田 魯，胡亞琳，操 軒

(湖北省黃石市中心醫(yī)院腎內科，湖北 黃石 435000)

PNS臨床并不少見，其已成為腎小球疾病中最為常見類型。PNS發(fā)病機制并未十分明確，該病主要因腎小球濾過膜對蛋白等通透性增高，進而致蛋白大量丟失，引起一系列生理及病理變化［1］。PNS以蛋白尿、低蛋白血癥、血脂升高及水腫等為主要臨床表現(xiàn)，其病情進展嚴重影響患者的生活質量，并威脅人民生命健康。隨著臨床研究深入，發(fā)現(xiàn)PAF－AH水平變化與PNS發(fā)生發(fā)展具有密切關聯(lián)，且與激素治療療效具有密切關聯(lián)。血小板活化因子可促進免疫復合物沉積，降低腎小球率過濾及激活炎癥細胞釋放炎性物質，增強濾過膜通透性，PAF－AH為血小板活化因子水解酶，其水平變化對病情進展具有重要意義［2，3］。本研究旨在探討PAF－AH與PNS之間相關性，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料:選擇本科室收治的初治PNS患者48例及同期健康體檢人員30例入選本研究，均經研究對象及家屬知情同意，且符合倫理委員會基本要求。48例PNS患者依據病理類型分為STNS組31例，男16例，女15 例，年齡 2～14 歲，平均(8.2±3.4)歲;NTNS組 17例，男10例，女7 例，年齡3～13 歲，平均(7.8±3.1)歲。48例患者確診后均經激素治療，并觀察6個月，根據其對激素敏感程度分為SSNS組19例，男10例，女 9 例，年齡 2～11 歲，平均(7.9±3.0)歲;SRNS 組15 例，男 9例，女 6 例，年齡 3～13 歲，平均(8.3±3.5)歲;SDNS組14例，男7例，女7例，年齡2～12歲，平均(7.7±3.3)歲。30例健康人員作為對照組，年齡 3～15 歲，平均(8.4±3.5)歲。經分析，STNS 組、NTNS 組、健康對照組之間以及SSNS組、SRNS組、SDNS組、健康對照組之間一般資料如年齡、性別構成等比較無統(tǒng)計學差異，均 P＞0.05.

1.2 診斷標準:①原發(fā)性腎病綜合征診斷標準依據2001年全國兒科腎病組《小兒腎小球疾病的臨床分類、診斷及治療》制定相關診斷標準:大量蛋白尿，24h尿蛋白含量≥50mg/Kg，血漿白蛋白＜30g/L，血漿膽固醇＞5.7mmoL/L，伴有不同程度水腫［4］。②激素敏感診斷標準:激素敏感型激素治療≤8周尿蛋白轉陰;激素耐藥型激素治療8周尿蛋白仍表現(xiàn)未陽性患者;激素依賴型患者對激素敏感，減量治療或者停藥后1個月復發(fā)，且重復兩次以上者［5］。

1.3 病例納入標準:①符合PNS診斷標準;②初治患者，且未應用激素治療;③簽署知情同意。

1.4 病例排除標準:①繼發(fā)性NS;②合并先天性心臟病、腫瘤、嚴重肝功能下降患者;③癲癇等精神病史患者。

1.5 方 法

1.5.1 標本采取:48例PNS患者及30例健康人員均于激素治療前抽取外周血2mL，應用復方枸櫞酸鈉ACD抗凝，靜置，提取上清液，置于－20°C冰箱內保存。

1.5.2 PAF－AH 測定:具體操作嚴格按照 PAF－AH 試劑盒(購自美國Cayman公司)說明書進行，①設置無酶對照孔(空白孔)2孔，加入10ul DTNB及15ul化驗用緩沖液;②設置2孔陽性對照孔，加入10ul DTNB及10ul PAF－AH、5ul化驗用緩沖液;③設置樣品孔，每樣本3孔，加10ul DTNB及10ul樣品、5ul緩沖液，加入PAF－AH且應使每 min增加的吸光度值于 0.01～0.1之間;④加入200ul底物溶液于每孔，均勻震搖30s，混勻;⑤于讀板儀上414處讀取一個時間周期吸光度值(至少5個時間點的值)，兩個時間點最小值測定酶活性;⑥PAF－AH計算:使用酶水解底物顯色法檢測，于分光光度計上讀取不同時間A值，并于讀板儀414出讀取一個周期吸光度值，計算PAF－AH活性。

1.6 觀察指標:①觀察不同類型腎病綜合征患者血小板活化因子水解酶差異;②觀察激素敏感性不同患者血小板活化因子水解酶差異;③分析不同類型原發(fā)性腎病綜合征與血小板活化因子水解酶之間相關性。

1.7 統(tǒng)計學處理:采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析，采用χ2檢驗計數資料，計量資料以(±s)表示，并采取t檢驗，PAF－AH活性與原發(fā)性腎病綜合征關系采取perason相關分析，P＜0.05，統(tǒng)計學差異顯著。

2 結果

2.1 不同類型腎病綜合征患者血小板活化因子水解酶差異分析:STNS組 PAF－AH 活性為(51.9±8.3)umoL·min－1·L－1，均高于 NTNS 組及健康對照組，均P＜0.05;且NTNS組PAF－AH活性高于健康對照組，均 P＜0.05。見表 1。

表1 不同類型腎病綜合征患者血小板活化因子水解酶差異分析(±s)

表1 不同類型腎病綜合征患者血小板活化因子水解酶差異分析(±s)

tSTNS NTNS=6.351;tSTNS對照組 =19.656;tNTNS對照組 =11.754;P＜0.05

組別 例數 PAF－AH(umoL·min－1·L STNS 組 31 51.9±8.3 NTNS 組 17 37.1±6.5對照組 30 17.8±4.7 F 21.896

2.2 激素敏感性不同患者血小板活化因子水解酶差異分析:SSNS 組 PAF－AH 活性為(56.7±8.9)umoL/min·L，均高于 SRNS 組、SDNS 組、對照組，P＜0.05，且SRNS組、SDNS組PAF－AH活性均高于對照組，P＜0.05。見表2。

表2 激素敏感性不同患者血小板活化因子水解酶差異分析(±s)

表2 激素敏感性不同患者血小板活化因子水解酶差異分析(±s)

tSSNS SRNS=4.762;tSSNS SDNS=7.705;tSSNS對照組 =20.009;tSRNS SDNS=3.569;tSRNS對照組=15.414;tSDNS對照組=10.509;P＜0.05

組別 例數 PAF－AH(umoL·min－1·L－1)SSNS 組 19 56.7±8.9 SRNS 組 15 43.7±6.4 SDNS 組 14 35.4±6.1對照組 30 17.8±4.7 F 29.854

2.3 不同類型原發(fā)性腎病綜合征與血小板活化因子水解酶活性之間相關性分析:經perason分析，PAFAH活性與原發(fā)性腎病綜合征之間有明顯相關分析，其中，rSTNS=0.618;rNTNS=0.524;rSSNS=0.717;rSRNS=0.567.;rSDNS=0.327，P＜0.05。

3 討論

原發(fā)性腎病綜合征發(fā)病機制并未明確，可分為STNS及NTNS。目前，臨床主要以STNS多見，病理類型主要為微小病變腎炎，NTNS主要見于學齡期兒童，病理類型主要為非微小病變腎炎［6～8］。PNS嚴重影響患者生活質量，并威脅機體健康。臨床針對PNS，多采取糖皮質激素治療。相關研究表明，不同類型PNS對激素治療反應并不一致，STNS多為激素完全效應，而NTNS多位部分效應，或無反應［9］?；颊邔に刂委熋舾行圆灰恢?，不利于無反應類型患者治療。因此，研究PNS發(fā)病機制及不同類型對激素治療敏感性差異機制極為必要，以期對臨床干預提供可能性指導。

隨著臨床研究深入，發(fā)現(xiàn)血小板活化因子(platelet activating factor，PAF)在PNS疾病進展中起著重要作用［10］。相關研究表明，PAF可促進免疫復合物沉積、降低腎小球率過濾及誘導炎癥細胞腎內浸潤等，增加腎小球基底膜對蛋白的通透性。有報道表明，PAF水平與PNS活動密度具有密切關聯(lián)。PAF－AH可水解PAF，使其失活，對維持PAF機體內水平具有重要作用，因此，PAF－AH水平變化對PNS發(fā)生發(fā)展具有重要意義。相關研究表明，PAF通過改變膜通透性參與PNS進展，其甘油骨架sn－2位置的乙?；鶊F為其生物學活性的重要基團及活性中心，而PAF－AH可水解PAF的sn－2位置的乙?；鶊F，進而降解異常表達的PAF。本研究經測定不同類型PNS患者PAF－AH活性，結果表明，STNS組及NTNS組均高于健康對照組，且STNS組患者高于NTNS組，與國外研究較為一致。PNS患者PAF－AH活性增高，可能因PAF激活PAFAH啟動子相關，導致活性升高。NTNS組PAF－AH活性低于STNS組，導致PAF降解不完善，此可能為NTNS患兒腎臟損傷嚴重，且臨床干預較難取的較佳效果原因之一。本研究進一步測定對激素敏感性不一致患者PAF－AH活性差異，結果表明SSNS組高于SRNS組、SDNS組、對照組，相關研究表明，此可能與激素激活PAF－AH活性相關，導致PAF降解理想，疾病更易控制。SDNS組患者PAF－AH活性低于SSNS組，可能為機體內PAF增高，但PAF－AH活性相對不足，需更多外源性PAF－AH活性才能完全降解，故表現(xiàn)為激素治療仍然敏感，但減量或停藥后病情反復。本研究經perason分析，PAF－AH活性與不同類型原發(fā)性腎病綜合征之間有明顯相關，表明不同類型PNS患者機體內PAF－AH活性不一致。

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