陳乃東，程 艷，陳乃富，金 暉(.皖西學(xué)院生物與制藥工程學(xué)院，安徽六安23702;2.皖西中藥與天然藥物工程技術(shù)研究中心，安徽六安23702;3.安徽醫(yī)科大學(xué)，安徽合肥230032)

霍山石斛(Dendrobium huoshanense C.Z.Tang et S.J.Cheng)又稱米斛，河南石斛(Dendrobium henanense J.L.Lu et L.X Gao)均為蘭科石斛屬多年生草本植物，可藥食兩用?；羯绞忻髂?、調(diào)和陰陽、壯陽補(bǔ)腎、養(yǎng)顏駐容，從而達(dá)到保健益壽的功效［1-3］;河南石斛具有益胃生津、滋陰清熱的功效［4］?；羯绞闹饕瘜W(xué)成分為多糖、生物堿［5］、黃酮，其獨(dú)特的藥理作用是由其化學(xué)成分決定的。報(bào)道發(fā)現(xiàn)霍山石斛主要成分多糖具有增強(qiáng)機(jī)體免疫活性、抗氧化活性、抑制白內(nèi)障形成和發(fā)展的藥理作用［6］。

現(xiàn)代醫(yī)學(xué)早已證明，微量元素與人體健康生長發(fā)育和防治疾病具有密切關(guān)系［7］，中藥中許多微量元素與中藥的性、味、功效均具有密切的相關(guān)性［8-9］。中藥材中重金屬含量超標(biāo)直接影響中成藥與飲片的質(zhì)量和療效，是人們用藥安全有效的潛在隱患。因此，利用原子吸收光譜進(jìn)行金屬元素含量的測定是一個(gè)重要的方向。該試驗(yàn)通過研究霍山石斛、河南石斛根、莖、葉的金屬元素含量，進(jìn)一步為霍山石斛、河南石斛質(zhì)量評價(jià)與規(guī)范化栽培提供參考依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 儀器和試劑 202A-型數(shù)顯電熱恒溫干燥箱(上海錦屏儀器儀表有限公司)，precisa XB 120A電子分析天平(上海天平儀器廠)，WFX-110型原子吸收分光光度計(jì)(北京瑞利分析儀器公司)，銅、鉛、鉻、鎂、鈣、鈉、鋅、鋇空心陰極燈(北京瑞利分析儀器公司)，馬弗爐SR30-6-30箱式電阻爐和高溫電爐自動(dòng)恒溫控制臺(tái)(上海錦屏儀器儀表有限公司)，雙層圓盤電爐(220 V、1 000 W，浙江嘉興市鳳橋電熱器廠)。濃硫酸、濃鹽酸、濃硝酸(均為優(yōu)級純)。所有器皿和容器均用10%硝酸浸泡3 d，使用前用蒸餾水沖洗干凈。

1.2 試驗(yàn)材料 試驗(yàn)材料2014年10月采于安徽霍山太平畈，品種經(jīng)植物細(xì)胞工程安徽省工程技術(shù)研究中心陳乃富教授鑒定為霍山石斛(Dendrobium huoshanense C.Z.Tang et S.J.Cheng)、河南石斛(Dendrobium henanense J.L.Lu et L.X Gao)。采集3年生植株，105℃烘干至恒重，備用。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 樣品處理及樣品溶液的配制。電子分析天平準(zhǔn)確稱取樣品，剪碎，103℃烘干至恒重，瓷坩堝中加熱炭化后置于馬弗爐中500℃灰化5 h，取出冷卻，加10%硝酸溶液2 ml溶解，轉(zhuǎn)入25 ml容量瓶中，蒸餾水洗滌容器，洗液合并于容量瓶并稀釋定容，搖勻即得樣品溶液。同法制備空白溶液。試驗(yàn)設(shè)3組重復(fù)。

1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制與測定。精密吸取各金屬標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，加10%硝酸溶液并以蒸餾水稀釋至所需濃度梯度，考察線性關(guān)系。依次用原子吸收光譜進(jìn)行測定［10］，不同金屬元素的儀器操作條件如表1所示。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系 從各金屬元素回歸方程和線性范圍(表2)可看出，各金屬標(biāo)準(zhǔn)溶液在0～1.0 mg/L范圍內(nèi)均具有良好的線性關(guān)系。

表1 原子吸收光譜法測鉛、銅、鉻、鈣、鋇、鋅的工作參數(shù)

表2 各金屬元素回歸方程和線性范圍

2.2 霍山石斛、河南石斛根、莖、葉中金屬元素含量的測定 由試驗(yàn)測得2種石斛藥材中鉛、銅、鉻、鈣、鋇、鋅金屬元素含量(表3)可見，霍山石斛、河南石斛中各金屬含量存在差異，且不同藥用部位金屬元素含量也有所不同。2種石斛藥材中根、莖、葉不同部位金屬銅質(zhì)量分?jǐn)?shù)變幅為2.05～7.66 mg/kg、金屬鉛質(zhì)量分?jǐn)?shù)變幅為0.11～0.25 mg/kg、金屬鉻質(zhì)量分?jǐn)?shù)變幅為4.11～11.24 mg/kg、金屬鈣質(zhì)量分?jǐn)?shù)變幅為275.50～615.78 mg/kg、金屬鋅質(zhì)量分?jǐn)?shù)變幅為3.45～6.87 mg/kg、金屬鋇質(zhì)量分?jǐn)?shù)變幅為70.86～371.92 mg/kg。根據(jù)中華人民共和國外經(jīng)貿(mào)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《藥用植物及制劑外經(jīng)貿(mào)綠色行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》WM/T2-2004對藥用植物制劑的限量要求:Pb 應(yīng)≤5.0 mg/kg、Cu 應(yīng)≤20.0 mg/kg［11］。供試樣品中重金屬鉛、銅元素含量均在上述標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定限度范圍內(nèi)，說明霍山石斛、河南石斛所含鉛、銅重金屬含量整體上是安全的。

表3 石斛中鉛、銅、鉻、鈣、鋇、鋅6種金屬的含量 mg/kg

對比分析根、莖、葉中的金屬總量，霍山石斛中總金屬量由高到低依次為莖(965.59 mg/kg)＞根(781.63 mg/kg)＞葉(634.55 mg/kg)，河南石斛中根莖葉總金屬量由高到低依次為葉(701.47 mg/kg)＞莖(590.13 mg/kg)＞根(365.96 mg/kg)，說明霍山石斛與河南石斛不同器官對重金屬的積累能力存在差異。從人體必需的生理上較重要的微量元素(Cu、Zn)的總量比較，霍山石斛根、莖、葉Cu和Zn總量高低順序?yàn)榍o(11.54 mg/kg)＞根(9.87 mg/kg)＞葉(7.16 mg/kg)，河南石斛根、莖、葉Cu和 Zn總量高低順序?yàn)榍o(12.64 mg/kg)＞根(9.90 mg/kg)＞葉(5.54 mg/kg);從宏量元素(Ca、Ba)總量比較，霍山石斛根、莖、葉Ca和Ba總量高低順序?yàn)榍o(947.72 mg/kg)＞根(762.60 mg/kg)＞葉(615.98 mg/kg)，而河南石斛根、莖、葉Ca和Ba總量高低順序?yàn)槿~(691.51 mg/kg)＞莖(573.27 mg/kg)＞根(346.36 mg/kg)。從莖所含有益金屬元素總量的角度比較，霍山石斛莖有益金屬元素總量高于河南石斛莖。霍山石斛藥用部位莖金屬元素總量高于根、葉，有益金屬總量也高于根、葉，說明霍山石斛莖的藥用價(jià)值最大，其莖中含有較高的人體必需的具有重要生理功能的微量元素Zn、Cu、Ca等，它們在人體的正常生理活動(dòng)中，對人體的生長發(fā)育、抗擊疾病和防止衰老均起著非常重要的作用［12］。該研究結(jié)果為中醫(yī)臨床上多以霍山石斛莖入藥提供了參考依據(jù)。

3 結(jié)論

霍山石斛、河南石斛重金屬含量直接影響其用藥的安全性、有效性，該試驗(yàn)研究表明，霍山石斛、河南石斛重金屬含量整體上是安全的。通過測定霍山石斛、河南石斛根、莖、葉的金屬元素含量，發(fā)現(xiàn)霍山石斛、河南石斛含有豐富的人體必需金屬元素。經(jīng)比較分析，根、莖、葉中各金屬元素含量也有所差異，霍山石斛莖中金屬元素總量高于根和葉，河南石斛葉中金屬元素總量高于莖和根，這可能與根、莖、葉對金屬元素的積累能力有關(guān)。該研究結(jié)果將進(jìn)一步為霍山石斛、河南石斛質(zhì)量評價(jià)與規(guī)范化栽培提供參考依據(jù)。

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