● 郭結(jié)曉 林鈺文

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不同來源白芍中芍藥苷含量比較※

● 郭結(jié)曉1林鈺文2

目的：比較不同來源白芍中芍藥苷含量，為其藥材質(zhì)量控制提供一定的參考依據(jù)。方法：采用HPLC法測(cè)定不同產(chǎn)地、規(guī)格白芍藥材和飲片中芍藥苷含量，從化學(xué)成分上評(píng)價(jià)其質(zhì)量差異。結(jié)果：白芍藥材中野生品中芍藥苷含量明顯高于栽培品，以安徽亳州芍藥中芍藥苷含量最高，栽培品為3.82%，野生品為4.91%，經(jīng)炮制加工后，白芍飲片中芍藥苷流失較嚴(yán)重，其平均含量約為2.5%，但符合2010年《中國(guó)藥典》白芍含量測(cè)定項(xiàng)下大于1.2%要求。結(jié)論：生長(zhǎng)環(huán)境和炮制加工方法是影響白芍中芍藥苷含量的主要因素。

白芍 芍藥苷 含量測(cè)定 HPLC

芍藥為我國(guó)常用傳統(tǒng)中藥材，以其干燥根為主要來源的中藥飲片有赤芍與白芍二種[1]。從植物來源上，白芍和赤芍均來源于毛茛科芍藥屬植物，僅是加工方法有所差異，赤芍干燥即可，而白芍需要水煮去皮后才能入藥。白芍主產(chǎn)于安徽亳州、浙江杭州和山東菏澤，主要為栽培品，偶有野生品[2]，屬于補(bǔ)虛藥，長(zhǎng)于補(bǔ)血平抑肝陽(yáng)[3]?，F(xiàn)代研究表明，白芍含有芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、苯甲酰芍藥苷等單萜苷類和苯甲酸、沒食子酸等酸類成分[3,4]。除了前述安徽亳州、浙江杭州和山東菏澤三個(gè)主要產(chǎn)區(qū)外，白芍在其他地區(qū)分布也較為廣泛，產(chǎn)地眾多，研究表明不同產(chǎn)地白芍中芍藥苷含量有一定的差異[5]，而栽培品和野生品含量是否有一定的差異，相關(guān)的文獻(xiàn)報(bào)道較少，本文化學(xué)成分上探索藥材產(chǎn)地、生長(zhǎng)環(huán)境(野生與家種)對(duì)白芍有效成分的影響，為其藥材質(zhì)量控制提供一定的參考依據(jù)。

1 材料

Agilent-1100高效液相色譜儀，包括DAD檢測(cè)器、自動(dòng)進(jìn)樣器、在線脫氣、四元泵(美國(guó)安捷倫科技有限公司)；BS210S型電子天平(北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司)。乙腈為色譜純，甲醇、磷酸等試劑均為分析純，水為超純水。芍藥苷對(duì)照品(批號(hào)：0900-201109) 購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所(純度≥98.0%)；白芍采集與浙江、安徽、四川、山東等地，經(jīng)廣州中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室鑒定為毛茛科植物芍藥(Paeonia lactiflora Pall．)干燥根。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱：Agilent Extend C18 (250 mm × 4.6 mm 5 μm) ；流動(dòng)相：乙腈-0.1%磷酸溶液(14∶86)；流速：1.0 mL·min-1；柱溫：25 ℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：230 nm；進(jìn)樣量為10 μL。

2.2 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取芍藥苷對(duì)照品適量，置于50 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，制得60μg·mL-1對(duì)照品溶液，過0.45 μm微孔濾膜，即得。

2.3 供試品溶液制備[1]取樣品粉末0.1g，精密稱定，置500mL量瓶中，加稀乙醇35mL，超聲處理(功率240W，頻率45kHz)30分鐘，放冷，加稀乙醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 精密量取對(duì)照品溶液0.1、0.2、.0.4、0.6、0.8、1.0mL，分別置于10 mL量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，然后按照“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣10μL，測(cè)定芍藥苷的峰面積，以峰面積Y為縱坐標(biāo)，進(jìn)樣量(μg)為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程分別為：Y=864.474X-5.678(R2=0.9996)。

2.5 精密度試驗(yàn) 精密吸取芍藥苷對(duì)照品溶液10 μL，按上述色譜條件重復(fù)進(jìn)樣5次，照上述色譜條件測(cè)定峰面積積分值。結(jié)果芍藥苷峰面積積分值的RSD=1.17%(n=5)，表明儀器精密度良好。

2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一份供試品溶液，按“2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，照上述色譜條件，在0、12、24、36、48 h進(jìn)樣測(cè)定。結(jié)果芍藥苷峰面積的RSD=1.66%(n=5)，表明供試品溶液在48 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.7 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批白芍樣品5份，按“2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，照上述色譜條件分別進(jìn)樣10 μL。結(jié)果芍藥苷峰面積的RSD=2.37%(n=5)，表明方法重復(fù)性良好。

2.8 加樣回收率試驗(yàn) 精密稱取白芍樣品0.05 g，加入適量芍藥苷的對(duì)照品，按“2.3”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，照上述色譜條件測(cè)定，計(jì)算加樣回收率。結(jié)果芍藥苷的平均回收率為98.4%，RSD=2.33%(n=5)。

2.9 含量測(cè)定 按照上述含量測(cè)定方法，測(cè)定不同白芍樣品中芍藥苷的含量。結(jié)果表明，白芍藥材中野生品中芍藥苷含量明顯高于栽培品，按產(chǎn)地比較，安徽亳州芍藥中芍藥苷含量最高，栽培品為3.82%，野生品為4.91%，藥材經(jīng)炮制加工后，飲片中芍藥苷含量明顯降低，白芍飲片中芍藥苷流失較嚴(yán)重，其平均含量為2.5%，但符合2010年《中國(guó)藥典》白芍含量測(cè)定項(xiàng)下大于1.2%要求。見圖1、表1、表2。

A.對(duì)照品；B.白芍藥材；1. 芍藥苷

名稱編碼來源產(chǎn)地芍藥苷/%RSD/%平均值/%栽培品野生品1PaeonialactifloraPall．浙江杭州3．201．122PaeonialactifloraPall．浙江磐安3．441．143PaeonialactifloraPall．浙江縉云3．341．094PaeonialactifloraPall．安徽亳州3．820．965PaeonialactifloraPall．安徽阜陽(yáng)3．700．836PaeonialactifloraPall．四川中江3．711．327PaeonialactifloraPall．四川巴中3．551．358PaeonialactifloraPall．山東菏澤2．861．471PaeonialactifloraPall．浙江杭州4．070．742PaeonialactifloraPall．浙江麗水4．120．863PaeonialactifloraPall．安徽亳州4．911．024PaeonialactifloraPall．安徽阜陽(yáng)4．840．885PaeonialactifloraPall．四川羅江4．771．076PaeonialactifloraPall．四川中江4．880．917PaeonialactifloraPall．內(nèi)蒙古4．240．848PaeonialactifloraPall．黑龍江4．271．279PaeonialactifloraPall．吉林3．861．383．454．44

表2 不同產(chǎn)地白芍飲片中芍藥苷含量的比較(n=5)

3 討論

白芍來源于芍藥，一般以栽培品入藥，野生品經(jīng)加工炮制后可做赤芍入藥。本研究表明，由于生長(zhǎng)環(huán)境不同，栽培品和野生品中芍藥苷含量差異較大，野生品含量明顯偏高。白芍經(jīng)過水煮去皮等環(huán)節(jié)處理后，芍藥苷流失嚴(yán)重，而赤芍省去了水煮和去皮等環(huán)節(jié)，其含量必定高于白芍。因此，如果白芍中以芍藥苷為質(zhì)量評(píng)價(jià)的指標(biāo)，白芍加工炮制中水煮和去皮等環(huán)節(jié)是否有必要？而且赤芍與白芍同時(shí)來源芍藥，因加工不同，而產(chǎn)生兩種不同的藥材飲片，雖然兩種飲片中成分大致一致，而其臨床應(yīng)用卻有所區(qū)別，因此白芍和赤芍化學(xué)成分的區(qū)別與其臨床療效的是否有一定相關(guān)性，有必要進(jìn)一步進(jìn)行研究。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典2010年版(一部)[S].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010：96-97，147-147.

[2]馮耀南.中藥材商品規(guī)格質(zhì)量鑒別[M].廣東廣州：暨南大學(xué)出版社，1995：96.

[3]周紅濤，駱亦奇，胡世林，等.赤芍與白芍的化學(xué)成分含量比較研究[J].中國(guó)藥學(xué)雜志，2003，38(9)：654-657.

[4]楊 柳，許舜軍，吳金雄，等.白芍、赤芍的比較研究概況[J].中藥新藥與臨床藥理，2011，22(5)：577-580.

[5]李 軍，孟祥松，李 飛，等.不同產(chǎn)地白芍中芍藥苷含量的比較研究[J].醫(yī)藥前沿，2013，9：104-105.

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