Schmollinger JC，et al．Differently immunogenic cancers in mice induce immature myeloid cells that suppress CTL in vitro but not in vivo following transfer〔J〕．Blood，2013，121(10):1740-1748．

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Detection of Peripheral Blood T Lymphocyte Subsets and Immunoglobulin in Monitoring and Prognosis Evaluation of Gastric Cancer

SONG Zhenyu．The First People＇s Hospital of Liangshan，Liangshan，615000

ObjectiveTo analyze the value of T lymphocyte subsets in peripheral blood and immune globulin(Ig)detection in monitoring and prognosis evaluation of gastric cancer．Methods475 cases of gastric cancer patients，in accordance with 2-year survival rate，were divided into good prognosis group(n=266)and poor prognosis group(n=209)，and 200 cases of healthy individuals was the control group，T lymphocyte subsets in peripheral blood and Ig level were compared，and its clinical significance were explored．ResultsThe peripheral blood CD3+，CD4+，CD4+/CD8+in gastric carcinoma were significantly lower than those of the control group，CD8+was significantly higher than that of the control group(P＜0．05);IgG，IgA，C3，C4in gastric carcinoma were significantly lower than those of the control group(P＜0．05)，the IgM level had no statistically significant difference(P＞0．05)，T lymphocyte subsets in peripheral blood and Ig level in poor prognosis group and good prognosis group had no statistically significant difference(P＞0．05)．ConclusionGastric cancer patients have obvious peripheral blood T lymphocyte subsets disorders and drop of Ig expression，and the greater the index change，the poorer the prognosis，therefore，early detection of peripheral blood T lymphocyte subsets and Ig level are helpful in judging prognosis and guiding treatment countermeasures．

T lymphocyte subsets;Immunoglobulin;Gastric cancer;Disease;Prognosis;Evaluation

10．3969/j．issn．1001-5930．2015．08．006

R735．2

A

1001-5930(2015)08-1126-03

2014-11-24

2015-04-08)

(編輯:甘艷)

615000四川省涼山州第一人民醫(yī)院