吳 翔 倪少義▲ 鄭厚斌 鄭少敏 姚曉濤 陳育娟陳俊鵬 王榕生 林細(xì)佳 方培群 何潔壁 吳獻(xiàn)章

1.廣東省揭陽市揭東縣（區(qū)）計(jì)劃生育服務(wù)站，廣東揭陽 515500；2.廣東省計(jì)劃生育科學(xué)技術(shù)研究所，廣東廣州510631；3.廣東省佛山市南海區(qū)里水鎮(zhèn)人口和計(jì)劃生育服務(wù)所，廣東佛山 528244；4.廣東省人口發(fā)展研究院，廣東廣州 510631；5.廣東省揭陽市人民醫(yī)院，廣東揭陽 522000；6.廣東省普寧市計(jì)劃生育服務(wù)中心，廣東普寧 515300；7.廣東省汕頭市金平區(qū)計(jì)劃生育服務(wù)站，廣東汕頭 515041

輸精管結(jié)扎術(shù)（簡稱男扎術(shù)）具有安全、有效、簡單、經(jīng)濟(jì)等優(yōu)點(diǎn)[1]，目前常用手術(shù)方式主要有兩種：經(jīng)陰囊的傳統(tǒng)輸精管低位結(jié)扎術(shù)（本文簡稱為低位結(jié)扎）和經(jīng)腹股溝的輸精管高位結(jié)扎術(shù)（本文簡稱為高位結(jié)扎）。男性參與計(jì)劃生育不僅有利于控制家庭規(guī)模和降低生育率水平，而且有利于保障育齡婦女生殖健康，進(jìn)一步改善和提高婦女的社會地位，對家庭和諧、社會穩(wěn)定及發(fā)展有重要作用[2]。本課題通過研究不同術(shù)式輸精管結(jié)扎術(shù)術(shù)后對象外周靜脈血以及精漿中的8-OhdG 水平，試圖探討其與并發(fā)癥發(fā)生之間的相互關(guān)系，從DNA 氧化損傷水平進(jìn)行研究，期望完善對不同術(shù)式輸精管結(jié)扎術(shù)的臨床應(yīng)用。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機(jī)收集2007 年3 月～2015 年3 在揭東縣計(jì)劃生育服務(wù)站和廣東省計(jì)劃生育科學(xué)技術(shù)研究所經(jīng)陰囊的傳統(tǒng)輸精管低位結(jié)扎術(shù)和經(jīng)腹股溝的輸精管高位結(jié)扎術(shù)術(shù)后各60 例，年齡25 ～41 歲，平均29 歲，手術(shù)至今最長時間8 年，最短時間2 年，根據(jù)相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)和暴露因素在課題組成員單位中隨機(jī)收集入組對象，分為經(jīng)陰囊的傳統(tǒng)輸精管結(jié)扎術(shù)和經(jīng)腹股溝的輸精管高位結(jié)扎術(shù)術(shù)后對象。將經(jīng)陰囊的傳統(tǒng)輸精管低位結(jié)扎術(shù)術(shù)后對象定為低位結(jié)扎組，經(jīng)腹股溝的輸精管高位結(jié)扎術(shù)術(shù)后對象定為高位結(jié)扎組。

1.2 納入條件

輸精管結(jié)扎術(shù)術(shù)后患者：（1）施行手術(shù)二年（含二年）以上；（2）排除性傳播性疾?。唬?）排除性功能、射精功能障礙。

1.3 設(shè)備

ELX-800 酶標(biāo)儀、8-羥基脫氧鳥苷（8-OhdG）特異性單克隆抗體試劑盒。

1.4 方法

用ELX-800 酶標(biāo)儀通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中8-OhdG 濃度。本課題通過臨床實(shí)驗(yàn)研究對經(jīng)陰囊的傳統(tǒng)輸精管結(jié)扎術(shù)和經(jīng)腹股溝的輸精管高位結(jié)扎術(shù)術(shù)后對象，隨機(jī)收集各60 例，空腹抽取外周靜脈血及手淫取精，2000r/min 離心10min，留取血清及精漿，-80℃冰箱保存，進(jìn)行臨床試驗(yàn)研究，獲得各組人群中的外周靜脈血以及精漿中8-OHdG相關(guān)水平的參數(shù)，了解不同術(shù)式輸精管結(jié)扎術(shù)術(shù)后對象8-OHdG 與并發(fā)癥的相互關(guān)系，從而探索導(dǎo)致男性不育的可能機(jī)理。試圖探討其與并發(fā)癥發(fā)生之間的相互關(guān)系，從DNA 氧化損傷水平進(jìn)行研究，期望完善對不同術(shù)式輸精管結(jié)扎術(shù)的臨床應(yīng)用。

對不同術(shù)式輸精管結(jié)扎術(shù)術(shù)后對象進(jìn)行外周靜脈血以及精漿中的8-OHdG 檢測的研究，期望獲得相關(guān)人群的外周靜脈血以及精漿中8-OHdG 的相關(guān)水平。從分子生物學(xué)水平探討不同術(shù)式減少輸精管結(jié)扎術(shù)術(shù)后并發(fā)癥的相關(guān)機(jī)制。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

數(shù)據(jù)整理后采用雙人雙機(jī)錄入，所有數(shù)據(jù)采用SPSS13.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料進(jìn)行x2檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用t 檢驗(yàn)，P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 精液常規(guī)

所有對象精液常規(guī)均顯示無精子存在，證明輸精管結(jié)扎手術(shù)成功。

2.2 外周靜脈血以及精漿中的8-OhdG水平比較

高位結(jié)扎術(shù)術(shù)后對象外周靜脈血中8-羥基脫氧鳥苷的水平低于低位結(jié)扎術(shù)術(shù)后對象，差異比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05）；高位結(jié)扎術(shù)術(shù)后對象精漿中8-羥基脫氧鳥苷的水平低于低位結(jié)扎術(shù)術(shù)后對象，比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；外周靜脈血以及精漿中的8-OHdG 水平比較，見表1。

表1 兩組對象外周靜脈血以及精漿中的8-OhdG水平比較（

表1 兩組對象外周靜脈血以及精漿中的8-OhdG水平比較（

組別 8-OhdG（ng/mL）血清 精漿高位結(jié)扎 324.16±102.71 129.12±213.24低位結(jié)扎 422.86±197.67 314.78±168.43 t 7.86 8.39 P ＜0.05 ＜0.05

2.3 兩組術(shù)后并發(fā)癥比較

高位結(jié)扎術(shù)術(shù)后對象術(shù)后并發(fā)癥的發(fā)生低于低位結(jié)扎術(shù)術(shù)后對象，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P ＜0.05）,兩見表2。

表2 兩組對象術(shù)后并發(fā)癥的比較[n（%）]

3 討論

分子生物學(xué)的研究發(fā)現(xiàn)，人類DNA 分子中的鳥嘌呤堿基受到活性氧自由基如羥自由基、單線態(tài)氧等攻擊后，其第8 位C 原子容易結(jié)合-OH 而產(chǎn)生一種氧化性加合物8_羥基脫氧鳥苷（8-hydroxy-2'-deoxyguanine，8-OHdG），這種DNA 氧化損傷產(chǎn)物能夠被DNA 修復(fù)酶剪切清除而經(jīng)腎臟隨尿排泄。在已知的大約20 種DNA 氧化產(chǎn)物中，8-OHdG 生成量相對較高，且不受飲食影響，能用靈敏度較高的分析方法檢測，易于檢出。由于其與突變明顯相關(guān)，其含量可以反映機(jī)體的DNA 氧化損傷程度，已成為目前國際上公認(rèn)的一種新型的評價機(jī)體的DNA 氧化損傷和機(jī)體氧化應(yīng)激狀態(tài)的敏感指標(biāo)和生物標(biāo)志物[3]。另外，8-OHdG 如果不被機(jī)體有效清除，會進(jìn)而引起DNA 復(fù)制過程的G-C/A-T 型堿基對配對錯誤而引起基因的點(diǎn)突變以至癌變。

本研究同時使用外周靜脈血以及精漿檢測8-OHdG 水平，結(jié)果顯示：經(jīng)腹股溝的輸精管高位結(jié)扎術(shù)術(shù)后對象外周靜脈血以及精漿中8-羥基脫氧鳥苷的水平均低于經(jīng)陰囊的傳統(tǒng)輸精管低位結(jié)扎術(shù)術(shù)后對象，同時輸精管結(jié)扎高位術(shù)后并發(fā)癥也低于經(jīng)陰囊的傳統(tǒng)輸精管低位結(jié)扎術(shù)術(shù)后對象，表明8-OHdG 水平升高確實(shí)影響術(shù)后并發(fā)癥的發(fā)生；兩組不同術(shù)式術(shù)后對象精漿中8-羥基脫氧鳥苷的水平低于外周靜脈血中的水平，顯示外周靜脈血中8-OHdG 水平敏感于精漿。

國內(nèi)外許多資料表明[4-14]，機(jī)體8-OHdG 含量與癌癥、衰老的發(fā)生、發(fā)展具有一定相關(guān)關(guān)系。因此，從降低8-OHdG 水平出發(fā)，建議采用經(jīng)腹股溝的輸精管高位結(jié)扎術(shù)的手術(shù)方法落實(shí)男性采取避孕機(jī)制，這與本課題組成員之前完成的輸精管高位結(jié)扎術(shù)可以減少輸精管結(jié)扎術(shù)后并發(fā)癥相一致[15]。但是，近年來國內(nèi)外有關(guān)專家學(xué)者研究認(rèn)為8-OHdG水平亦與年齡、性別以及日照、劇烈運(yùn)動、吸煙、飲酒、輻射等生活方式有關(guān)，而且與年齡、紫外線照射時間、吸煙、飲酒、輻射呈現(xiàn)正相關(guān)性關(guān)系[16-25]。加之，采用經(jīng)腹股溝的輸精管高位結(jié)扎術(shù)需要在腹部兩側(cè)腹股溝處出現(xiàn)兩個切口，日后萬一需要行輸精管吻合術(shù)難度大、成功率低。此外日本Seino T[26]、Tamura H[27]等還發(fā)現(xiàn)在體外受精-胚胎移植輔助生殖技術(shù)中精液中的8-OHdG 水平與卵母細(xì)胞受孕率成反比。因此研究外周靜脈血以及精漿中的8-OHdG 水平在對輸精管結(jié)扎術(shù)術(shù)后對象的評估和臨床治療中有著重要意義。因此，建議輸精管結(jié)扎術(shù)采用距離睪丸、附睪較高的位置，不必要一味采用經(jīng)腹股溝的，完全可以選擇經(jīng)陰囊的距離睪丸、附睪有足夠高的位置作為手術(shù)入口，這樣子可以減少機(jī)體8-OHdG 含量，同時降低輸精管結(jié)扎術(shù)術(shù)后并發(fā)癥的發(fā)生。

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