林茂華，王智輝，唐雨晴，胡春榮

·短篇論著·

難治性支氣管哮喘患者血清腫瘤壞死因子α水平變化及其臨床意義

林茂華，王智輝，唐雨晴，胡春榮

目的 觀察難治性支氣管哮喘患者血清腫瘤壞死因子α(TNF-α)水平變化，并探討其臨床意義。方法 選取2012年2月—2013年1月惠州市博羅縣人民醫(yī)院收治的支氣管哮喘患者68例，根據(jù)哮喘診斷標準分為難治性哮喘患者34例(DTA組)和普通哮喘患者34例(非DTA組)，另選取同期體檢健康者34例(對照組)。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗測定血清TNF-α及白介素6(IL-6)水平，自動血細胞分析儀測定嗜酸粒細胞直接計數(shù)(EOS)，肺功能測試儀測定第一秒用力呼氣容積(FEV1)。比較3組患者血清TNF-α、IL-6水平及EOS、FEV1，并分析血清TNF-α水平與血清IL-6水平、EOS及FEV1的相關性。結果 DTA組、非DTA組患者血清TNF-α、IL-6水平及EOS高于對照組，F(xiàn)EV1低于對照組(P<0.05)。DTA組患者血清TNF-α、IL-6水平及EOS高于非DTA組，F(xiàn)EV1低于非DTA組(P<0.05)。Pearson相關分析結果顯示，血清TNF-α水平與血清IL-6水平、EOS呈正相關(r值分別為0.725、0.837，P值分別為0.017、0.003)，與FEV1呈負相關(r=-0.742，P=0.012)。結論 難治性支氣管哮喘患者血清TNF-α水平明顯升高，且與FEV1呈負相關，與血清IL-6水平、EOS呈正相關，臨床上可將TNF-α阻斷劑作為難治性支氣管哮喘的治療藥物之一。

哮喘；腫瘤壞死因子α

支氣管哮喘是由中性粒細胞、嗜酸粒細胞、氣道上皮細胞等多種細胞及組分引起的慢性炎性疾病[1]。難治性支氣管哮喘(DTA)僅占哮喘的5%～10%，但其治療難度較大，患者大劑量吸入糖皮質激素后仍無法得到有效控制[2]。臨床研究證明，DTA患者臨床表現(xiàn)為肺功能下降、氣道高反應性及氣道梗阻[3]。目前，對氣道炎癥及氣道重塑的研究有望為治療DTA提供新思路。有學者提出，腫瘤壞死因子α(TNF-α)在DTA氣道炎癥的產(chǎn)生和發(fā)展中發(fā)揮重要作用。本研究旨在探究DTA患者血清TNF-α水平變化及其臨床意義，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012年2月—2013年1月惠州市博羅縣人民醫(yī)院收治的支氣管哮喘患者68例，根據(jù)哮喘診斷標準[4]分為難治性哮喘患者34例(DTA組)和普通哮喘患者34例(非DTA組)，另選取同期體檢健康者34例(對照組)。排除標準：(1)合并高血壓、糖尿病、冠心病患者；(2)心、肝、腎功能嚴重障礙患者；(3)既往有肺癌、肺結核等肺疾病患者。本研究經(jīng)博羅縣人民醫(yī)院倫理委員會批準，患者均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 方法 采取患者清晨空腹靜脈血5 ml，EDTA抗凝，室溫靜置30 min，3 000 r/min離心 10 min，取上清液，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗測定血清TNF-α及白介素6(IL-6)水平，人腫瘤壞死因子試劑盒由武漢中幟生物科技公司提供，IL-6試劑盒由北京經(jīng)緯博恒生物科技公司提供。另取2 ml靜脈血進行EDTA-K2抗凝，使用自動血細胞分析儀測定嗜酸粒細胞直接計數(shù)(EOS)。采用肺功能測試儀測定第一秒用力呼氣容積(FEV1)，測試儀由德國Jaeger公司提供。

1.3 觀察指標 比較3組患者血清TNF-α、IL-6水平及EOS、FEV1，并分析血清TNF-α水平與血清IL-6水平、EOS及FEV1的相關性。

2 結果

2.1 3組受試者一般資料比較 3組受試者年齡、性別、吸煙情況比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05，見表1)。

表1 3組受試者一般資料比較

注：a為F值

2.2 3組受試者血清TNF-α、IL-6水平及EOS、FEV1比較 3組受試者血清TNF-α、IL-6水平及EOS、FEV1比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；DTA組、非DTA組患者血清TNF-α、IL-6水平及EOS高于對照組，F(xiàn)EV1低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。DTA組患者血清TNF-α、IL-6水平及EOS高于非DTA組，F(xiàn)EV1低于非DTA組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05，見表2)。

Table 2 Comparison of serum levels of TNF-α and IL-6，EOS and FEV1among the three groups

組別例數(shù)TNF-α(ng/L)IL?6(pg/L)EOS(×109/L)FEV1(%)對照組3450 32±16 53131 59±61 270 25±0 0889 23±3 17DTA組34118 21±101 54284 27±104 580 38±0 0960 58±10 23非DTA組3469 47±28 72172 96±71 440 30±0 1283 47±9 54F值5 7344 8634 7534 862P值0 0320 0420 0470 040

注：TNF-α=腫瘤壞死因子α，IL-6=白介素6，EOS=嗜酸粒細胞直接計數(shù)，F(xiàn)EV1=第一秒用力呼氣容積

2.3 相關性分析 Pearson相關分析結果顯示，血清TNF-α水平與血清IL-6水平、EOS呈正相關(r值分別為0.725、0.837，P值分別為0.017、0.003)，與FEV1呈負相關(r=-0.742，P=0.012)。

3 討論

支氣管哮喘是以氣道高反應性和變應性炎癥為主要特征的慢性疾病，患者肺功能急劇下降，出現(xiàn)呼吸道梗阻[5-6]。糖皮質激素作為治療支氣管哮喘的首選藥物，在多數(shù)哮喘疾病的治療中取得良好成效[7]，但對DTA的治療效果不佳。有報道稱，DTA的炎癥機制包括嗜酸粒細胞型、單核細胞型等，部分患者在大劑量糖皮質激素作用下仍存在較為嚴重的氣道炎性反應。有研究發(fā)現(xiàn)，支氣管哮喘患者的血清TNF-α水平異常[8]，但其臨床意義仍有待研究。

本研究結果顯示，DTA組、非DTA組患者血清TNF-α、IL-6水平及EOS明顯高于對照組，F(xiàn)EV1明顯低于對照組；DTA組患者血清TNF-α、IL-6水平及EOS明顯高于對照組和非DTA組，F(xiàn)EV1明顯低于對照組和非DTA組。哮喘患者氣道重塑包括氣道上皮、平滑肌、血管等，主要由氣道炎癥引起[9]。DTA與非DTA患者FEV1存在差異性表明DTA患者的肺功能明顯下降，氣道重塑更為明顯。IL-6的生物效應十分復雜，具有抗炎和促炎的雙重特性，其能誘導B淋巴細胞分泌IgE，IgE與受體結合后激活Th2細胞，促進DTA患者的氣道炎性反應[10]。IL-6作為IgE合成的必需細胞因子，在DTA中的高表達提示其在DTA進展中發(fā)揮重要作用。為進一步明確TNF-α的表達與DTA之間的聯(lián)系，本研究中Pearson相關分析結果顯示，血清TNF-α水平與FEV1呈負相關，提示血清TNF-α水平升高對DTA患者的肺功能產(chǎn)生負面影響，可能參與DTA的炎性反應和氣道重塑。此外，TNF-α與IL-6呈正相關。TNF-α主要由巨噬細胞和單核細胞產(chǎn)生，在機體炎性反應和免疫反應中扮演重要角色[11]。TNF-α可以選擇性地殺傷腫瘤細胞，參與免疫調節(jié)，一般當機體受到細菌、病毒侵襲時TNF-α分泌增多[12]。因此推測TNF-α與IL-6在哮喘中具有一定的協(xié)同作用。EOS作為DTA患者氣道炎癥的主要表型之一，與TNF-α呈正相關，推斷TNF-α可能通過直接活化EOS發(fā)揮作用。同時，EOS能夠進一步產(chǎn)生TNF-α，抑制自身凋亡。方麗萍等[13]認為，TNF-α可通過介導血管內皮細胞黏附白細胞、EOS、淋巴細胞等在炎癥部位聚集，刺激IL-6細胞因子生成，使嗜酸粒細胞、肥大細胞聚集，抑制EOS凋亡，從而產(chǎn)生氣道持續(xù)性炎癥，與本研究結果相似。

綜上所述，難治性支氣管哮喘患者血清TNF-α水平明顯升高，且與FEV1呈負相關，與血清IL-6水平、EOS呈正相關，可能是影響DTA病情和療效的主要作用機制。原淑莉[14]提出抗IgE生物制劑、表型特異性治療、支氣管熱成形療法、支氣管肺泡灌洗術、氦氧混合氣體驅動療法等治療DTA的臨床效果良好。筆者認為臨床上可將TNF-α阻斷劑作為DTA的治療藥物之一，但其安全性和可行性有待進一步研究。

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(本文編輯：毛亞敏)

Changes and Clinical Significance of Serum TNF-α Level in Patients with Refractory Asthma

LINMao-hua,WANGZhi-hui,TANGYu-qing,etal.DepartmentofRespiratoryMedicine,People′sHospitalofBoluoCounty,Huizhou516100,China

Objective To observe the changes of serum TNF-α level in patients with refractory asthma，to investigate its clinical significance.Methods From February 2012 to January 2013 in the People′s Hospital of Boluo County，a total of 68 patients with asthma were selected，and they were divided into A group(with refractory asthma，n=34)and B group(with ordinary asthma,n=34)according to asthma diagnosis standard；a total of 34 healthy cases were selected as control group at the same time.ELISA was used to detect the serum levels of TNF-α and IL-6，automatic hemocyte analyzer was used to detect eosinophilic granulocyte direct count(EOS)，pulmonary function test instrument was used to detect FEV1.Serum levels of TNF-α and IL-6，EOS and FEV1were compared among the three groups；correlations between serum TNF-α level and serum IL-6 level，EOS，F(xiàn)EV1were analyzed.Results Serum levels of TNF-α and IL-6，EOS of groups A and B were statistically significantly higher than those of control group，while FEV1of groups A and B was statistically significantly lower than that of control group，respectively(P<0.05).Serum levels of TNF-α and IL-6，EOS of A group were statistically significantly higher than those of B group，while FEV1of A group was statistically significantly lower than that of B group(P<0.05).Pearson correlation analysis showed that，serum TNF-α level was positively correlated with serum IL-6 level(r=0.725,P=0.017)，EOS(r=0.837,P=0.003)，respectively；was negatively correlated with FEV1(r=-0.742,P=0.012).Conclusion Serum TNF-α level is obviously increased in patients with refractory asthma，and it is negatively correlated with FEV1，positively correlated with serum IL-6 level and EOS，so TNF-α blockers can be used in the treatment of refractory asthma.

Asthma；Tumor necrosis factor-alpha

516100廣東省惠州市博羅縣人民醫(yī)院呼吸內科

林茂華，王智輝，唐雨晴，等.難治性支氣管哮喘患者血清腫瘤壞死因子α水平變化及其臨床意義[J].實用心腦肺血管病雜志，2015，23(6)：51-52，57.[www.syxnf.net]

R 562.25

B

10.3969/j.issn.1008-5971.2015.06.015

2015-03-23；

2015-06-16)

Lin MH,Wang ZH,Tang YQ,et al.Changes and clinical significance of serum TNF-α level in patients with refractory asthma[J].Practical Journal of Cardiac Cerebral Pneumal and Vascular Disease，2015，23(6)：51-52，57.