李　佳, 劉愛勇, 王　麗, 張美云, 李曉鳳

(1. 內(nèi)蒙古自治區(qū)包頭市疾病預(yù)防控制中心 免疫規(guī)劃科, 內(nèi)蒙古自治區(qū) 包頭, 014030;

內(nèi)蒙古自治區(qū)包頭市腫瘤醫(yī)院, 2. 放療科; 3. 預(yù)?？? 4. 腫瘤綜合內(nèi)科, 內(nèi)蒙古自治區(qū) 包頭, 014030)

胃癌患者血清及癌組織中MMP-3的表達及臨床意義

李佳1, 劉愛勇2, 王麗3, 張美云4, 李曉鳳4

(1. 內(nèi)蒙古自治區(qū)包頭市疾病預(yù)防控制中心 免疫規(guī)劃科, 內(nèi)蒙古自治區(qū) 包頭, 014030;

內(nèi)蒙古自治區(qū)包頭市腫瘤醫(yī)院, 2. 放療科; 3. 預(yù)?？? 4. 腫瘤綜合內(nèi)科, 內(nèi)蒙古自治區(qū) 包頭, 014030)

摘要:目的研究胃癌患者血清及癌組織中基質(zhì)金屬蛋白酶-3(MMP-3)的表達特點，探討檢測血清MMP-3在臨床上反映胃癌病程變化的意義。方法選取胃癌患者45例為觀察組，同期健康體檢者30例為對照組，比較手術(shù)前觀察組與對照組血清MMP-3水平，分析觀察組MMP-3在胃癌組織、癌旁組織中的表達情況，及其與臨床病理因素的關(guān)系。結(jié)果胃癌組織MMP-3陽性染色率顯著高于癌旁組織(P<0.01)；觀察組血清MMP-3水平顯著高于對照組(P<0.01); 血清MMP-3水平與腫瘤浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期密切相關(guān)(P<0.01)。結(jié)論胃癌患者MMP-3于癌組織及血清中均高表達，血清MMP-3在預(yù)測胃癌侵襲轉(zhuǎn)移，評估胃癌惡性程度等可能具有重要的臨床應(yīng)用價值。

關(guān)鍵詞:胃癌; 基質(zhì)金屬蛋白酶-3; 酶聯(lián)免疫吸附測定; 免疫組織化學(xué)染色法

胃癌為常見的惡性腫瘤之一，嚴重威脅人類健康[1]，積極尋找胃癌新的防治手段，提高胃癌診斷治療水平，一直為臨床研究的熱點[2]。研究表明，腫瘤細胞是否發(fā)生侵襲、轉(zhuǎn)移嚴重影響腫瘤患者的預(yù)后[3]。腫瘤細胞的侵襲轉(zhuǎn)移過程為多環(huán)節(jié)級聯(lián)反應(yīng)，腫瘤細胞通過破壞基底膜、降解細胞外間質(zhì)實現(xiàn)浸潤和轉(zhuǎn)移過程[4]?；|(zhì)金屬蛋白酶類(MMPs)為蛋白水解酶，降解細胞外基質(zhì)和基底膜中的成分以促進白細胞浸潤周圍組織是其主要生物學(xué)功能[5-6]。本研究通過檢測胃癌患者血清和癌組織中基質(zhì)金屬蛋白酶-3(MMP-3)的表達特點，擬探討血清MMP-3與胃癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系及其潛在的臨床應(yīng)用價值。

1資料與方法

1.1　一般資料

選取2009年9月-2011年8月收治的胃癌術(shù)前患者45例為觀察組，其中男25例，女20例；年齡30～72歲，平均(55.2±5.6)歲。按照世界衛(wèi)生組織(WHO)病理組織學(xué)分類和TNM分期標準[7]: Ⅰ～Ⅱ期15例，Ⅲ～Ⅳ期30例；伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移30例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移15例；腫瘤發(fā)生部位：賁門、胃底、胃體23例，胃角、胃竇22例；高、中分化腺癌11例，低分化腺癌34例；浸潤深度：未達漿膜12例，達到或超過漿膜33例。同期健康體檢者30例為對照組，其中男19例，女11例；年齡31～75歲，平均(53.2±3.6)歲。2組受試者年齡、性別等一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，具有可比性(P>0.05)。

1.2　方法

采集2組受試者空腹外周靜脈血5 mL，離心后分離血清, -70 ℃冰箱保存待測，酶聯(lián)免疫吸附測定(Elisa法)檢測血清MMP-3水平。收集觀察組術(shù)中胃癌組織，及距癌組織邊緣>5 cm的癌旁組織，免疫組織化學(xué)染色法檢測觀察組胃癌組織、癌旁組織中MMP-3表達情況：每張切片在200倍光鏡下，選5個不同視野，各視野計數(shù)200個癌細胞。陽性(+)判斷標準：染色陽性細胞比例≥30%。

1.3　觀察指標

分析觀察組MMP-3在胃癌組織、癌旁組織中的表達情況；比較手術(shù)前觀察組與對照組血清MMP-3水平；分析血清MMP-3水平與臨床病理因素的關(guān)系。

2結(jié)果

2.1　MMP-3在觀察組胃癌組織及癌旁組織中的表達

MMP-3免疫組織化學(xué)染色結(jié)果表明，觀察組胃癌組織MMP-3陽性染色率為68.9%(31/45)，癌旁組織MMP-3陽性染色率為13.3%(6/45)，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。

2.2　2組血清MMP-3水平比較

觀察組術(shù)前血清MMP-3水平顯著高于對照組(P<0.01)，見表1。

表1　2組血清MMP-3水平比較

與對照組比較，**P<0.01。

2.3　觀察組血清MMP-3水平與臨床病理因素的關(guān)系

觀察組腫瘤浸潤達到或超過漿膜的患者，其血清MMP-3水平顯著高于未達漿膜患者(P<0.01); 發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者的血清MMP-3水平顯著高于未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者(P<0.01); TNM分期為Ⅲ～Ⅳ期的患者血清MMP-3水平顯著高于Ⅰ～Ⅱ期的患者(P<0.01); 血清MMP-3水平與患者年齡、性別、腫瘤直徑、部位、分化程度無關(guān)(P>0.05), 見表1。

表2　觀察組患者血清MMP-3水平與臨床病理

3討論

胃腫瘤細胞的侵襲轉(zhuǎn)移是一個多步驟、多環(huán)節(jié)的級聯(lián)反應(yīng)過程[8]，除腫瘤細胞本身的侵襲力，腫瘤細胞還須通過對可分泌某些細胞外基質(zhì)水解酶和基底膜降解酶，并通過多種途徑，降解細胞外基質(zhì)，破壞屏障[9]。MMPs為一類具有鋅離子依賴性的內(nèi)源性蛋白水解酶[10], 其在降解細胞外基質(zhì)的同時，還能破壞基底膜的完整性，促進腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移和浸潤[11]。有研究[12]表明, MMP-3作為MMPs家族一員，在某些癌癥癌細胞轉(zhuǎn)移和浸潤過程中發(fā)揮重要作用，除黏附軟骨蛋白多糖、多種膠原、纖維結(jié)合素、層黏蛋白等，還可激活多種細胞因子，參與腫瘤細胞的發(fā)生、發(fā)展過程。有研究[13]發(fā)現(xiàn)，抑制腫瘤細胞分泌MMP-3，可明顯削弱腫瘤細胞的浸潤和轉(zhuǎn)移能力。

廖如奕等[15]研究發(fā)現(xiàn)，胃癌組織中MMP-3表達量明顯高于正常胃黏膜組織, MMP-3表達與胃癌的分化程度、浸潤深度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。許威等[14]報道，運用Elisa法檢測胃癌患者術(shù)前MMP-3含量，其血清MMP-3水平與浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠處轉(zhuǎn)移、臨床分期密切相關(guān)。本研究結(jié)果顯示，與癌旁組織相比，胃癌組織中MMP-3表達率較高，胃癌患者血清MMP-3水平與正常對照組比較顯著升高，提示胃癌腫瘤細胞MMP-3活性增強, MMP-3在患者血清與癌組織中的水平存在一定的相關(guān)性，檢測血清MMP-3水平可能可用來判斷胃癌的活動性；隨著胃癌浸潤深度的增加，術(shù)前血清MMP-3水平增加明顯升高，且伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者，其血清MMP-3水平顯著高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，提示MMP-3水平變化與胃癌的轉(zhuǎn)移和侵襲有關(guān)；MMP-3隨胃癌臨床病理分期升高而顯著增高，表明其不僅對于胃癌有較高的診斷價值，且對胃癌的分期也有較積極的檢測意義，與上述報道結(jié)果一致。

綜上所述，由于血清標本比胃癌組織標本更易獲得，因而通過檢測血清MMP-3水平來輔助診斷胃癌的早期發(fā)生，預(yù)測胃癌侵襲轉(zhuǎn)移，評估胃癌惡性程度等可能具有重要的臨床實用價值與應(yīng)用前景。

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Expression and clinical significance of matrix metalloproteinases-3 level in serum and tumor tissue in patients with gastric cancer

LI Jia1, LIU Aiyong2, WANG Li3, ZHANG Meiyun4, LI Xiaofeng4

(1.DepartmentofImmunizationProgram,BaotouCenterforDiseaseControlandPrevention,

Baotou,InnerMongolia, 014030; 2.DepartmentofRadiotherapy; 3.Department

ofPreventionandHealthcare;DepartmentofMedicalOncology,BaotouCancer

Hospital,Baotou,InnerMongolia, 014030)

ABSTRACT:ObjectiveTo explore the expression of matrix metalloproteinases-3 (MMP-3) in serum and tumor tissue and to investigate the significance of serum level of MMP-3 in reflecting course of gastric cancer. MethodsForty five patients with gastric cancer were designed as observation group and 30 healthy people were designed as control group. The serum level of MMP-3 before operation was compared between two groups. The expression of MMP-3 in tumor tissue and tumor-adjacent tissue and its relationship with clinic pathological factors were observed and analyzed. ResultsThe rate of positive MMP-3staining in tumor tissue was significantly higher than that in tumor-adjacent tissue (P<0.01). The serum level of MMP-3 in the observation group was significantly higher than that in the control group (P<0.01). Serum level of MMP-3 was associated with depth of infiltration, lymphatic metastasis and clinical stage of cancer (P<0.01). ConclusionThe level of MMP-3 is highly expressed in serum and tumor tissue in patients with gastric cancer. Serum level of MMP-3 may be valuable in prediction of invasion and metastasis and assessment of malignant degree of gastric cancer.

KEYWORDS:gastric cancer; matrix metalloproteinases-3; ELISA; immunohistochemistry

通信作者:李曉鳳, E-mail: btlixiaofeng@126.com

基金項目:中國高校醫(yī)學(xué)期刊臨床專項資金(11321896)

收稿日期:2015-01-15

中圖分類號:R 735.2

文獻標志碼:A

文章編號:1672-2353(2015)05-038-03DOI: 10.7619/jcmp.201505012