汪亮

（黑龍江省大慶市大同區(qū)畜牧獸醫(yī)水產(chǎn)局，黑龍江 大慶 163515）

兔病毒性出血癥的流行、診斷及防控

汪亮

（黑龍江省大慶市大同區(qū)畜牧獸醫(yī)水產(chǎn)局，黑龍江 大慶 163515）

兔病毒性出血癥又名兔瘟，是由兔病毒性出血癥病毒所引起的兔的一種急性敗血癥、高度接觸性、致死性、以全身實(shí)質(zhì)器官出血為主要特征的傳染病。

1 流行病學(xué)

本病的主要傳染源是病兔和帶毒兔，傳播途徑主要為病兔或帶毒兔與健康兔接觸而感染，也可間接傳播。本病只發(fā)生于家兔，毛用兔的易感性略高于皮用兔，其中長(zhǎng)毛兔最易感，哺乳仔兔很少發(fā)病死亡。本病發(fā)病急，病死率高，常呈爆發(fā)性流行，發(fā)病率和病死率均高達(dá)95%以上。一年四季均可發(fā)生，北方以冬春季多發(fā)，可能與冬季寒冷、飼料單一有關(guān)。

2 臨診癥狀

潛伏期1～3d?？煞?型：

2.1 最急性型多見(jiàn)于非疫區(qū)或流行初期，常發(fā)生于夜間，無(wú)任何前兆或僅表現(xiàn)短暫興奮，突然倒地，抽搐，尖叫數(shù)聲而死。

2.2 急性型病兔食欲減少或停止，精神沉郁，被毛粗亂，結(jié)膜潮紅，體溫升高達(dá)41℃以上。臨死前病兔癱軟，不能站立，但不時(shí)掙扎，高聲尖叫，抽搐，鼻孔流出泡沫性液體，死后呈角弓反張。

2.3 慢性型多見(jiàn)于老疫區(qū)或流行后期。潛伏期和病程較長(zhǎng)，精神不振，采食減少，迅速消瘦，衰弱而死。耐過(guò)兔生長(zhǎng)緩慢，發(fā)育較差。

3 病理變化

本病以實(shí)質(zhì)器官淤血、出血為主要特征。氣管黏膜充血、出血，有多量帶血泡沫淤塞。肺充血、出血，支氣管管腔中有帶血泡沫阻塞。心肌變性，心內(nèi)膜及外膜下有點(diǎn)狀出血。腹腔積水，呈淡紅色乃至血色。肝腫大淤血，肝實(shí)質(zhì)脂肪變性，呈淺棕色或土黃色。脾腫大呈紫黑色。腸系膜淋巴結(jié)腫大出血。

4 實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)

兔病毒性出血癥檢疫檢驗(yàn)常用方法有間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、血凝試驗(yàn)和血凝抑制試驗(yàn)。

4.1 器材準(zhǔn)備（1）96孔V型或U型微量板，微型振蕩器，50μL移液器。（2）pH7.2、0.01mol/L磷酸鹽緩沖液配制。甲液：十二水磷酸氫二鈉35.8g，加蒸餾水1000mL。乙液：二水磷酸二氫鈉15.6g，加蒸餾水1000mL。使用時(shí)取甲液72mL、乙液28mL，加氯化鈉8.76g，120℃高壓滅菌30min。（3）1%人“O”型血球：加入10～20倍的生理鹽水或磷酸鹽緩沖液于人“O”型抗凝血中，洗滌3～4次，每次以2000轉(zhuǎn)/分離心15min，吸取上層血漿、白細(xì)胞等上清液，制成1%紅細(xì)胞懸液。（4）被檢病料的處理：取病死兔肝臟剪碎，用生理鹽水或磷酸鹽緩沖液作1：10稀釋，研制成懸液待檢。

4.2 血凝試驗(yàn)（檢測(cè)抗原）在血凝板上每排2～11孔各加入磷酸鈉緩沖液25μL，然后在第一孔和第二孔各加入病料懸液25μL，用微量稀釋器從第二孔依次將病毒作倍比稀釋至第十一孔，棄去25μL。第十二孔為正常兔肝懸液對(duì)照，每孔加入1%人“O”型紅細(xì)胞懸液25μL，于微型振蕩器搖均，置37℃溫箱45min，待對(duì)照孔紅細(xì)胞完全沉淀后，觀察血凝圖象判定。血凝試驗(yàn)結(jié)果判定：以出現(xiàn)“＋＋”凝集的病毒最大稀釋度為該病毒的血凝價(jià)。血凝價(jià)高于1:2以上時(shí)，可判為陽(yáng)性。多數(shù)病兔的肝組織懸液，病毒血凝價(jià)在1：80～1：640之間。計(jì)算含4個(gè)血凝單位的抗原濃度：抗原應(yīng)稀釋倍數(shù)=血凝滴度（血凝價(jià)）/4。

4.3 血凝抑制試驗(yàn)（檢測(cè)血清抗體）血凝抑制試驗(yàn)可進(jìn)一步鑒定病毒或進(jìn)行免疫監(jiān)測(cè)等。（1）陽(yáng)性血清：按常法對(duì)健康兔用兔瘟疫苗進(jìn)行免疫。采集血液并分離血清，冰凍保存?zhèn)溆?。血凝抑制價(jià)應(yīng)在1:320以上，用前作1：10稀釋。（2）陰性血清：血凝抑制價(jià)應(yīng)在1：5以下，用前作1：10稀釋。（3）被檢血清：試驗(yàn)前作1：5稀釋。于微量板的第二孔至第十二孔中加入磷酸鹽緩沖液各50μL。然后在第一孔和第二孔各加入1：5稀釋的被檢血清50μL，用微量稀釋器從第二孔依次作倍比稀釋至第十孔，最后棄去50μL。第十一孔為陽(yáng)性血清對(duì)照，第十二孔為抗原對(duì)照。各孔加入濃度為4個(gè)單位的病毒抗原50μL。置室溫（18～20℃）作用20min。每孔加入1%入“O”型紅細(xì)胞懸液50μL，振蕩后室溫靜置30min，觀察結(jié)果。血凝抑制試驗(yàn)結(jié)果判定：血清對(duì)照、紅細(xì)胞對(duì)照、陽(yáng)性血清對(duì)照結(jié)果應(yīng)為不凝集紅細(xì)胞，抗原對(duì)照、陰性血清對(duì)照應(yīng)出現(xiàn)凝集現(xiàn)象，本試驗(yàn)成立。以完全抑制紅細(xì)胞凝集的最大稀釋度為該血清的血凝抑制滴度。血凝抑制價(jià)在1：10以下的家兔，不能抵御兔出血癥病毒的攻擊。

5 防控措施

預(yù)防本病應(yīng)主要采取消毒、隔離、封鎖、毀尸等綜合性措施。目前本病無(wú)有效治療藥物，但病初可用高免血清治療（成年兔2～3mL），療效較好。疫區(qū)定期用組織滅活疫苗進(jìn)行接種，一年免疫二次，劑量1mL，皮下注射。免疫期可持續(xù)半年以上。

10．3969/J.ISSN．1671-6027．2015．10.006