微生物學(xué)

冷凍致亞致死損傷的金黃色葡萄球菌修復(fù)機(jī)制

黃忠民，呂海鵬，艾志錄，等

目的：研究冷凍致亞致死損傷的金黃色葡萄球菌修復(fù)過程中的細(xì)胞修復(fù)機(jī)制。方法：以冷凍致亞致死損傷的金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）為研究對(duì)象，探討了不同修復(fù)時(shí)間細(xì)胞的修復(fù)情況；利用透射電子顯微鏡觀察修復(fù)啟動(dòng)過程中超微結(jié)構(gòu)的變化；通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR（Real-time PCR）方法測(cè)定了修復(fù)過程中轉(zhuǎn)錄弱化子（msrR）、鐵離子ABC轉(zhuǎn)運(yùn)ATP結(jié)合蛋白（fhuC）、細(xì)胞色素b（cytB）基因表達(dá)量的變化，通過紫外分光光度法測(cè)定細(xì)胞外泄漏物含量、細(xì)胞活性氧（ROS）和超氧化物歧化酶（SOD）活性。結(jié)果：修復(fù)3 h后，99%以上冷凍致亞致死損傷的金黃色葡萄球菌完成修復(fù)，修復(fù)后細(xì)胞對(duì)高鹽脅迫抗性恢復(fù)。Real-time PCR分析結(jié)果表明，msrR和fhuC基因表達(dá)量顯著下調(diào)，而cytB表達(dá)量顯著上調(diào)。修復(fù)過程中冷凍致亞致死損傷的金黃色葡萄球菌細(xì)胞表面超微結(jié)構(gòu)變化比較明顯，細(xì)胞表面從光滑透明變得致密結(jié)實(shí)，細(xì)胞內(nèi)紫外吸收物質(zhì)泄漏速度也在逐漸變慢，同時(shí)細(xì)胞中的ROS含量降低，SOD酶活性減弱。結(jié)論：冷凍致亞致死損傷的金黃色葡萄球菌修復(fù)過程中，可能是通過細(xì)胞膜完整性的修復(fù)，細(xì)胞恢復(fù)對(duì)高鹽脅迫的抵抗能力；通過基因調(diào)控降低細(xì)胞內(nèi)ROS的含量，降低活性氧對(duì)細(xì)胞的毒害作用。同時(shí)通過產(chǎn)能代謝相關(guān)基因（cytB）的調(diào)控為細(xì)胞提供修復(fù)所需要的能量，最終冷凍致亞致死損傷的細(xì)胞得到修復(fù)。

冷凍致亞致死損傷；金黃色葡萄球菌；細(xì)胞膜完整性；修復(fù)啟動(dòng)

來源出版物：微生物學(xué)報(bào), 2015, 55(11): 1409-1417聯(lián)系郵箱：索標(biāo)，suobiao1982@126.com