錢 斐，王 威，孟月蘭

(揚州市藥品檢驗所，揚州 225009)

?

復(fù)方氨酚烷胺膠囊中三種主要成分的均勻度探索比較

錢 斐，王 威，孟月蘭

(揚州市藥品檢驗所，揚州 225009)

目的：建立并考查復(fù)方氨酚烷胺膠囊中對乙酰氨基酚、馬來酸氯苯那敏及咖啡因3個組分的均勻度。方法：采用HPLC法同時測定3個組分，并將結(jié)果進行相關(guān)參數(shù)的分析。結(jié)果：其中三個廠家的含量均勻度不符合規(guī)定，產(chǎn)品之間方差分析均存在極顯著性差異(P<0.01)。結(jié)論：產(chǎn)品中標(biāo)示含量較低的成分，容易存在含量均勻度不合格問題；各廠家生產(chǎn)環(huán)境和工藝不同，產(chǎn)品之間的內(nèi)在質(zhì)量也存在差異。

復(fù)方氨酚烷胺膠囊，含量均勻度，對乙酰氨基酚，馬來酸氯苯那敏，咖啡因

復(fù)方氨酚烷胺膠囊為抗感冒藥，是企業(yè)生產(chǎn)最多、市場銷售最廣泛的非處方(OTC)抗感冒藥復(fù)方制劑，其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》化學(xué)藥品及制劑第五冊[1]。該質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中分別采用容量滴定法測定對乙酰氨基酚、鹽酸金剛烷胺的含量，而未測定馬來酸氯苯那敏和咖啡因的含量；另質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中亦無含量均勻度檢查項，對處方中藥物每粒的含量均勻性不能實施監(jiān)控。尤其是馬來酸氯苯那敏和咖啡因，每粒劑量為2 mg和15 mg，均屬于小劑量，按有關(guān)規(guī)定[2]應(yīng)建立含量均勻度檢查項。本文參照有關(guān)文獻[6，7],采用高效液相色譜法同時測定該制劑中對乙酰氨基酚、馬來酸氯苯那敏和咖啡因三成分的含量，并在此基礎(chǔ)上建立了含量均勻度檢查方法，同時進行了比較，考查5個生產(chǎn)企業(yè)上述3組分的含量均勻度情況。實驗結(jié)果表明，本文的方法簡便，專屬性強，重復(fù)性好，可用于該制劑的質(zhì)量控制；同時表明生產(chǎn)工藝不同，產(chǎn)品的均勻性存在顯著性差異。

1 儀器與試藥

美國Waters高效液相色譜儀(包括Waters2695型泵，2996二極管陣列-紫外檢測器，Empower色譜工作站公司)；METTLER TOLEDO AG135電子分析天平；量瓶和移液管均經(jīng)過檢定和校正。對乙酰氨基酚對照品(批號100018-200408，含量100.0%)、馬來酸氯苯那敏對照品(批號100047-200606，含量99.7%)、咖啡因?qū)φ掌?批號171215-200608，含量100.0%)均購自中國藥品生物制品檢定所；復(fù)方氨酚烷胺膠囊[市售品：A企業(yè)(批號131211)；B企業(yè)(批號131102)；C企業(yè)(批號130701)；D企業(yè)(批號14010103)；E企業(yè)(批號140101)]；甲醇為色譜純，水為純化水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱：Alltima C18(4.6 mm×150 mm，5 μm)；流動相：甲醇-0.05 mol/L KH2PO4(用磷酸調(diào)節(jié)pH至3.0)-三乙胺(20∶80∶0.02)；流速：1.0 ml/min；柱溫：30 ℃；檢測波長：216 nm，進樣量：20 μl。 各組分的分離度均符合要求。

2.2 含量測定

2.2.1 溶液制備

2.2.1.1 對照品溶液的制備 分別精密稱取在105 ℃干燥至恒重的對乙酰氨基酚、馬來酸氯苯那敏及咖啡因?qū)φ掌?25.05、9.75和30.37 mg，分別置100 ml量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度。作為單一對照品儲備液。分別精密量取上述對照品儲備液20、2 和5 ml置同一100 ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，即得對照品溶液。

2.2.1.2 供試品溶液的制備 取本品20粒，傾出內(nèi)容物，精密稱定，研細，精密稱取適量(約相當(dāng)于對乙酰氨基酚25 mg)，置100 ml量瓶中，加流動相適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

2.2.1.3 陰性對照溶液的制備 按處方工藝，取對乙酰氨基酚、馬來酸氯苯那敏、咖啡因以外的其他藥物制成陰性對照樣品。精密稱取陰性對照樣品適量，按供試品溶液的制備方法操作，制得陰性對照溶液。分別精密吸取對照品溶液、供試品溶液和陰性對照溶液進樣，按“2.1”項下色譜條件分析，結(jié)果見圖1。

1.馬來酸氯苯那敏 2.對乙酰氨基酚 3.咖啡因

2.2.2 方法學(xué)驗證[6，7]結(jié)果對乙酰氨基酚、馬來酸氯苯那敏和咖啡因分別在2.50～250.10、0.20～19.50和0.61～60.74 μg/ml濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，回歸方程分別為：Y=30 762X+63.79(r=1.000 0)、Y=39 597X+1 540.5(r=1.000 0)、Y=78 432X-40 984(r=0.999 9)；3個組分6次進樣的精密度，RSD分別為0.09%、0.42%和0.84%；供試品溶液在室溫條件下24 h內(nèi)分5次測定其穩(wěn)定性，RSD分別為0.16%、0.59%和0.48%；取同一批樣品同法制備6份供試品溶液進行重復(fù)性試驗，RSD分別為0.71%、1.54%和0.93%，均小于2.0%；取已知含量的樣品共9份，制成

一定濃度的溶液，分成3組，每組分別精密加入3種單一對照品溶液制成高、中、低3種濃度的混合溶液，進行加樣回收試驗，測得對乙酰氨基酚、馬來酸氯苯那敏、咖啡因的平均回收率分別為101.31%、101.64%和100.94%，RSD分別為0.72%、2.29%和0.61%。

2.2.3 樣品含量測定 取本品20粒，傾出內(nèi)容物，精密稱定，研細，精密稱取適量(約相當(dāng)于對乙酰氨基酚25 mg)，置100 ml量瓶中，加流動相適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液，進樣，記錄峰面積，按外標(biāo)法計算對乙酰氨基酚、馬來酸氯苯那敏、咖啡因的含量。同時按原標(biāo)準(zhǔn)[1]收載的方法測定對乙酰氨基酚的含量，兩種方法測定組分對乙酰氨基酚的含量結(jié)果基本相同。見表1。

表1 樣品含量測定結(jié)果(n=2)

2.3 含量均勻度測定

2.3.1 測定方法與結(jié)果 參照文獻[2]操作，隨機取樣品10粒，除去膠囊殼，內(nèi)容物分別置10只100 ml量瓶中，加水振搖溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過。精密量取續(xù)濾液5 ml，置50 ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻。進樣，按外標(biāo)法分別計算每粒以標(biāo)示量為100的相對含量X，并求其平均值X和標(biāo)準(zhǔn)差S以及標(biāo)示量與均值之差A(yù)，計算A+1.8S[3]。結(jié)果見表2-表4。C企業(yè)A+S=18.7，D企業(yè)A+S=41.1，批號130701和14010103樣品的馬來酸氯苯那敏含量均勻度不符合規(guī)定。E企業(yè)A+S=10.5，另取20粒復(fù)測，以前后30粒計算結(jié)果符合規(guī)定。E企業(yè)A+S=17.4，批號140101樣品的咖啡因含量均勻度不符合規(guī)定。

2.3.2 均勻度分布 各組分含量均勻度分布圖，見圖2。

1.A企業(yè) 2.B企業(yè) 3.C企業(yè) 4.D企業(yè) 5.E企業(yè)

2.3.3 方差分析 按表2-表4數(shù)據(jù)，求算各廠家3組分的組間、組內(nèi)離差平方和[4，5]，方差分析結(jié)果見表5。表5可見，各家產(chǎn)品之間的馬來酸氯苯那敏、咖啡因和對乙酰氨基酚的含量均勻度均存在著極顯著性差異(P<0.01)。

表2 馬來酸氯苯那敏含量均勻度

表3 對乙酰氨基酚含量均勻度

表4 咖啡因含量均勻度

表5 不同廠家3組分的方差分析

3 討論

3.1 本品中除馬來酸氯苯那敏、咖啡因和對乙酰氨基酚3組分以外的其他組分及輔料，對本實驗無干擾，本文陰性對照圖譜已有顯示。其中的人工牛黃和鹽酸金剛烷胺兩種組分也為主要成分，其質(zhì)量考查有待進一步探索。

3.2 樣品中3個組分的加樣回收率均較理想，其中對乙酰氨基酚含量測定，與按原標(biāo)準(zhǔn)[1]收載的含量測定方法進行過比較，結(jié)果一致。說明此檢測方法可靠，可用于該制劑的含量及含量均勻度的測定，并且簡單方便。

3.3 本實驗對五個代表性生產(chǎn)企業(yè)的復(fù)方氨酚烷胺膠囊進行含量均勻度測定，五家樣品的對乙酰氨基酚成分均符合規(guī)定；有一家產(chǎn)品的咖啡因成分A+S>15.0，不符合規(guī)定；馬來酸氯苯那敏成分有兩家A+S>15.0，不符合規(guī)定，有一家A+1.8S>15.0，A+S<15.0，另取20粒復(fù)試，30粒總計A+1.45S<15.0，判為符合規(guī)定。對五家樣品的含量測定結(jié)果繪制成均勻度分布圖，很顯然均勻度不符合規(guī)定的樣品，問題主要在含量與標(biāo)示量之間的差值偏大，S值還不是主要原因。由此分析在生產(chǎn)過程中，劑量越小的成分越要注意投料的精確性。同時進一步表明標(biāo)準(zhǔn)[2]規(guī)定“每粒標(biāo)示量不大于25 mg的組分，應(yīng)檢查含量均勻度”的必要性。因此，建議該制劑標(biāo)準(zhǔn)，增加馬來酸氯苯那敏和咖啡因的含量測定和含量均勻度檢查。

3.4 本文以每粒測得的標(biāo)示量含量進行方差分析，對5個生產(chǎn)企業(yè)的產(chǎn)品進行均勻度探索比較，結(jié)果樣品中的咖啡因、馬來酸氯苯那敏和對乙酰氨基酚成分的均勻度均存在極顯著性差異(P<0.01)。說明不同的生產(chǎn)環(huán)境和工藝，影響著產(chǎn)品的內(nèi)在質(zhì)量。因此，生產(chǎn)企業(yè)應(yīng)嚴(yán)格按GMP要求生產(chǎn)管理，以確保質(zhì)量穩(wěn)定。

1 衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)[S].二部.第五冊.1996：60-61

2 中國藥典[S].二部.2010：附錄88

3 陶巧鳳. 含量均勻度檢查方法的比較與評價[J]. 中國藥品標(biāo)準(zhǔn), 2005，6(4)：32-34

4 羅旭,王璽.含量均勻度檢查法統(tǒng)計特性的探討——速效感冒膠囊中撲爾敏含量均勻度的檢查[J].藥物分析雜志,1990,10(3):142-145

5 羅旭,王璽,陶巧鳳.減免隨機性方法誤差對含量均勻度檢查的影響[J].藥學(xué)學(xué)報,1989，24(9):697-701

6 尹萌，孟月蘭，徐力.復(fù)方氨酚烷胺膠囊中3種主要成分的溶出度比較[J].現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)，2011,28(8)：768-770

7 錢斐，李倚云，孟月蘭.AV值比較不同廠家復(fù)方氨酚烷胺膠囊的體外溶出差異[J].實用臨床醫(yī)藥雜志，2014,18(1):15-18

2015-04-14

R927.11

A

1006-5687(2015)04-0007-04