崔 珺

炎癥和血管生成密切相關(guān)，病理性血管已經(jīng)涉及到慢性炎性疾病和多種癌癥的發(fā)展。炎癥和血管生成之間的相互作用是通過生長因子和細胞因子介導(dǎo)，特別是白細胞介素［1］。新血管生成在腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的過程中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。最近，已發(fā)現(xiàn)一些抗癌細胞增殖和抗血管生成的細胞因子，但并沒有在肺癌患者中進行檢驗［2］，其中包括 IL27、IL29、IL31 和IL33。本研究檢驗肺癌患者血清和支氣管肺泡灌洗液(支氣管肺泡灌洗液)中的IL27，IL29，IL31和IL33及其受體水平，并評估它們之間的相互關(guān)系及臨床意義。

1 材料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2012年1月-2014年12月80例肺癌患者臨床資料，其中符合標準的患者45例。45例患者病理診斷確診為肺癌(男性38例，女性7例，平均年齡62歲)。患者未接受任何抗癌藥物治療和放療。鱗狀細胞癌(SCC)患者22例，腺癌9例，而NSCLC14例。所有患者經(jīng)4個周期的化療，部分緩解(PR)19例(42.2%)，病情穩(wěn)定(SD)11 例(24.4%)，病情(PD)進展15 例(33.4%)。

1.2 血樣采集

化療前采集肺癌患者全血得到血清樣品。排除化療的干擾，細胞毒性藥物最后一次給藥后至少28天采集血樣。血清儲存在-80℃待用。肺癌患者經(jīng)X射線和CT胸部掃描，纖維支氣管鏡與過敏性肺炎檢驗，肺支氣管活檢(TBB)，或經(jīng)支氣管針吸活檢(TBNA)后，取血樣以評估IL27，IL29，IL31和IL33及受體水平。按照RECIST(實體瘤響應(yīng)評價標準)標準評估治療情況。所有患者均接受了胸部、腦電圖、基本化驗檢查及輔助檢查(腹腔B超和中樞神經(jīng)系統(tǒng)CT)。另設(shè)立3個對照組，15例肺結(jié)節(jié)病患者(BBS，貝-伯-肖綜合征)，8例HP(外源性過敏性肺泡炎)患者和15例健康志愿者(13例男性，2例女性)。所有患者和對照組均行支氣管鏡檢查和支氣管肺泡灌洗液分析。

1.3 非小細胞肺癌患者的治療

每21天為1個化療周期。在第1～3天給予順鉑30 mg/m2，在第1天和第8天給予吉西他濱1 000 mg/m2。所有患者均接受4個周期的化療。體能狀態(tài)評分采用ECOG評分標準。0分:活動能力完全正常，與起病前活動能力無任何差異;1分:能自由走動及從事輕體力活動，包括一般家務(wù)或辦公室工作，但不能從事較重的體力活動;2分:能自由走動及生活自理，但已喪失工作能力，日間不少于一半時間可以起床活動;3分:生活僅能部分自理，日間一半以上時間臥床或坐輪椅;4分:臥床不起，生活不能自理;5分:死亡。

1.4 血清和BALF中的IL-27，IL-29，IL-31和IL-33及其受體分析

白細胞介素27，IL29，IL31和IL33水平通過酶聯(lián)免疫(ELISA)方法確定。所有標本進行2次測定。2次測量的平均值為實驗結(jié)果。IL27，IL29，IL31和IL33的最小可檢測劑量(MDD)分別為 6.1 μg/ml，2.0 μg/ml，1.0 μg/ml和 0.2 μg/ml。

1.5 統(tǒng)計學方法

數(shù)據(jù)采用SPSS 18.0進行統(tǒng)計學分析。Shapiro Wilk W檢驗數(shù)據(jù)正態(tài)分布。t檢驗獨立性數(shù)據(jù)。曼-惠特尼檢驗和秩和檢驗評估分布差異。參數(shù)之間的相關(guān)性由Spearman秩檢驗。Kaplan-Meier法和對數(shù)秩檢驗存活率差異，Cox比例風險模型進行多因素分析。

2 結(jié)果

2.1 各組細胞因子水平

各組血清和BALF中IL27，IL29，IL31和 IL33水平，見表1。NSCLC患者血清IL29水平顯著高于BBS組(P=0.043)。然而，各組血清IL27，IL31和IL33并沒有組間差異。各組支氣管肺泡灌洗液IL27、IL29、IL31、IL33水平均無統(tǒng)計學差異。

表1 各組患者血清IL-27，IL-29，IL-31和IL-33的分布值/(pg·ml-1)

2.2 非小細胞肺癌患者亞組分析

ⅢB期非小細胞肺癌患者血清IL-29及受體水平高于Ⅳ期NSCLC患者(P=0.034)，但肺泡灌洗液IL-29水平亞組間無明顯的差異，見表2。

表2 ⅢB期和Ⅳ期NSCLC患者血清及BALF的細胞因子水平/pg·mL-1

2.3 各因子水平與化療效果及疾病進展預(yù)后的關(guān)系

化療后部分緩解(PR)肺癌患者的肺泡灌洗液IL-27及受體水平顯著高于病情穩(wěn)定(SD)患者(P=0.006)。然而，SD患者的支氣管肺泡灌洗液IL-29及受體水平高于疾病進展(PD)患者(P=0.048)，BALF中IL31和IL33及受體水平和化療效果之間沒有相關(guān)性。高齡，體重下降和體能狀況為化療效果的預(yù)后因素，相反地，IL27，IL29，IL31，IL33 的水平(血清和BALF)與化療效果無顯著相關(guān)性，見表3。

表3 晚期NSCLC患者預(yù)后因素和血清參數(shù)對化療效果的影響

3 討論

腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的形成由多個病理機制控制，同時受到腫瘤抑制因子和刺激因子介導(dǎo)［3］。本研究中，抗腫瘤增殖和抗血管生成因子如IL27，IL29，在支氣管肺泡灌洗液中的水平低于血清中的水平。此外，我們觀察到在ⅢB期與Ⅳ期非小細胞肺癌組的(血清和支氣管肺泡灌洗液)IL27和IL29及受體水平最高。非小細胞肺癌組的高水平IL27，IL29受體，削弱了癌癥患者的免疫機制，出現(xiàn)一系列并發(fā)癥。眾所周知癌癥患者有最嚴重的血管生成現(xiàn)象。患者血清IL27及受體水平顯著高于BALF中的水平，原因可能是由于這種細胞因子的起源引起的。IL27可以釋放自內(nèi)皮細胞、造血細胞、Th17細胞淋巴細胞、B淋巴細胞和NK細胞［4］。這可能也是BBS組支氣管肺泡灌洗液中的IL27及受體水平比健康組高的原因。結(jié)節(jié)病患者的血管生成活性增加。Sekiya等［5］研究得出，結(jié)節(jié)病患者血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)可作為胸外臟器受累的預(yù)測因子，并作為皮質(zhì)類固醇治療的參數(shù)。血清VEGF可作為結(jié)節(jié)病的預(yù)后指標。我們的研究結(jié)果與其結(jié)果一致，因為BBS患者支氣管肺泡灌洗液中IL33及受體，促血管生成因子水平高于非小細胞肺癌組。

本研究中ⅢB期非小細胞肺癌患者血清IL29及受體水平高于Ⅳ期NSCLC患者(P=0.034)。化療后部分緩解(PR)肺癌患者的肺泡灌洗液IL-27水平顯著高于病情穩(wěn)定(SD)患者。而且，SD患者支氣管肺泡灌洗液IL29水平比PD患者高。

新發(fā)現(xiàn)的細胞因子，白細胞介素29屬于干擾素家族且為Ⅲ型干擾素［6］，除了其主要報道的抗病毒活性外，Ⅲ型干擾素也已經(jīng)顯示出抗多種人類腫瘤細胞系的作用包括結(jié)腸癌和食管癌［7］。但沒有數(shù)據(jù)研究非小細胞肺癌患者血清和肺泡灌洗液IL27和IL29及受體水平的報道。

總之，血清和支氣管肺泡灌洗液中IL27，IL29及受體水平的檢驗在臨床實踐中具有一定的價值，能夠預(yù)測癌癥患者疾病進展情況。

［1］周朝鋒，吉慶偉，林英忠.新型促炎細胞因子 IL-36的免疫調(diào)節(jié)作用及其與免疫相關(guān)疾病的關(guān)系〔J〕.細胞與分子免疫學雜志，2014，30(8):889-891.

［2］張 健，陳干濤.急性腦出血患者 IL-6和 TNF-α水平與預(yù)后的關(guān)系〔J〕.實用癌癥雜志，2013，27(6):652-652.

［3］趙 楠，趙明峰.人源IL-21增強細胞因子誘導(dǎo)殺傷細胞抗白血病作用及其機制研究〔J〕.中華血液學雜志，2012，33(10):823-828.

［4］徐繼業(yè)，王記南，徐克友，等.化療對晚期非小細胞肺癌外周血 Th1/Th2細胞因子表達的影響〔J〕.實用癌癥雜志，2012，27(3):230-231.

［5］Sekiya M，Owada A，Miura K，et al.Serum vascular endothelial growth factor as a possible prognostic indicator in sarcoidosis〔J〕.Lung，2003，181(5):259-265.

［6］單保恩.IL-12家族細胞因子:腫瘤免疫治療研究的熱點分子〔J〕.中國腫瘤生物治療雜志，2011，18(3):239-243.

［7］鄭海軍，陳 偉.人白細胞介素-29的研究進展〔J〕.中國生物制品學雜志，2012，25(1):118.