陳承貴，梁愛仙，劉 敏，楊 敏，鄭黨兒，李玉蘭*

(1.深圳市藥品檢驗(yàn)所，深圳 518057； 2. 廣州鐵路集團(tuán)公司中心計(jì)量所，廣州 510080)

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藥品質(zhì)量與檢驗(yàn)

紫外分光光度法測(cè)定別嘌醇片含量的不確定度評(píng)定

陳承貴1，梁愛仙1，劉 敏1，楊 敏1，鄭黨兒2，李玉蘭1*

(1.深圳市藥品檢驗(yàn)所，深圳 518057； 2. 廣州鐵路集團(tuán)公司中心計(jì)量所，廣州 510080)

目的：建立紫外分光光度法測(cè)定別嘌醇片含量的不確定度評(píng)定方法。方法：采用紫外分光光度法測(cè)定別嘌醇片的含量，建立測(cè)量模型，從吸光度、體積、稱量等來源中確定影響不確定度的分量，并加以評(píng)定量化，得出合成不確定度和擴(kuò)展不確定度。結(jié)果：別嘌醇片標(biāo)示含量為100.4%，擴(kuò)展不確定度為1.4%(k=2)。結(jié)論：本實(shí)驗(yàn)測(cè)定別嘌醇片含量的結(jié)果是可靠且可控的。

別嘌醇片，不確定度，紫外分光光度法，評(píng)定

測(cè)量的目的是為了確定被測(cè)量的量值，但是測(cè)量誤差的存在，使測(cè)量結(jié)果的可信度難以判定。不確定度評(píng)定正是判定測(cè)量結(jié)果可信度的依據(jù)。別嘌醇片屬于抗痛風(fēng)藥，《中國(guó)藥典》2010年版二部采用紫外分光光度法測(cè)定含量，該方法操作簡(jiǎn)便，結(jié)果準(zhǔn)確，但實(shí)際測(cè)量過程中存在的問題仍需探討。本實(shí)驗(yàn)依據(jù)相關(guān)資料與文獻(xiàn)[1-5]，評(píng)估影響不確定度的因素及其各個(gè)不確定度分量對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響大小，建立適用于紫外分光光度法測(cè)定別嘌醇片含量的不確定度評(píng)定方法。

1 儀器與試藥

梅特勒-托利多XS205DU電子分析天平，規(guī)格：81 g/220 g，分度值d=0.000 1 g；檢定分度值e=0.001 g；單標(biāo)線量瓶100 ml，容量允差±0.10 ml(A級(jí))；單標(biāo)線量瓶500 ml，容量允差±0.25 ml(A級(jí))；單標(biāo)線吸量管5 ml，容量允差±0.015 ml(A級(jí))；島津Shimadzu UV2600紫外分光光度計(jì)，比色皿：1 cm ，透光率的最大允差為±0.3%；氫氧化鈉、鹽酸均為分析純，水為超純水；別嘌醇片(規(guī)格：0.1 g，批號(hào)20130902，廣東彼迪藥業(yè)有限公司)。

2 方法

3 測(cè)量模型及不確定來源分析

(1)

第2部分計(jì)算標(biāo)示含量，為供試品含量與標(biāo)示量的比值，按公式(2)計(jì)算：

(2)

式中：W為供試品的含量，%；

A為供試品溶液測(cè)得的吸光度值，無量綱；

c為供試品溶液的百分濃度，即100 ml中所含溶質(zhì)的克數(shù)，g/100 ml；

l為吸收池的光路長(zhǎng)度(cm)，等于1 cm；

V1為供試品初定容體積，ml；

V2為量取續(xù)濾液體積， ml；

V3為供試品終定容體積，ml；

M為供試品取樣重量，g；

B樣品為標(biāo)示百分含量，以兩份平行樣的測(cè)量平均值計(jì)算，%；

Z標(biāo)示為標(biāo)示量，g，等于0.1 g；

實(shí)際上B樣品的結(jié)果是由表1中兩份平行試樣的測(cè)定數(shù)據(jù)得出的，重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)不確定度不可忽略。在式(2)中還應(yīng)加入重復(fù)性修正量R，其值視為零，不確定

度非零。加入后式(2)變?yōu)槭?3)：

B樣品=B樣品+R

(3)

式中：B樣品為考慮重復(fù)性修正量R后，別嘌醇片的實(shí)際標(biāo)示含量，%；

R為重復(fù)性修正量R，其值視為零，不確定度非零，%。

取12份平行樣，測(cè)定結(jié)果見表1。

表1 紫外分光光度法測(cè)定別嘌醇片含量的數(shù)據(jù)

3.2 不確定度來源分析 不確定度來源分析用因果圖表示，見圖1-圖3。

圖1 加入R后的不確定度來源因果圖

圖2 B樣品的不確定度來源因果圖

圖3 W的不確定度來源因果圖

4 結(jié)果分析與評(píng)定

4.1 評(píng)定別嘌醇片標(biāo)示含量的標(biāo)準(zhǔn)不確定度u(B樣品) 由式(2)，各輸入量無關(guān)，依據(jù)JJF1059.1—2012公式(30)計(jì)算：

其中：由式(1)，各輸入量無關(guān)，依據(jù)JJF1059.1—2012公式(29)計(jì)算：

urel(W)=

4.1.1 吸光度帶入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel(A) 本實(shí)驗(yàn)使用的紫外分光光度計(jì)最大允差產(chǎn)生的不確定度，主要由其透射比允差引起的A的標(biāo)準(zhǔn)不確定度u(A)產(chǎn)生。查本例的原始記錄得，供試品溶液平均吸光度A為0.568。紫外分光光度計(jì)檢定證書和說明書顯示在工作波長(zhǎng)范圍內(nèi)時(shí)，透射比示值T允許誤差為±0.3%，已知A=lg(1/T)，A=0.568，A的允差是非線性的，所以，A=0.568附近的允差按如下計(jì)算：

T的允許誤差為±0.3%，即T=0.270 4±0.003，

T∈(0.267 4，0.273 4)，

由A=lg(1/T)可求得：A∈(0.563 2, 0.572 8)，

分布半寬a=(0.572 8-0.563 2)/2=0.004 8

估計(jì)為矩形分布，其標(biāo)準(zhǔn)不確定度為：

本例僅考查儀器允差產(chǎn)生的影響：

4.1.2 體積帶入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度

由操作描述可知，V1=100 ml，u(V1)由兩個(gè)小分量線性疊加，故：

4.1.2.2 終定容體積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel(V3) 同“4.1.2.1”項(xiàng)下方法計(jì)算。

4.1.2.3 量取續(xù)濾液體積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel(V2) 同“4.1.2.1”項(xiàng)下方法計(jì)算。

4.1.3 稱量帶入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度

4.1.3.1 稱量樣品M帶入的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度urel(M)u(M)由天平允差引起M的標(biāo)準(zhǔn)不確定度。由于本實(shí)驗(yàn)已考慮每份平行樣取樣質(zhì)量的天平重復(fù)性，含于重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)不確定度u(R)之中，故此處不再考慮天平重復(fù)性引起的不確定度。供試品稱量約為0.1 g，查天平(XS205DU)檢定證書，量程為0～5 g的允差絕對(duì)值為0.05 mg，認(rèn)為矩形分布：

=2.13×10-4

=0.040 9

=1.45×10-5

4.1.4 評(píng)定供試品含量的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定urel(W)

=5.16×10-3

4.1.5 評(píng)定供試品標(biāo)示含量的標(biāo)準(zhǔn)不確定度u(B樣品)

=5.16×10-3

由表1，取前兩份平行樣的平均值，B樣品=100.395 56%，故：

u(B樣品) =urel(B樣品)×B樣品

=5.16×10-3×1.003 955 6

=5.18×10-3

4.2 評(píng)定別嘌醇片標(biāo)示含量的重復(fù)性標(biāo)準(zhǔn)不確定度u(R) 由表1中12份平行樣的值Bi樣品獲得重復(fù)性測(cè)量數(shù)據(jù)，用Bessel公式計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)差：

實(shí)際檢驗(yàn)中只需要兩份平行樣即可，則：

=4.59×10-3

4.3 合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度

=6.9×10-3

4.4 擴(kuò)展不確定度評(píng)定 依據(jù)JJF1059.1—2012《測(cè)量不確定度評(píng)定與表示》，置信概率為95%時(shí)，取k=2。按《中國(guó)藥典》二部凡例及352頁規(guī)定，保留1位有效數(shù)字，故U取一位有效數(shù)字，則：

U=kuc(B樣品)=2×6.9×10-3=1.4(%)

5 討論與總結(jié)

別嘌醇片標(biāo)示含量結(jié)果為：100.4%±1.4%，第二項(xiàng)為擴(kuò)展不確定度U之值，k=2。各不確定度分量及值見表2。

表2 各相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)不確定度、符號(hào)及值一覽表

從評(píng)定結(jié)果看，本文的不確定度主要來源于紫外分光光度計(jì)的測(cè)量與供試品稀釋倍數(shù)所引起的不確定度，本法以紫外分光光度計(jì)的透射比允差評(píng)定，表2顯示結(jié)果雖小，卻是最大的不確定度分量。單標(biāo)吸量管移取供試品溶液，包括吸量管自身、環(huán)境以及操作所帶入的不確定度，對(duì)總的不確定度貢獻(xiàn)較大。同時(shí)本實(shí)驗(yàn)使用的十萬分之一天平，若采取逐片減重法求算平均片重，會(huì)增大實(shí)際所引入的不確定度，而本文選用方法其不確定度較小，可忽略不計(jì)。

綜上所述，所有儀器和器具定期檢定、校準(zhǔn)與維護(hù)，同時(shí)操作科學(xué)合理，都有利于減少不確定度的產(chǎn)生。本文評(píng)定出測(cè)量結(jié)果的合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度及擴(kuò)展不確定度，為評(píng)價(jià)檢驗(yàn)報(bào)告提供科學(xué)依據(jù)，本實(shí)驗(yàn)采用紫外分光光度法測(cè)定別嘌醇片標(biāo)示含量的結(jié)果可靠可控，為同類實(shí)驗(yàn)提供有益的參考。

1 JJF 1059.1—2012，測(cè)量不確定度評(píng)定與表示[S].

2 JJF 1135—2005，化學(xué)分析測(cè)量不確定度評(píng)定[S].

3 中國(guó)藥典[S].二部. 2010: 352

4 JJG 196—2006，常用玻璃量器[S].

5 范治云，譚會(huì)萍.紫外分光光度法測(cè)定阿普唑侖片含量結(jié)果的不確定度的評(píng)定[J].中國(guó)藥房，2011，22(1)：50-51

2015-04-29

R927.2

A

1006-5687(2015)04-0001-04

*通訊作者：李玉蘭，E-mail：liyulan@szda.gov.cn。